संपर्क: ऑड्रे हू Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ईमेल:audrey.hu@wecistanche.com

कृपया भाग 1 के लिए यहां क्लिक करें

2.4. सीएआई पर निष्कर्षण की स्थिति का प्रभाव

स्तनधारियों में कोलेजन सबसे प्रचुर मात्रा में प्रोटीन है और 1400 अमीनो एसिड से अधिक लंबी ग्लाइ-प्रो-हाइप दोहराने वाली इकाइयों के साथ बाह्य मैट्रिक्स का मुख्य संरचनात्मक घटक है। Collagenase एक एंजाइम है जो कोलेजन के पेप्टाइड बॉन्ड को तोड़ता है जो त्वचा, हड्डियों, टेंडन और लिगामेंट्स का निर्माण करता है। डर्मिस में मौजूद कोलेजन कोलेजिनेज द्वारा विघटित किया जाता है, जिससे त्वचा में झुर्रियां आती हैं और त्वचा की लोच कम हो जाती है; इसलिए, त्वचा की झुर्रियों को रोकने के लिए कोलेजनेज़ की गतिविधि को कम करना आवश्यक है [32,33]। संयुक्त अरब अमीरात की स्थिति का अनुकूलन मूंगफली के खोल के अर्क के सीएआई को अधिकतम करने के लिए किया गया था। तीन अलग-अलग चरों को अनुकूलित करने के लिए कुल 17 रन की आवश्यकता थी और प्रयोगात्मक सेट के तहत प्राप्त सीएआई के प्रयोगात्मक डेटा 25.2 प्रतिशत ~ 92.3 प्रतिशत (तालिका 2) थे। 17 प्रायोगिक रन के आधार पर, प्रयोगात्मक डेटा पर कई प्रतिगमन विश्लेषण लागू करके, प्रतिक्रिया और स्वतंत्र चर तालिका 3 में दिए गए कोडित मापदंडों के संदर्भ में निम्नलिखित द्विघात प्रतिगमन समीकरण से संबंधित थे। फिर, प्रतिगमन गुणांक निर्धारित करने के लिए एनोवा लागू किया गया था। , सांख्यिकीय महत्व, और गणितीय मॉडल निर्धारित करने के लिए। माध्य-वर्ग मानों की गणना प्रत्येक भिन्नता स्रोत के वर्गों के योग को उनकी स्वतंत्रता की डिग्री से विभाजित करके की गई थी, और सांख्यिकीय निर्धारित करने के लिए 95 प्रतिशत confidence स्तर (=0.05) लागू किया गया था। द्विघात मॉडल के विश्लेषण में महत्व। ANOVA के परिणामों ने पुष्टि की कि द्विघात प्रतिगमन समीकरण का R2 0.8862 था और यह कि p-मान 0.0134 था, जो कि सांकेतिक स्तर (p <0.05) से="" कम="" है,="" इस="" प्रकार="" fit="" और="" सांख्यिकीय="" का="" एक="" अच्छा="" मॉडल="" दर्शाता="" है।="" सीएआई="" मूल्यों="" की="" भविष्यवाणी="" के="" लिए="" महत्व।="" प्राथमिक="" अवधि="" में,="" x2="" और="" x3="" ने="" महत्वपूर्ण="" प्रभाव="" दिखाया="" और="" x1x2="" और="" x2x3="" (p=""><0.05) में="" परस्पर="" प्रभाव="" की="" शर्तें="" महत्वपूर्ण="" थीं।="" सीएआई="" उत्पादन="" पर="" संयुक्त="" अरब="" अमीरात="" की="" स्थितियों="" के="" प्रभाव="" की="" पुष्टि="" निम्न="" क्रम="" में="" की="" गई:="" निष्कर्षण="" तापमान="" (पी="0.0236)"> इथेनॉल एकाग्रता (पी=0.0240)> निष्कर्षण समय (पी {{37 }}.8505), इस प्रकार यह दर्शाता है कि निष्कर्षण तापमान और इथेनॉल एकाग्रता का प्रभाव सीएआई पर महत्वपूर्ण था।

चित्र 1c एक गड़बड़ी की साजिश को दर्शाता है जिसमें दो चर तय किए गए हैं और इसने CAI पर एकल चर के प्रभाव की कल्पना की है। सीएआई पर सभी तीन चरों के प्रभाव समान दिखाए गए, और तीन चरों ने महत्वपूर्ण प्रभाव दिखाया और वृद्धि हुई और बाद में सीएआई में कमी आई क्योंकि प्रत्येक स्वतंत्र चर में वृद्धि हुई। हमारे अध्ययन में, द्विघात प्रतिगमन समीकरणों (चित्रा 4) का उपयोग करके सीएआई में दो स्वतंत्र चर की बातचीत की कल्पना करने के लिए 3डी सतह प्रतिक्रिया वक्र विकसित किए गए थे। जब इथेनॉल एकाग्रता को केंद्र बिंदु पर तय किया गया था, तो सीएआई पर निष्कर्षण समय और तापमान के प्रभाव का मूल्यांकन चित्रा 4एमें किया गया था। जैसे-जैसे दो चर एक साथ बदलते गए, CAI बढ़ गया

33.4 मिनट और 76.8 सी और 92.8 प्रतिशत की अधिकतम सीएआई के बाद फिर से घट गया। जैसा कि चित्र 4बी, सी में दिखाया गया है, सीएआई का उच्चतम मूल्य 64.3 प्रतिशत के इथेनॉल सांद्रता पर था, जो बाद में एक क्रमिक घटती प्रवृत्ति को दर्शाता है, जो बताता है कि 64.3 प्रतिशत इथेनॉल से युक्त एक द्विआधारी विलायक एक निष्कर्षण विलायक के रूप में अधिक उपयुक्त है। यह परिणाम पिछले शोध के अनुरूप है जिसमें बताया गया है कि पानी और इथेनॉल के एक द्विआधारी विलायक ने ओरोस्टैचिस जैपोनिका से बायोएक्टिव यौगिकों के निष्कर्षण में पानी की तुलना में अधिक सीएआई दिखाया, जो बताता है कि निकालने में 50 प्रतिशत इथेनॉल अधिक फायदेमंद होगा।त्वचा-सफेद सामग्री [34]। द्विघात प्रतिगमन मॉडल द्वारा अनुमानित मूंगफली के खोल के अर्क का अधिकतम सीएआई 94.5 प्रतिशत था, जो 45.1 मिनट के निष्कर्षण समय, 93.6 डिग्री सेल्सियस के निष्कर्षण तापमान और 42.3 प्रतिशत के इथेनॉल एकाग्रता की शर्तों के तहत प्राप्त किया गया था। हमारे अध्ययन में प्राप्त सीएआई 94.5 प्रतिशत था, जो कि ओह एट अल द्वारा रिपोर्ट किए गए ग्रीन टी के अर्क के 39.4 प्रतिशत और सीएआई मूल्यों के 40.3 प्रतिशत के प्रभावों के दोगुने से अधिक है। [35]।

चित्रा 4. निष्कर्षण समय, निष्कर्षण तापमान, और इथेनॉल एकाग्रता के अनुसार मूंगफली खोल के अर्क के सीएआई के लिए प्रतिक्रिया सतह भूखंड। निष्कर्षण तापमान और निष्कर्षण समय (ए), निष्कर्षण समय और इथेनॉल एकाग्रता (बी), और निष्कर्षण तापमान और इथेनॉल एकाग्रता (सी) के एक समारोह के रूप में सीएआई।

सिस्टांचे हैत्वचासफेदी प्रभाव

2.5. इष्टतम निष्कर्षण शर्तें

एंटीऑक्सीडेंट, त्वचा-सफेदऔर विरोधी शिकन प्रभाव सौंदर्य प्रसाधनों के लिए सभी महत्वपूर्ण कार्य हैं और ऐसी स्थितियां प्राप्त करना आवश्यक है जो संयुक्त अरब अमीरात की स्थितियों को अनुकूलित करने में इन तीन कार्यों को एक साथ अधिकतम कर सकें। चित्र 5 एक अनुकूलन प्रक्रिया दिखाता है जो द्विघात प्रतिगमन समीकरण के माध्यम से प्राप्त समोच्च ग्राफ़ की प्रत्येक इष्टतम स्थिति को ओवरलैप करके RSA (Y1), TAI (Y2) और CAI (Y3) को एक साथ अधिकतम कर सकता है। तीन चरों के अनुकूलन के लिए स्वतंत्र चरों की श्रेणियां 5 के निष्कर्षण समय तक सीमित थीं। 0 ~ 55। 0 मिनट, 26 का निष्कर्षण तापमान। {{1 0}} ~94.0 .C, और इथेनॉल सांद्रता 0.0 प्रतिशत ~99.5 प्रतिशत (तालिका 5)। व्यक्तिगत इष्टतम निष्कर्षण स्थितियों के अनुसार, इष्टतम संयुक्त अरब अमीरात की स्थिति 31.2 मिनट निष्कर्षण समय, 36.6 .C निष्कर्षण तापमान, 93.2 प्रतिशत इथेनॉल एकाग्रता और, उपरोक्त शर्तों के तहत, 74.9 प्रतिशत का आरएसए, 50.6 प्रतिशत का टीएआई, और सीएआई { {28}}.8 प्रतिशत की भविष्यवाणी की गई थी। जब अनुमानित आरएसए, टीएआई और सीएआई मूल्यों की तुलना सत्यापन के लिए प्रयोग से प्राप्त मूल्यों से की गई थी, तो सत्यापन परीक्षण के मूल्य अनुमानित मूल्यों के समान थे, जहां मान 78.2 प्रतिशत, 52.3 प्रतिशत और 87.7 प्रतिशत थे। क्रमश।

चित्रा 5. आरएसए (प्रतिशत), टीएआई (प्रतिशत), और सीएआई (प्रतिशत) के अधिकतमकरण के लिए तीन चर के एक साथ अनुकूलन के लिए समोच्च मानचित्र को सुपरइम्पोज़ करना। इथेनॉल सांद्रता 93.2 प्रतिशत के इष्टतम स्तर पर निर्धारित की गई थी।

तालिका 5. विभिन्न निष्कर्षण स्थितियों में Soxhlet निष्कर्षण (एसई) और अल्ट्रासाउंड-सहायता निष्कर्षण (यूएई) द्वारा प्राप्त मूंगफली खोल निकालने के आरएसए, टीएआई और सीएआई की तुलना।

1 सीसीडी के केंद्र बिंदु के तहत मूंगफली के खोल का अल्ट्रासाउंड-सहायता प्राप्त निष्कर्षण (रन नंबर 15, 16, 17); इष्टतम निष्कर्षण स्थिति के तहत मूंगफली के खोल के 2 अल्ट्रासाउंड-सहायता प्राप्त अर्क।

2.6. एसई और यूएई की तुलना

यूएई की निष्कर्षण प्रभावशीलता की पुष्टि करने के लिए, हम यूएई और सॉक्सलेट निष्कर्षण (एसई) तकनीकों का उपयोग करके उत्पादित मूंगफली के खोल के अर्क के आरएसए, टीएआई और सीएआई की तुलना करते हैं। जब एसई सामान्य एसई शर्तों के तहत 70 .C पर 99.5 प्रतिशत इथेनॉल का उपयोग करके 4 घंटे के निष्कर्षण समय के लिए आयोजित किया गया था, तो आरएसए, टीएआई और सीएआई 75.5 प्रतिशत, 60.2 प्रतिशत और 74.4 प्रतिशत पाए गए थे, जो इष्टतम संयुक्त अरब अमीरात की स्थिति के तहत प्राप्त परिणामों से बहुत अलग नहीं थे। हालांकि, जब एसई की स्थिति यूएई की इष्टतम स्थितियों के बराबर 31.2 मिनट और 93.2 प्रतिशत इथेनॉल के बराबर निर्धारित की गई थी, तो आरएसए, टीएआई और सीएआई में क्रमशः 62.0, 28.3 और 45.6 प्रतिशत की कमी आई, जबकि यूएई की तुलना में इष्टतम परिस्थितियों में। मूंगफली के छिलके से उपयोगी सामग्री के उत्पादन में अल्ट्रासाउंड के लाभ का मूल्यांकन कम विलायक खपत और कम निष्कर्षण समय के कारण उच्च उत्पादकता और औद्योगीकरण के लिए उपयुक्त प्रक्रिया के रूप में किया गया था।

2.7. एमएमपी की एमआरएनए अभिव्यक्ति-3 और टीआरपी-1

स्तनधारी मेलानोसाइट्स में, मेलानोजेनेसिस और कोलेजन हाइड्रोलिसिस क्रमशः टीआरपी और एमएमपी जीन द्वारा नियंत्रित होते हैं, और टीआरपी {0}} और एमएमपी -3 मेलानोजेनेसिस और कोलेजन हाइड्रोलिसिस के नियमन के लिए मुख्य जीन के रूप में जाने जाते हैं। ; इसलिए, बी 16- एफ 0 कोशिकाओं के पूरे सेल लाइसेट्स पर आरटी-पीसीआर विश्लेषण किया गया था और इष्टतम परिस्थितियों में संयुक्त अरब अमीरात से उत्पादित मूंगफली के खोल निकालने का प्रभाव (31.2 मिनट, 36.6 सी, 93.2 प्रतिशत) एमएमपी की एमआरएनए अभिव्यक्ति पर -3 और टीआरपी -1 का अध्ययन किया गया। जैसा कि चित्र 6 में दिखाया गया है, मूंगफली के खोल के अर्क ने एमएमपी -3 और टीआरपी -1 की अभिव्यक्ति को बी 16- एफ 0 कोशिकाओं में महत्वपूर्ण रूप से कम कर दिया, जब जीन अभिव्यक्ति प्रयोगों को मूंगफली के साथ किया गया था। 0~1 मिलीग्राम/एमएल की खोल निकालने की एकाग्रता सीमा। मूंगफली के खोल के अर्क ने एमएमपी -3 और टीआरपी -1 की अभिव्यक्ति को क्रमशः 6.1-गुना और 8.7-गुना, 1.0 मिलीग्राम पर काफी कम कर दिया। /एमएल। इन परिणामों से पता चलता है कि मूंगफली के खोल का अर्क MMP-3 को निष्क्रिय करके MMP-1 को निष्क्रिय करके B16F0 कोशिकाओं में कोलेजन क्षरण को रोकता है और MMP-9 [36] के सहयोग में हस्तक्षेप करता है। मौजूदा अध्ययनों से पता चला है कि पौधों के अर्क के साथ उपचार ने फॉस्फोराइलेटिंग एक्स्ट्रासेलुलर सिग्नल-रेगुलेटेड प्रोटीन किनेज (ईआरके) द्वारा माइक्रोफथाल्मिया-जुड़े ट्रांसक्रिप्शन फैक्टर (एमआईटीएफ) की अभिव्यक्ति को रोक दिया। इस प्रकार, मूंगफली के खोल के अर्क द्वारा मेलेनिन उत्पादन के निरोधात्मक प्रभाव को ईआरके और एमआईटीएफ [37] के अभिव्यक्ति निषेध के माध्यम से टायरोसिनेस गतिविधि के निषेध के लिए जिम्मेदार ठहराया गया है। इस प्रकार, मूंगफली के खोल के अर्क ने टीआरपी -1 और एमएमपी -3 के mRNA अभिव्यक्ति स्तर को कम कर दिया, जो इंगित करता है कि मूंगफली के खोल के अर्क में कोलेजनोलिसिस और मेलानोजेनेसिस पर मजबूत निरोधात्मक गतिविधियाँ होती हैं, जिससे यह त्वचा के लिए एक उत्कृष्ट कॉस्मेटिक सामग्री बन जाती है-सफेदऔर विरोधी शिकन प्रभाव।

चित्र 6. टीआरपी-1 और MMP-3 mRNA की अभिव्यक्ति पर मूंगफली के खोल के अर्क का प्रभाव। बी 16- एफ 0 कोशिकाओं को 24 घंटे के लिए मूंगफली के खोल के अर्क के विभिन्न सांद्रता के साथ इलाज किया गया था। MMP-9 और TRP-1 के mRNA स्तर को RT-PCR (a) का उपयोग करके मापा गया। क्वांटिटी वन सॉफ्टवेयर का उपयोग करके बैंड की तीव्रता का अनुमान लगाया गया और -एक्टिन (* p <0.05) के="" लिए="" सामान्यीकृत="" किया="" गया।="" सभी="" डेटा="" को="" तीन="" प्रतियों="" में="" किए="" गए="" तीन="" अलग-अलग="" प्रयोगों="" के="" औसत="" ओ="" एसडी="" के="" रूप="" में="" व्यक्त="" किया="" जाता="" है।="" एनटी="इलाज" नहीं="" किया="" गया="" नमूना,="" टीआरपी="" की="" मात्रा="" -1="" एमआरएनए="" अभिव्यक्ति="" (ए),="" एमएमपी="" की="" मात्रा="" -3="" एमआरएनए="" अभिव्यक्ति="">

सिस्टैंच फीलिपेस त्वचा को लाभ पहुंचाता है

3. सामग्री और तरीके

3.1. सामग्री और अभिकर्मक

मूंगफली के गोले 2 मार्च 019 में नोंग्युप मार्ट (गोचांग, ​​जियोनबुक, कोरिया) से खरीदे गए थे और 24 घंटे के लिए सूखे ओवन (एफसी 49, लैब हाउस, सियोल, कोरिया) का उपयोग करके गोले को 60 डिग्री सेल्सियस पर सुखाया गया था। शुष्क भार स्थिर रहा। सूखे मूंगफली के छिलकों को एक खाद्य प्रोसेसर (हनिल एचएमएफ -3800, सियोल, कोरिया) का उपयोग करके चूर्णित किया गया और फिर 600 माइक्रोन की छलनी से गुजारा गया। इथेनॉल को सैमचुन केमिकल (95.0 प्रतिशत v/v, सियोल, कोरिया) से खरीदा गया था। फोलिन- सिओकाल्टू अभिकर्मक, गैलिक एसिड (97 प्रतिशत), और क्वेरसेटिन मर्क (केनिलवर्थ, एनजे, यूएसए) से खरीदे गए थे। 2,2-डिपेनिल-1-पिक्रिलहाइड्राज़िल (DPPH), एस्कॉर्बिक एसिड, और 3,4-डायहाइड्रोक्सी-L-फेनिलएलनिन (L-DOPA) सिग्मा-एल्ड्रिच (सेंट लुइस, से खरीदे गए थे। एमओ, यूएसए)। इस प्रयोग में प्रयुक्त अन्य सभी रसायन विश्लेषणात्मक ग्रेड के थे और सिग्मा-एल्ड्रिच से खरीदे गए थे। मिलि-क्यू शुद्धिकरण प्रणाली (मिलिपोर, बर्लिंगटन, वीटी, यूएसए) का उपयोग करके शुद्ध विआयनीकृत पानी द्वारा सभी स्टॉक समाधान तैयार किए गए थे।

3.2. अल्ट्रासाउंड-असिस्टेड एक्सट्रैक्शन और सॉक्सलेट एक्सट्रैक्शन

पीसा हुआ मूंगफली का खोल (1 ग्राम) एक निष्कर्षण बर्तन में रखा गया था, प्रत्येक में 1 0 एमएल विलायक और मिश्रित भंवर मिक्सर (वीएम -10, दाइहान साइंटिfiक कं, लिमिटेड, वोनजू, कोरिया) का उपयोग करके मिलाया गया था। 1 मिनट के लिए अल्ट्रासोनिक एक्सट्रैक्टर (250 W, SD-D250H, Daihan Scientific Co., Ltd., Wonju, कोरिया) में एक बाहरी रेफ्रिजेरेटेड बाथ सर्कुलेटर (CDRC8, Daihan Scientific Co., Ltd., Wonju, कोरिया) एक डिजिटल टाइमर और एक तापमान नियंत्रक के साथ। निष्कर्षण एक डिजिटल टाइमर और एक तापमान नियंत्रक से लैस अल्ट्रासोनिक डिवाइस के साथ किया गया था। 40 kHz की कार्य आवृत्ति पर विभिन्न प्रयोगात्मक अवधियों और तापमानों के लिए नमूना sonicated किया गया था। फिर, अर्क को 10 मिनट (236आर, लैबोजेन, सियोल, कोरिया) के लिए 10, 000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया गया। सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, नमूना मात्रा 5 एमएल तक बनाई गई थी और विश्लेषण से पहले 0.2 माइक्रोन झिल्ली फिल्टर के माध्यम से बदल दी गई थी। Soxhlet निष्कर्षण के लिए, पाउडर मूंगफली के खोल (5 ग्राम) को एक Soxhlet तंत्र में 70 .C के अधिकतम तापमान पर 4 घंटे (8 चक्र) के लिए 99.5 प्रतिशत इथेनॉल का उपयोग करके 100 एमएल के साथ लगातार निकाला गया था। अंगूर के बीज से तेल निकालने में अल्ट्रासाउंड-सहायता निष्कर्षण तकनीक को बहुत प्रभावी दिखाया गया था, तेल और पॉलीफेनॉल दोनों के लिए पारंपरिक निष्कर्षण विधियों की तुलना में अल्ट्रासाउंड का लाभ समान था, क्योंकि कम विलायक के साथ प्राप्त तेल/पॉलीफेनोल्स उपज समान थी। खपत और कम निष्कर्षण समय।

सिस्टैंच ट्यूबोलोसा अर्क

3.3. प्रयोगात्मक परिरूप

प्रयोगात्मक रनों की संख्या को कम करने और कारकों के बीच बातचीत का अध्ययन करने के लिए सीसीडी, एक प्रकार का आरएसएम का उपयोग करके प्रयोगात्मक डिजाइन किया गया था। डिज़ाइन-एक्सपर्ट® सॉफ़्टवेयर 8.0 (स्टेट-ईज़, सिटी, एमएन, यूएसए) का उपयोग प्रयोगों के डिज़ाइन, डेटा विश्लेषण, और बायोएक्टिव यौगिकों के निष्कर्षण को अधिकतम करने के लिए निष्कर्षण स्थितियों के अनुकूलन के लिए किया गया था। एंटीऑक्सीडेंट, त्वचा-सफेद, और मूंगफली के खोल से विरोधी शिकन प्रभाव। प्रयोगों को सीसीडी के अनुसार डिजाइन किया गया था, प्रस्तुत किए गए तीन स्वतंत्र चर की सीमा और केंद्र बिंदु मान प्रारंभिक प्रयोगों (तालिका 1) के परिणामों पर आधारित थे। सीसीडी को मूंगफली के गोले से आरएसए, टीएआई और सीएआई सहित प्रतिक्रियाओं को अधिकतम करने के लिए यूएई की इष्टतम स्थितियों की भविष्यवाणी करने के लिए लागू किया गया था। स्वतंत्र चर के रूप में, चुने गए तीन चर निष्कर्षण समय (X1), निष्कर्षण तापमान (X2) और इथेनॉल एकाग्रता (X3) थे। प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता का अनुमान लगाने के लिए केंद्रीय बिंदुओं पर तीन प्रतिकृति के साथ कुल 17 प्रायोगिक रन उत्पन्न किए गए थे। द्विघात प्रतिगमन मॉडल का उपयोग प्रयोगात्मक डेटा को निर्धारित करने के लिए किया गया था और प्रतिक्रिया चर की भविष्यवाणी करने के लिए लागू किया गया था, जैसा कि समीकरण (1) में दिखाया गया है:

वाई= 0 प्लस 1X1 प्लस 2X2 प्लस 3X3 प्लस 11X12 प्लस 22X22 प्लस 33X32 प्लस 12X1X2 प्लस 13X1X3 प्लस 23X2X3 (1)

जहां Y अनुमानित प्रतिक्रिया है; 0 स्थिरांक (अवरोधन) है; 1, 2, और 3 रैखिक प्रभाव शर्तों के लिए प्रतिगमन गुणांक हैं; 11, 22, और 33 द्विघात प्रभाव पद हैं; और 12, 13, और 23 क्रमशः अंतःक्रियात्मक प्रभाव शब्द हैं। एक प्रतिक्रिया सतह विश्लेषण और एनोवा को मॉडल शर्तों के प्रतिगमन गुणांक और सांख्यिकीय महत्व को निर्धारित करने और प्रयोगात्मक [38] के गणितीय मॉडल को निर्धारित करने के लिए नियोजित किया गया था।

3.4. डीपीपीएच रेडिकल स्कैवेंजिंग गतिविधि (आरएसए)

मूंगफली के खोल के अर्क का RSA परेरा-कारो एट अल द्वारा वर्णित किया गया था। [39]। 0.01 एमएम डीपीपीएच का मेथनॉल (95 प्रतिशत) में घोल तैयार किया गया और 0.25 एमएल पतला अर्क में 1.25 एमएल मिलाया गया। ऊष्मायन के 20 मिनट के बाद यूवी-विज़ स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (UV1650PC, शिमदज़ु, क्योटो, जापान) का उपयोग करके 517 एनएम पर अवशोषण को मापने के लिए आरएसए निर्धारित किया गया था। आसुत जल का उपयोग करके खाली तैयार किया गया था और नीचे के अनुसार आरएसए की गणना की गई थी।

(समीकरण (2)):

3.5. टायरोसिनेस गतिविधि निषेध (टीएआई)

जो एट अल द्वारा सब्सट्रेट के रूप में एल-डोपा का उपयोग करके संशोधित विधि के अनुसार टीएआई का प्रदर्शन किया गया था। [40]। नमूनों को 200 µ एल एल-डोपा और 200 µ एल पोटेशियम फॉस्फेट बफर (पीएच 6.8) और 200 µ एल टायरोसिनेस (125 यू/एमएल) के साथ मिलाया गया और 20 मिनट के लिए 37.सी पर इनक्यूबेट किया गया। यूवी-विज़ स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करके नमूना अवशोषण को 475 एनएम पर मापा गया था और परिणामों की तुलना नियंत्रण से की गई थी। प्रत्येक एकाग्रता के लिए, एंजाइम गतिविधि की गणना बिना किसी अवरोधक के बफर का उपयोग करके परख की तुलना में प्रतिशत के रूप में की गई थी, और टीएआई की गणना निम्न सूत्र के आधार पर की गई थी। (समीकरण (3)):

जहां ABS (नियंत्रण) बफर प्लस कोलेजेनेज का अवशोषण है; एब्स (नमूना) बफर प्लस कोलेजेनेज प्लस नमूना/मानक का अवशोषण है।

3.6. Collagenase गतिविधि निषेध (CAI)

वुन्श और हेनड्रिच [41] के तरीकों को संशोधित करके अर्क के सीएआई का मापन किया गया था। सब्सट्रेट, 4-फेनिलज़ोबेज़ाइलोक्सिलकार्बोनिल-प्रो-लेउ-ग्लाइ-प्रो-आर्ग (एफएएलजीपीए), 1 0 एमएल बफर में 1.2 मिलीग्राम/एमएल में भंग कर दिया गया था और फिर 125 µ एल समाधान जोड़ा गया था और इसके लिए ऊष्मायन किया गया था। 60 मिनट पर 37 .सी. Collagenase को बफर में 0.4 mg / mL में भंग कर दिया गया था, और 75 µL एंजाइम समाधान को बफर समाधान में जोड़ा गया था। एंजाइम-सब्सट्रेट मिश्रण को 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए पानी के स्नान में ऊष्मायन किया गया था और 20 प्रतिशत साइट्रिक एसिड (w/v) के 75 µ l को जोड़कर प्रतिक्रिया को रोक दिया गया था। एथिल एसीटेट के 1.5 एमएल जोड़ने के बाद, एथिल एसीटेट परत को अलग किया गया और अवशोषण को 320 एनएम पर मापा गया। निषेध के प्रतिशत की गणना निम्न सूत्र के अनुसार की गई थी।

w

जहां ABS (नियंत्रण) बफर प्लस कोलेजेनेज का अवशोषण है; एब्स (नमूना) बफर प्लस कोलेजेनेज प्लस नमूना/मानक का अवशोषण है।

3.7. सेल लाइनों का रखरखाव और संवर्धन

मेलानिन-उत्पादक बी16-F0 मेलेनोमा सेल कोरिया सेल लाइन बैंक (KCLB, चोंगनो, सियोल, कोरिया) से प्राप्त किया गया था और इसे Dulbecco के संशोधित ईगल के माध्यम (DMEM, सिग्मा-एल्ड्रिच, सेंट लुइस) में सुसंस्कृत किया गया था। लुइस, एमओ, यूएसए) भ्रूण गोजातीय सीरम (एफबीएस, 10 प्रतिशत, वेल्जीन, ग्योंगसन, कोरिया) और पेनिसिलिन-स्ट्रेप्टोमाइसिन (सिग्मा-एल्ड्रिच, सेंट लुइस, एमओ, यूएसए) के एंटीबायोटिक समाधान के साथ पूरक। कोशिकाओं के ट्रिप्सिनाइजेशन के लिए ट्रिप्सिन-ईडीटीए (गिब्को, ग्रैंड आइलैंड, एनवाई, यूएसए) का उपयोग किया गया था। उपयोग की जाने वाली सभी सामग्रियां सेल कल्चर ग्रेड की थीं।

3.8. रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (RT-PCR)

आरटी-पीसीआर का प्रदर्शन एमएमपी-3 और टीआरपी-1 से जुड़े जीन अभिव्यक्ति स्तरों में परिवर्तन को मापने के लिए किया गया थासफेदऔर एंटी-रिंकल प्रभाव, B16-F0 कोशिकाओं को एक 24-वेल प्लेट में सीरम-मुक्त DMEM में मूंगफली के खोल के अर्क के विभिन्न सांद्रता के साथ इलाज किया गया था, और 24 घंटे के लिए ऊष्मायन किया गया था। . अनुपचारित सेल नियंत्रण को के तहत बनाए रखा गया था

प्रयोग के दौरान परीक्षण किए गए समूह के समान स्थितियां। कोशिकाओं से आरएनए अलगाव AccuPrep® यूनिवर्सल आरएनए एक्सट्रैक्शन किट (बायोनियर, डेजॉन, कोरिया) का उपयोग करके आयोजित किया गया था। पूरक डीएनए को Am-Riert प्लेटिनम cDNA सिंथेसिस मास्टर मिक्स (GenDEPOT, बार्कर, TX, यूएसए) का उपयोग करके संश्लेषित किया गया था। आरटी-पीसीआर विश्लेषण एमआरएनए स्तरों को निर्धारित करने के लिए सीएफएक्स 96 टच पीसीआर सिस्टम (बायो-रेड, हरक्यूलिस, सीए, यूएसए) का उपयोग करके किया गया था। उपयोग किए गए प्राइमर इस प्रकार थे: एमएमपी -3 सेंस, 5/-AGTTTGGTGTCGCGGAGCAC -3/ और एंटीसेंस, 5/- TACATGAGCGCTTCCGGCAC -3/; और टीआरपी{{10}} सेंस, 5/-जीसीटीजीसीएजीजीएजीसीसीटीटीसीटीटीटीसीटीसी- 3/ और एंटीसेंस, 5/-एएजीएसीजीसीटीजीसीएटीजीसीटीजीजीटीसीटी-3/। ऊपर वर्णित प्राइमरों का एक उपयुक्त सेट निम्नलिखित साइकिल चालन स्थितियों का उपयोग करके संबंधित जीनों को बढ़ाने के लिए उपयोग किया गया था: 94 .C 5 मिनट के लिए, इसके बाद 5 एस के लिए 95 सी पर 25 चक्र, 30 एस के लिए 60 सी (एमएमपी के लिए -3 ), और 30 सेकंड के लिए 60 सी (टीआरपी के लिए -1), और 72 सी के लिए 30 एस। पीसीआर उत्पादों को 1 प्रतिशत agarose जेल पर इलेक्ट्रोफोर किया गया था, जो एथिडियम ब्रोमाइड से सना हुआ था, और जेल डॉक टीएम एक्सआर प्लस सिस्टम और क्वांटिटी वन सॉफ्टवेयर 2.0 (बायो-रेड, हरक्यूलिस, सीए, यूएसए) का उपयोग करके कल्पना की गई थी। एक हाउसकीपिंग प्रोटीन, -एक्टिन, का उपयोग लोडिंग नियंत्रण के रूप में इस धारणा के साथ किया गया था कि इन प्रोटीनों की अभिव्यक्ति का स्तर स्थिर रहता है।

सिस्टैंच डेजर्टिकोला हैसफेदऔर विरोधी शिकन प्रभाव

4। निष्कर्ष

इस अध्ययन में, कई उपयोगों के साथ अतिरिक्त मूल्य सामग्री विकसित करने के लिए मूंगफली के गोले के कृषि उपोत्पादों से जैव सक्रिय पदार्थों की वसूली और उपयोग के लिए पूरक दृष्टिकोण को नियोजित किया गया था। सबसे पहले, हमने एंटीऑक्सिडेंट, त्वचा के साथ बायोएक्टिव यौगिकों की निष्कर्षण क्षमता बढ़ाने का प्रयास किया-सफेद, और संयुक्त अरब अमीरात प्रक्रिया को अनुकूलित करके विरोधी शिकन प्रभाव। इसलिए, इस अध्ययन ने संयुक्त अरब अमीरात को त्वचा के साथ जैव सक्रिय यौगिकों के कुशल उत्पादन के लिए नियोजित किया-सफेदऔर मूंगफली के छिलके से विरोधी शिकन प्रभाव और RSA, TAI और CAI को एक साथ अधिकतम करने के लिए सांख्यिकीय-आधारित अनुकूलन लागू किया। संयुक्त अरब अमीरात की स्थितियों को सीसीडी का उपयोग करके अनुकूलित किया गया था और यह पुष्टि की गई थी कि मूंगफली के गोले से बायोएक्टिव यौगिकों के निष्कर्षण में विलायक और एकाग्रता की पसंद पर विचार किया जाना चाहिए। प्रतिक्रिया सतहों को ओवरलैप करके, तीन आश्रित चर के वक्र, 31.2 मिनट का निष्कर्षण समय, 36.6 सी का निष्कर्षण तापमान, 93.2 प्रतिशत की इथेनॉल एकाग्रता को संयुक्त अरब अमीरात की इष्टतम स्थिति के रूप में निर्धारित किया गया था। यह पुष्टि की गई है कि मूंगफली के खोल के अर्क का आरएसए बहुत अधिक है और टीएआई और सीएआई में वृद्धि की उम्मीद की जा सकती है, जो त्वचा के संकेतक हैं-सफेदऔर विरोधी शिकन प्रभाव, क्रमशः। संयुक्त अरब अमीरात की स्थितियों के अनुकूलन ने मूंगफली के गोले में जैव सक्रिय पदार्थों के उत्पादन में वृद्धि की पुष्टि की, औरसफेदऔर मूंगफली के खोल की विरोधी शिकन गतिविधियों को टायरोसिनेस और कोलेजनेज गतिविधि डाउनरेगुलेशन के माध्यम से निकाला जाता है। इसके आधार पर, एमएमपी और टीआरपी के अभिव्यक्ति स्तरों पर मूंगफली के छिलके के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए मूल्यांकन किया गया था कि क्या उनके पास हैसफेदऔर जीन अभिव्यक्ति स्तर पर विरोधी शिकन प्रभाव।सफेदऔर मूंगफली के खोल के अर्क के विरोधी शिकन प्रभावों की पुष्टि mRNA अभिव्यक्तियों के डाउनरेगुलेशन के साथ-साथ MMP-3 और TRP-1 के प्रोटीन अभिव्यक्तियों के निषेध के माध्यम से की गई। इसलिए, मूंगफली के खोल के अर्क को में प्रभावी दिखाया गया हैसफेदऔर प्रोटीन अभिव्यक्ति और जीन स्तर पर शिकन सुधार। संयुक्त अरब अमीरात का उपयोग करते हुए मूंगफली के खोल के अर्क में उच्च एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि और उत्कृष्ट त्वचा होती है-सफेदऔर विरोधी शिकन प्रभाव, मूंगफली के खोल को प्राकृतिक कॉस्मेटिक और खाद्य सामग्री के रूप में काफी संभावनाएं प्रदान करते हैं। इसके अलावा, यह माना जाता है कि पारंपरिक प्रक्रियाओं की तुलना में उच्च उत्पादन उपज और कम प्रसंस्करण लागत को देखते हुए, संयुक्त अरब अमीरात का उपयोग करके बायोएक्टिव यौगिकों के उत्पादन को सौंदर्य प्रसाधन, भोजन और दवा सामग्री के उत्पादन के व्यावसायीकरण प्रक्रिया में लागू किया जा सकता है।

लेखक का योगदान: लेखकों के व्यक्तिगत योगदान को निम्नलिखित के रूप में निर्दिष्ट किया गया है: लेखन- मूल मसौदा तैयार करना, धन प्राप्ति, पर्यवेक्षण, लेखन, संपादन, JWK; सत्यापन, विश्लेषण, कार्यप्रणाली, डीएचजी; जांच, कार्यप्रणाली, डेटा अवधि, संपादन, JWH; विश्लेषण, कार्यप्रणाली, समीक्षा, जेएचके; सभी लेखकों ने पांडुलिपि के प्रकाशित संस्करण को पढ़ लिया है और सहमत हैं।

फंडिंग: इस शोध को कोई बाहरी फंडिंग नहीं मिली।

संस्थागत समीक्षा बोर्ड का वक्तव्य: लागू नहीं।

सूचित सहमति वक्तव्य: लागू नहीं।

डेटा उपलब्धता विवरण: इस अध्ययन में कोई नया डेटा नहीं बनाया गया या उसका विश्लेषण नहीं किया गया। डेटा साझाकरण इस लेख पर लागू नहीं है।

हितों के टकराव: लेखक हितों के टकराव की घोषणा नहीं करते हैं।

नमूना उपलब्धता: यौगिकों के नमूने लेखकों से उपलब्ध नहीं हैं।