भाग II: स्टेज II (उच्च जोखिम)/स्टेज III कोलन कैंसर के रेडिकल रिसेक्शन के बाद प्लीहा और किडनी यांग की कमी वाले मरीजों में आंतों के वनस्पतियों की वितरण विशेषताएं Ⅷ

1 अनुसंधान पृष्ठभूमि

ये तियान्शी ने "क्लिनिकल गाइड मेडिकल केसेस" में प्रस्तावित किया कि "छह क्यूई लोगों को चोट पहुंचाती है, और यह व्यक्ति के अनुसार बदलती है। यिन की कमी वाले लोगों में मजबूत आग होती है, और बुराई शिविर में अधिक बार लौटती है; यांग की कमी वाले लोगों में होती है मजबूत नमी, और बुराई क्यूई को अधिक बार चोट पहुँचाती है।" अर्थात्, यिन की कमी या तीव्र अग्नि वाले लोगों पर आसानी से गर्म और गर्म दुष्ट क्यूई का आक्रमण होता है, जबकियांग की कमी या तीव्र यिन और सर्दीठंड और नम दुष्ट क्यूई से आसानी से प्रभावित होते हैं, जो तथाकथित "समान क्यूई एक दूसरे को आकर्षित करता है"।कीमोथेरेपी दवाएं मानव शरीर की प्लीहा और किडनी को आसानी से नुकसान पहुंचा सकती हैं, जिससे अस्थि मज्जा दमन होता है; इसके आधार पर, यह अनुमान लगाया जा सकता है कि प्लीहा और गुर्दे की कमी वाले लोगों के लिए कीमोथेरेपी दवाओं की संभावना अधिक हो सकती हैप्लीहा और गुर्दे को नुकसान पहुंचाता है, जिसके परिणामस्वरूप अस्थि मज्जा दमन होता है।

इस सिद्धांत के अनुसार कि "जो अंदर है वह बाहर प्रतिबिंबित होना चाहिए" ("डांक्सी शिनचुआन"), एक ही बीमारी के विभिन्न सिंड्रोमों में स्थूल और सूक्ष्म स्तरों पर कुछ समानताएं और अंतर होना चाहिए। क्रोनिक हेपेटाइटिस बी [प्लीहा और पेट नम-गर्मी सिंड्रोम और यकृत अवसाद और प्लीहा कमी सिंड्रोम] वाले रोगियों के आंतों के वनस्पति अनुसंधान में इस अंतर की पुष्टि की गई है।उच्च रक्तचाप यिन सिंड्रोम और यांग सिंड्रोम[2], मधुमेह अपवृक्कता नम-गर्मी सिंड्रोम और गैर-नम-गर्मी सिंड्रोम [3], अल्सरेटिव कोलाइटिस बड़ी आंत नम-गर्मी सिंड्रोम और प्लीहा औरकिडनी यांग कमी सिंड्रोम[4]. आंतों की वनस्पतियां न केवल कोलोरेक्टल कैंसर [5-7] की घटना और विकास से निकटता से संबंधित हैं, बल्कि ट्यूमर के उपचार [8-111 और अस्थि मज्जा दमन [12] के कारण गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल म्यूकोसल क्षति की मध्यस्थता में भी शामिल हो सकती हैं। . तो, क्या कोलन कैंसर के कट्टरपंथी शोधन के बाद प्लीहा और किडनी यांग की कमी वाले मरीजों के आंतों के वनस्पतियों की कुछ विशेषताएं हैं?

यह भाग ट्यूटर टीम द्वारा किए जा रहे नैदानिक ​​​​अनुसंधान "कोलन कैंसर के सहायक कीमोथेरेपी पर प्लीहा और गुर्दे को मजबूत करने के अनुक्रमिक नुस्खे के सहक्रियात्मक प्रभाव और तंत्र पर अध्ययन" पर आधारित है। जिन रोगियों को बृहदान्त्र कैंसर के मूल उच्छेदन के बाद सहायक कीमोथेरेपी प्राप्त होने वाली है, उन्हें बृहदान्त्र कैंसर के मूल उच्छेदन के बाद प्लीहा और किडनी यांग की कमी वाले रोगियों और प्लीहा और किडनी यांग की कमी वाले रोगियों के बीच आंतों के वनस्पतियों में समानता और अंतर का पता लगाने के लिए अनुसंधान वस्तुओं के रूप में उपयोग किया जाता है। , और आंतों के वनस्पतियों के संदर्भ में कोलन कैंसर के मूल उच्छेदन के बाद प्लीहा और किडनी यांग की कमी और बिना प्लीहा और किडनी यांग की कमी वाले लोगों के बीच सूक्ष्म अंतर को प्रकट करने का प्रयास करें।

किडनी यिन और यांग की कमी के लिए नई जड़ी-बूटियाँदौरानकीमोथेरेपी

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2 नैदानिक ​​डेटा और अनुसंधान विधियाँ

2.1 अनुसंधान डिजाइन

यह अध्ययन रोगियों के सामान्य डेटा और टीसीएम सिंड्रोम की जानकारी एकत्र करने के लिए क्रॉस-सेक्शनल अध्ययन की पद्धति को अपनाता हैप्लीहा और गुर्दे यांग की कमीऔर स्टेज II (उच्च जोखिम)/स्टेज III कोलन कैंसर के रेडिकल रिसेक्शन के बाद बिना प्लीहा और किडनी यांग की कमी वाले रोगी; 16s rDNA उच्च-थ्रूपुट अनुक्रमण तकनीक का उपयोग कोलन कैंसर के कट्टरपंथी शोधन के बाद प्लीहा और किडनी यांग की कमी वाले मरीजों में आंतों के वनस्पति वितरण की विशेषताओं का विश्लेषण करने के लिए किया जाता है।

2.2 विषयों का स्रोत

वे मरीज़ जो कोलन कैंसर के रेडिकल रिसेक्शन से गुजरे थे और स्टेज II (उच्च जोखिम)/स्टेज के रूप में निदान किए गए थे और परियोजना उपक्रम इकाई (ज़ियुआन हॉस्पिटल, चाइना एकेडमी ऑफ चाइनीज मेडिकल साइंसेज) में पहली सहायक कीमोथेरेपी से गुजरने वाले थे और

शाखा केंद्र अक्टूबर 2018 से दिसंबर 2020 तक हैं। 31 दिसंबर, 2020 तक, मामले की जानकारी ज़ियुआन अस्पताल, चाइना एकेडमी ऑफ चाइनीज मेडिकल साइंसेज के ड्रग क्लिनिकल ट्रायल डेटा प्रबंधन सिस्टम (इलेक्ट्रिक डेटा कैप्चर, ईडीसी) में दर्ज की गई है।

2.3 नैतिक जानकारी

इस अध्ययन की समीक्षा की गई और यूनिट की मेडिकल एथिक्स कमेटी (अनुमोदन संख्या: ज़ियुआन हॉस्पिटल, चाइना एकेडमी ऑफ चाइनीज मेडिकल साइंसेज 2018XLA048-2) द्वारा अनुमोदित किया गया। विषयों ने अनुसंधान सामग्री और योजना को समझा और उससे अवगत थे, और इस अध्ययन में भाग लेने के लिए स्वेच्छा से सूचित सहमति प्रपत्र पर हस्ताक्षर किए।

2.4 रोग निदान मानदंड

कोलन कैंसर का निदान पीपुल्स रिपब्लिक ऑफ चाइना के स्वास्थ्य मंत्रालय के चिकित्सा प्रशासन विभाग के "चीनी सामान्य घातक ट्यूमर निदान और उपचार मानकों" के नैदानिक ​​मानदंडों को संदर्भित करता है। क्लिनिकल स्टेजिंग अंतरराष्ट्रीय स्तर पर मान्यता प्राप्त टीएनएम स्टेजिंग सिस्टम (कैंसर पर अमेरिकी संयुक्त समिति, एजेसीसी, 8वां संस्करण) को अपनाती है।

2.5 टीसीएम सिंड्रोम निदान मानदंड

टीसीएम सिंड्रोम निदान पारंपरिक चीनी चिकित्सा के राष्ट्रीय प्रशासन की "ग्यारहवीं पंचवर्षीय योजना" की प्रमुख विशेषता - प्रमुख ट्यूमर रोगों के लिए नैदानिक ​​​​निदान और उपचार योजना को संदर्भित करता है। कोलोरेक्टल कैंसर के सामान्य सिंड्रोम प्रकार पांच प्रकार की कमी हैं: यकृत-प्लीहा असामंजस्य, प्लीहा की कमी और क्यूई ठहराव, प्लीहा-किडनी यांग की कमी, लीवर-किडनी यिन की कमी, और क्यूई और रक्त की कमी [13], इस प्रकार है:

(1) यकृत-प्लीहा असामंजस्य सिंड्रोम: पसलियों में खिंचाव और दर्द, पेट में फैलाव और भूख न लगना, अवसाद, पतला मल, या पेट में दर्द और नरम मल, दस्त के बाद दर्द से राहत, और रेशेदार नाड़ी।

(2) प्लीहा की कमी और क्यूई ठहराव सिंड्रोम: पेट और पसलियों में खिंचाव और दर्द, डकार, हिचकी, एसिड का रिसना, अवसाद, भूख न लगना, जीभ पर पतली पीली परत और रेशेदार नाड़ी।

(3) प्लीहा और गुर्दे में यांग की कमी: ठंड का डर, ठंडे अंग, पीला रंग, पीठ दर्द, ठंडा पेट दर्द, पुरानी दस्त, या अपच, या एडिमा और ओलिगुरिया, सफेद और फिसलन भरी कोटिंग के साथ पीली और मोटी जीभ, और गहरी और कमजोर नाड़ी।

(4) लिवर और किडनी में यिन की कमी: चक्कर आना और टिनिटस, चिड़चिड़ापन, भारी सिर और हल्के पैर, पीठ दर्द, बार-बार सपने आना और शुक्राणुनाशक, थोड़ी परत के साथ लाल जीभ, और रेशेदार और बारीक नाड़ी।

(5) क्यूई और रक्त की कमी: थकान, सांस की तकलीफ और आलस्य, पीला या पीला रंग, चक्कर आना, पीले होंठ और नाखून, धड़कन और अनिद्रा, विकृत मल या गुदा आगे को बढ़ाव, पीला जीभ और कमजोर नाड़ी।

2.6 समावेशन और बहिष्करण मानदंड

2.6.1 समावेशन मानदंड

(1) कोलन कैंसर के स्पष्ट रोग निदान वाले रोगी; पैथोलॉजिकल रिसेक्शन मार्जिन नकारात्मक हैं।

(2) टीएनएम चरण III (उच्च जोखिम) और IIIIII।

(3) वे मरीज़ जो कोलन कैंसर के आमूल-चूल परिवर्तन के बाद 6 सप्ताह के भीतर केपओएक्स कीमोथेरेपी प्राप्त करने वाले हैं।

(4) यादृच्छिकीकरण से पहले 30 दिनों के भीतर अन्य चिकित्सीय नैदानिक ​​​​परीक्षणों में कोई भागीदारी नहीं।

(5) आयु 18-75 वर्ष, लिंग सीमित नहीं है; ईसीओजी स्कोर 0-1 है; गर्भवती, स्तनपान कराने वाली या प्रसव उम्र की महिलाएं शामिल होने के लिए पात्र नहीं हैं। प्रसव उम्र की महिलाएं तब तक पात्र नहीं हैं जब तक उनके पास पर्याप्त गर्भनिरोधक न हो।

(6) शरीर के अन्य हिस्सों में कोई घातक ट्यूमर नहीं हुआ है (स्वस्थानी में पूरी तरह से इलाज किए गए गर्भाशय ग्रीवा कार्सिनोमा, त्वचा के बेसल या स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा, या अन्य ट्यूमर को छोड़कर जो सर्जरी से ठीक हो गए हैं और कम से कम 5 के लिए दोबारा नहीं हुए हैं) साल)।

(7) प्रयोगशाला डेटा: रक्त दिनचर्या: डब्ल्यूबीसी 3.5 × 109 / एल से अधिक या उसके बराबर; NEUT 1.5 × 109/L से अधिक या उसके बराबर; पीएलटी 100 × 109/एल से अधिक या उसके बराबर; एचजीबी 90 ग्राम/लीटर से अधिक या उसके बराबर; लीवर और किडनी का कार्य: टीबीआईएल 1.5 × यूएलएन से कम या उसके बराबर; एएसटी, एएलटी 2.5 × यूएलएन से कम या उसके बराबर; Scr 1.5 × ULN से कम या उसके बराबर; सीईए: 0-5.

(8) हस्ताक्षरित सूचित सहमति.

(9) टीसीएम सिंड्रोम भेदभाव में प्लीहा और गुर्दे की यांग की कमी, यकृत और प्लीहा की असंगति, प्लीहा की कमी और क्यूई का ठहराव, यकृत और गुर्दे की यिन की कमी, और क्यूई और रक्त की कमी शामिल है। यकृत और प्लीहा की असामंजस्यता, प्लीहा की कमी और क्यूई का ठहराव, यकृत और किडनी में यिन की कमी, और क्यूई और रक्त की कमी को गैर-प्लीहा और किडनी यांग की कमी के रूप में वर्गीकृत किया गया है।

2.6.2 बहिष्करण मानदंड

(1) जिन रोगियों को शोधकर्ताओं या उपस्थित चिकित्सकों द्वारा निर्धारित किया गया है कि उन्हें केपओएक्स कीमोथेरेपी की आवश्यकता नहीं है।

(2) गंभीर हृदय संबंधी जटिलताओं, सेरेब्रोवास्कुलर जटिलताओं, सक्रिय हेपेटाइटिस और गंभीर यकृत और गुर्दे की शिथिलता वाले रोगी।

(3) कोई भी अस्थिर स्थिति या स्थितियाँ जो रोगियों की सुरक्षा और अध्ययन के अनुपालन को खतरे में डाल सकती हैं, जैसे कि सिज़ोफ्रेनिया और अन्य गंभीर मानसिक बीमारियाँ।

(4) कोलोस्टॉमी के मरीज।

2.7 नमूना संग्रह और परीक्षण

2.7.1 नमूना संग्रह

सहायक कीमोथेरेपी की शुरुआत से पहले, शोधकर्ता विषयों को अध्ययन के महत्व से परिचित कराएंगे, सूचित सहमति फॉर्म पर हस्ताक्षर करेंगे, और समर्पित एमजीआईईज़ी स्टूल नमूना संग्रह किट वितरित करेंगे। प्रथम सहायक कीमोथेरेपी की शुरुआत से 1-2 दिन पहले, विषयों ने नमूना निर्देशों के अनुसार नमूने एकत्र किए और समय पर शोधकर्ताओं को मल के नमूने सौंप दिए।

शोधकर्ताओं ने नमूने लिए, विषयों के नामों की जाँच और सत्यापन किया, नमूना संख्याएँ निर्दिष्ट कीं, और उन्हें परीक्षण के लिए शंघाई मीजी बायोमेडिकल टेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड में पहुँचाया।

2.7.2 आंत्र वनस्पति 16एस आरडीएनए अनुक्रमण प्रक्रिया

(1) डीएनए निष्कर्षण और पीसीआर प्रवर्धन

① कुल डीएनए निकालने के लिए EZNAQ मृदा किट (ओमेगा बायो-टेक, नॉरक्रॉस, जीए, यूएस) का उपयोग करें; डीएनए एकाग्रता और शुद्धता, और डीएनए निष्कर्षण गुणवत्ता का पता लगाने के लिए क्रमशः NanoDrop2000 और 1% agarose जेल वैद्युतकणसंचलन का उपयोग किया गया था।

② पीसीआर के लिए 338F (5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3') और 806R (5'- GGACTACHVGGTWTCTAAT-3') प्राइमर का उपयोग करें ताकि पीसीआर V4 चर क्षेत्र को बढ़ा सके। विशिष्ट प्रक्रिया है:

एक। 3 मिनट, 27 चक्रों के लिए 95 डिग्री पूर्व-विकृतीकरण (95 डिग्री विकृतीकरण → 55 डिग्री एनीलिंग → 72 डिग्री विस्तार)

बी। 10 मिनट के लिए 72 डिग्री विस्तार (पीसीआर उपकरण: एबीआई जीनएएमपीआर9700)।

उनमें से, प्रवर्धन प्रणाली में शामिल हैं: 2 0 μL, 4μL5*FastPfu बफर, 2 μL2.5mM dNTPs, 0.8 μL प्राइमर (5 μM), 0.4 μL फास्टफू पोलीमरेज़ और 10 एनजी डीएनए टेम्पलेट .

(2) इलुमिना मिसेक अनुक्रमण

① पीसीआर उत्पादों को पुनर्प्राप्त करने के लिए 2% एगरोज़ जेल का उपयोग करें, शुद्धिकरण के लिए एक्सीप्रेप डीएनए जेल एक्सट्रैक्शन किट (एक्सीजन बायोसाइंसेज, यूनियन सिटी, सीए, यूएसए) का उपयोग करें, ट्रिस-एचसी1 रेफरेंस और 2% एगरोज़ इलेक्ट्रोफोरेसिस का पता लगाएं;

② पता लगाने और परिमाणीकरण के लिए क्वांटिफ्लोरटीएम-एसटी (पेमरेगा, यूएसए) का उपयोग करें;

③ शुद्ध प्रवर्धित अंशों की पीई 2*300 लाइब्रेरी बनाने के लिए इलुमिना मिसेक प्लेटफॉर्म (इलुमिना, सैन डिएगो, यूएसए) की मानक संचालन प्रक्रियाओं का संदर्भ लें।

पुस्तकालय निर्माण चरण:

एक। "Y"-आकार के एडेप्टर कनेक्ट करें;

बी। एडॉप्टर से स्वयं जुड़े हुए टुकड़ों को स्क्रीन करने और हटाने के लिए चुंबकीय मोतियों का उपयोग करें;

सी। लाइब्रेरी टेम्पलेट को समृद्ध करने के लिए पीसीआर प्रवर्धन का उपयोग करें; डी। एकल-फंसे डीएनए टुकड़े का उत्पादन करने के लिए सोडियम हाइड्रॉक्साइड के साथ विकृतीकरण।

अनुक्रमण के लिए IIlumina के Miseq PE300 प्लेटफ़ॉर्म का उपयोग करें, और कच्चे डेटा को एनसीबीआई डेटाबेस पर अपलोड करें।

(3) डाटा प्रोसेसिंग

मूल अनुक्रमण अनुक्रम को ट्रिमोमैटिक सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके गुणवत्ता नियंत्रित किया गया था और फ़्लैश सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके निम्नानुसार जोड़ा गया था:

① 50बीपी विंडो सेट करें। यदि विंडो में औसत गुणवत्ता मान 20 से कम है, तो विंडो के सामने के सिरे को काट दें।

आधार के बाद सभी अनुक्रमों को हटा दें, और फिर गुणवत्ता नियंत्रण के बाद 50 बीपी से कम लंबाई वाले अनुक्रमों को हटा दें;

② ओवरलैप किए गए आधारों के अनुसार दोनों सिरों पर अनुक्रमों को विभाजित करें। स्प्लिसिंग के दौरान ओवरलैप के बीच अधिकतम बेमेल दर 0.2 है, और लंबाई 10 बीपी से अधिक होनी चाहिए।

③ अनुक्रम के दोनों सिरों पर बारकोड और प्राइमर के अनुसार अनुक्रम को प्रत्येक नमूने में विभाजित करें। 97% [14] की समानता पर अनुक्रमों को ओटीयू (ऑपरेशनल टैक्सोनोमिक इकाइयों) में क्लस्टर करने के लिए यूपीआरएसई सॉफ्टवेयर (संस्करण 7.1) का उपयोग करें, और क्लस्टरिंग प्रक्रिया के दौरान एकल अनुक्रम और चिमेरा को हटा दें। प्रत्येक अनुक्रम के लिए प्रजातियों के वर्गीकरण को एनोटेट करने के लिए RDPclassifier (http://rdp.cme.msu.edu/) का उपयोग करें।

2.8 सांख्यिकीय विश्लेषण

(1) SPSS26.0 का उपयोग बेसलाइन डेटा पर सांख्यिकीय विश्लेषण करने के लिए किया गया था। मात्रात्मक डेटा को माध्य ± मानक विचलन (x ± s) के रूप में व्यक्त किया गया था। समूहों के बीच तुलना के लिए, सामान्य रूप से वितरित डेटा के लिए टी-परीक्षण का उपयोग किया गया था; गैर-पैरामीट्रिक परीक्षण का उपयोग गैर-सामान्य रूप से वितरित डेटा के लिए किया गया था; और गणना डेटा के लिए ची-स्क्वायर परीक्षण का उपयोग किया गया था। पी<0.05 was considered statistically significant.

(2) जैव सूचना विज्ञान विश्लेषण: प्रमुख बायोटेक क्लाउड प्लेटफॉर्म https://cloud.magorbio.com का उपयोग प्रजातियों की व्याख्या और मूल्यांकन, प्रजातियों की संरचना विश्लेषण, नमूना तुलना विश्लेषण, प्रजातियों के अंतर विश्लेषण आदि करने के लिए किया गया था।

3 परिणाम

3.1 बुनियादी जानकारी

A total of 32 subjects were included in the study for analysis, including 11 patients with spleen and kidney yang deficiency and 21 patients without spleen and kidney yang deficiency. The specific age, gender and primary site of the disease are shown in Tables 2-1, 2-2 and 2-3. There was no statistical difference between the two groups in terms of age, gender composition and distribution of primary sites of colon cancer (P> 0.05).

तालिका 2-1 दो समूहों में रोगियों का आयु वितरण (x±s) (वर्ष)

3.2 जैव सूचना विश्लेषण परिणाम

3.2.1 अल्फा विविधता विश्लेषण

Sobs index, ace index, chao index, shannon index, simpson index, etc. are commonly used measurement indicators of Alpha diversity. Among them, the first three are used to evaluate species richness (richness), the Shannon index evaluates species diversity (diversity), and the Simpson index is used to evaluate the evenness of species in the environment (evenness). This study used the Wilcoxon Rank Sum test to perform statistical analysis on the sobs index between groups. The results showed that there was no significant difference in species richness, diversity and evenness between spleen and kidney yang deficiency syndrome and non-spleen and kidney yang deficiency syndrome (P>0.05). (तालिका 2-4, चित्र 2-1)

चित्र 2-1 समूहों के बीच सोब्स इंडेक्स में अंतर

(2) समूहों के बीच सामुदायिक संरचना का विश्लेषण

फ़ाइलम स्तर पर, प्लीहा-किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों के आंतों के वनस्पतियों में शामिल हैं: बैक्टेरॉइडोटा 5 0 .44%, फ़र्मिक्यूट्स 34.51%, प्रोटीनोबैक्टीरिया 10.81%, एक्टिनोबैक्टीरियोटा 1.51%, वेरुकोमाइक्रोबिया 1.78%, अन्य 0.94%;

प्लीहा-किडनी यांग कमी सिंड्रोम के बिना रोगियों के आंतों के वनस्पतियों में शामिल हैं: बैक्टेरॉइडोटा 45.25%, फर्मिक्यूट्स 40.24%, प्रोटीनोबैक्टीरिया 7. 86%, एक्टिनोबैक्टीरियोटा 3.05%, वेरुकोमाइक्रोबिया 2.48%, अन्य 1.13%। यह देखा जा सकता है कि फाइलम स्तर पर, प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह और गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह दोनों के जीवाणु वनस्पतियों पर बैक्टेरोइडेट्स और फर्मिक्यूट्स का प्रभुत्व था, जो कुल बैक्टीरिया का लगभग 85% था। . (चित्र 2-3, चित्र 2-4)

चित्र 2-3 रोगियों के दो समूहों में आंतों की वनस्पति संरचना का फ़ाइलम स्तर बार ग्राफ

चित्र 2-4 फ़ाइलम स्तर पर रोगियों के दो समूहों की आंतों की वनस्पति संरचना का पाई चार्ट

पारिवारिक स्तर पर, प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम (डी) और गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम (एन) वाले रोगियों की आंतों की वनस्पति संरचना का विश्लेषण किया गया था। प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह में शीर्ष 5 जीवाणु प्रजातियों में शामिल हैं: बैक्टेरोइडेसी 37.93%, लैचनोस्पाइरेसी 12.13%, रुमिनोकोकेसी 6.93%, प्रीवोटेलैसी 6.02%, एंटरोबैक्टीरियासी 7.18%; गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह में शीर्ष 5 जीवाणु प्रजातियों में शामिल हैं: बैक्टेरोइडेसी 34.38%, लैचनोस्पाइरेसी 19.27%, रुमिनोकोकेसी 5.15%, प्रीवोटेलैसी 5.71%, सटरेलासी 4.18%। (चित्र 2-5, चित्र 2-6)

चित्र 2-5 पारिवारिक स्तर पर रोगियों के दो समूहों की आंतों की वनस्पति संरचना का हिस्टोग्राम

चित्र 2-6 पारिवारिक स्तर पर रोगियों के दो समूहों की आंतों की वनस्पति संरचना का पाई चार्ट

चित्र 2-7 प्रजातियों के स्तर पर समुदायों के दो समूहों का एनएमडीएस विश्लेषण

3.2.4 लेफ़्से बहु-स्तरीय प्रजाति अंतर विभेदक विश्लेषण

समूहों के बीच प्रजातियों की बहुतायत में अंतर वाली प्रजातियों का और अधिक पता लगाने के लिए, लेफ़से (रैखिक)।

विभेदक विश्लेषण प्रभाव आकार) विश्लेषण का उपयोग समूहों के बीच प्रजातियों के अंतर की पहचान करने के लिए किया जा सकता है। लेफ़से विश्लेषण चरण इस प्रकार हैं:

(1) सभी विशिष्ट प्रजातियों का पता लगाने और समूहों के बीच प्रजातियों की बहुतायत में अंतर के आधार पर महत्वपूर्ण रूप से भिन्न प्रजातियां प्राप्त करने के लिए क्रुस्कल-वालिस (केडब्ल्यू) रैंक योग परीक्षण का उपयोग करें।

(2) विलकॉक्सन रैंक सम परीक्षण का उपयोग चरण (1) में प्राप्त महत्वपूर्ण रूप से भिन्न प्रजातियों का परीक्षण करने के लिए किया जाता है ताकि यह निर्धारित किया जा सके कि क्या सभी उप-प्रजातियां समान वर्गीकरण स्तर पर एकत्रित होती हैं।

(3) अंतिम विभेदक प्रजाति प्राप्त करने के लिए रैखिक विभेदक विश्लेषण (एलडीए) का उपयोग करें।

जैसा कि चित्र 2-8 और 2-9 में दिखाया गया है, क्लॉस्ट्रिडिया (o_क्लोस्ट्रिडिया_यूसीजी_014), क्लॉस्ट्रिडिएसी (f_नोरैंक ओ क्लॉस्ट्रिडिया{ {6}}यूसीजी_014), क्लॉस्ट्रिडियम (जी_नोरैंक एफ नोरैंक ओ क्लॉस्ट्रिडिया_यूसीजी_014), फ्लेवोबैक्टीरिया (ओ_फ्लेवोबैक्टीरिया ), फ्लेवोबैक्टीरियासी (एफ_फ्लेवोबैक्टीरियासी), फ्लेवोबैक्टीरिया (जी_नोरैंक फ्लेवोबैक्टीरियासी), आदि जीवाणु समूह हैं जिनकी प्लीहा और किडनी यांग डेफिसिएंसी सिंड्रोम वाले रोगियों की आंतों में बहुतायत बढ़ जाती है। ये वनस्पतियाँ प्लीहा-किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों और प्लीहा-किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों के बीच अंतर के लिए जिम्मेदार मुख्य वनस्पति हो सकती हैं।

चित्र 2-8 LEFSe बहु-स्तरीय प्रजाति पदानुक्रम वृक्ष

चित्र 2-9 एलडीए विभेदक बार चार्ट

4 चर्चा

आंतों की वनस्पतियां मेजबान की प्रतिरक्षा [16,17] और पोषक तत्व अवशोषण [18,19] से निकटता से संबंधित हैं। पारंपरिक चीनी चिकित्सा का मानना ​​है कि "तिल्ली परिवहन और परिवर्तन को नियंत्रित करती है", "तिल्ली स्पष्ट रूप से ऊपर चढ़ने को नियंत्रित करती है", और "रक्षक पानी और अनाज की भयंकर क्यूई है"। प्लीहा के कार्य पाचन, अवशोषण, उत्सर्जन और बाहरी रोगजनकों के प्रतिरोध के कई पहलुओं को कवर करते हैं। इसलिए, प्लीहा और पेट आंतों के वनस्पतियों से सबसे अधिक निकटता से संबंधित हैं। कई बीमारियों में, प्लीहा की कमी सिंड्रोम और प्लीहा की कमी से संबंधित रोग संबंधी उत्पादों, जैसे नम गर्मी, ठंडी नमी, कफ की गड़बड़ी, आदि और डिस्बिओसिस के बीच संबंध की पुष्टि की गई है। 121-231; प्लीहा पृथ्वी का जिगर की लकड़ी से गहरा संबंध है। हुआंग युआनयू के "फोर सेक्रेड हार्ट सोर्सेज" में कहा गया है, "... जब पृथ्वी कमजोर होती है और लकड़ी तक नहीं पहुंच पाती है, तो लकड़ी क्यूई अवरुद्ध हो जाती है..." हाल के वर्षों में, यकृत अवसाद सिंड्रोम और आंतों के वनस्पतियों के बीच संबंध पर शोध किया गया है। जोर-शोर से विकास हो रहा है. 124251; किडनी यांग डेफ़िसिएंसी सिंड्रोम1261 और आंतों के वनस्पतियों के बीच संबंधों पर भी संबंधित रिपोर्टें हैं। टीसीएम सिंड्रोम और आंतों के वनस्पतियों के बीच संबंध पर शोध पर अधिक से अधिक ध्यान दिया गया है। इस अध्ययन में उन रोगियों को शोध विषय के रूप में लिया गया, जिन्होंने कोलन कैंसर के लिए आमूल-चूल सर्जरी करवाई थी और पोस्टऑपरेटिव सहायक कीमोथेरेपी से गुजरने की योजना बनाई थी। रोगियों को दो समूहों में विभाजित किया गया था: प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम और गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम, और प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों में आंतों के वनस्पतियों की वितरण विशेषताओं का पता लगाया गया था।

परिणामों से पता चला कि एसओबी इंडेक्स, एसीई इंडेक्स, चाओ इंडेक्स, शैनन इंडेक्स, सिम्पसन इंडेक्स इत्यादि के संदर्भ में प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम और गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों के बीच कोई सांख्यिकीय अंतर नहीं था। प्रजातियों की समृद्धि , रोगियों के दो समूहों के आंतों के वनस्पतियों की विविधता और एकरूपता मूल रूप से समान थी।

फ़ाइलम स्तर पर, प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह और गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह में रोगियों के आंतों के वनस्पतियों में बैक्टीरियाइडेट्स, फर्मिक्यूट्स, प्रोटीओबैक्टीरिया, एक्टिनोबैक्टीरिया आदि शामिल थे, जो प्रमुख आंतों के वनस्पतियों के करीब थे। स्वस्थ लोगों की [27,28]। हालाँकि, फर्मिक्यूट्स और बैक्टेरोइडेट्स (एफबीआर) के अनुपात में अंतर था, प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह का एफबीआर 0.68 था और गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम का एफबीआर था। समूह 0.89 है। अध्ययनों में पाया गया है कि एफबीआर में परिवर्तन मोटापे [29], उच्च रक्तचाप [27], मधुमेह [30], चिड़चिड़ा आंत्र सिंड्रोम [31] आदि से जुड़े हैं। एफबीआर शरीर की सूजन की स्थिति से संबंधित हो सकता है। प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह और गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह के बीच एफबीआर में अंतर यह संकेत दे सकता है कि शरीर में अलग-अलग सूजन की स्थिति है।

पारिवारिक स्तर पर, रोगियों के दोनों समूहों की प्रमुख वनस्पतियों में बैक्टेरोएडेट्स, लैचनोस्पाइरेसी, वेरुकोमाइक्रोबियासी और प्रीवोटेलैसी शामिल थे। इसके अलावा, प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों के आंत्र पथ में एंटरोबैक्टीरिया बैक्टीरिया की संख्या अधिक थी, जबकि गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह में सटरेलासी बैक्टीरिया की संख्या अधिक थी। एंटरोबैक्टीरियासी प्रोटीनोबैक्टीरिया फ़ाइलम से संबंधित हैं और मनुष्यों और विभिन्न जानवरों में व्यापक रूप से मौजूद हैं। साथ ही, एंटरोबैक्टीरियासी एक अवसरवादी रोगज़नक़ हो सकता है, और उनके जीवाणुओं की संख्या में वृद्धि चयापचय रोगों, प्रतिरक्षा शिथिलता और अन्य बीमारियों से जुड़ी हो सकती है [32,33]। सटरेलासी भी एक अवसरवादी रोगज़नक़ है [34]। ऑटिज़्म [35], चिड़चिड़ा आंत्र सिंड्रोम [36] और डायरिया [37] के रोगियों की आंतों में सटरेलासी बैक्टीरिया की संख्या में काफी वृद्धि हुई थी।

इसके अलावा, लेफ़्से बहु-स्तरीय प्रजाति अंतर विश्लेषण में पाया गया कि प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों की आंतों में फ्लेवोबैक्टीरियम और क्लोस्ट्रीडियम की प्रचुरता बढ़ गई, और अंतर सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण था। फ्लेवोबैक्टीरियम मुख्य रूप से प्राकृतिक वातावरण में मौजूद है और एक सशर्त रोगज़नक़ भी है। कम प्रतिरक्षा वाले मरीज़ फ्लेवोबैक्टीरियम [38] से संक्रमण के प्रति संवेदनशील होते हैं। इसलिए, यह एक सामान्य बैक्टीरिया है जो अस्पताल में संक्रमण का कारण बनता है [39]। अध्ययनों में पाया गया है कि चिड़चिड़ा आंत्र सिंड्रोम वाले रोगियों की आंतों में फ्लेवोबैक्टीरियम बैक्टीरिया की संख्या कम हो जाती है। क्लोस्ट्रीडियम आंत में पित्त एसिड के चयापचय में शामिल है [40]। इसकी संख्या में परिवर्तन अवसाद [411], चिड़चिड़ा आंत्र सिंड्रोम [42] और कीमोथेरेपी की प्रतिकूल प्रतिक्रियाओं [43] से संबंधित हो सकता है।

5 सारांश

(1) कोलन कैंसर के आमूल-चूल विच्छेदन के बाद, प्लीहा और किडनी यांग की कमी वाले सिंड्रोम वाले रोगियों और प्लीहा और किडनी यांग की कमी वाले सिंड्रोम वाले रोगियों के बीच आंतों के वनस्पतियों की प्रचुरता में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं है।

(2) प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों और प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों के बीच आंतों के एफबीआर में अंतर हो सकता है, और सत्यापन के लिए नमूना आकार को और विस्तारित करने की आवश्यकता है।

(3) विभाग स्तर पर, प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों की आंतों में एंटरोबैक्टीरियासी बैक्टीरिया की संख्या अधिक थी, जबकि गैर-प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम समूह में एंटरोबैक्टीरियासी बैक्टीरिया की संख्या अधिक थी। प्लीहा और किडनी यांग डेफिसिएंसी सिंड्रोम वाले रोगियों में जीनस फ्लेवोबैक्टीरियम और क्लोस्ट्रीडियम के आंतों के बैक्टीरिया की प्रचुरता बढ़ गई थी।

पिछले अध्ययनों में एंटरोबैक्टीरियासी, सार्टोबैक्टीरियासी, फ्लेवोबैक्टीरियम और क्लोस्ट्रीडियम और मायलोस्पुप्रेशन के बीच कोई संबंध नहीं पाया गया है; इस अध्ययन में शामिल नमूना आकार सीमित है, और जिस नैदानिक ​​विषय पर अध्ययन आधारित है उसे अभी तक स्पष्ट नहीं किया गया है। यह मूल्यांकन करना असंभव है कि क्या प्लीहा और किडनी यांग की कमी सिंड्रोम और सहायक कीमोथेरेपी के कारण अस्थि मज्जा दमन के बीच कोई अपरिहार्य संबंध है। अस्थि मज्जा दमन, प्लीहा और किडनी यांग की कमी सिंड्रोम और आंतों के वनस्पतियों के बीच संबंध बाद के अध्ययनों में सामने आना बाकी है।

संदर्भ

[1] ज़ू यूली। प्लीहा और पेट में नमी-गर्मी सिंड्रोम और यकृत अवसाद और प्लीहा कमी सिंड्रोम और मिथाइलेशन-संबंधी प्रोटीन के साथ उनके संबंध के साथ क्रोनिक हेपेटाइटिस बी के रोगियों में आंतों के वनस्पतियों में परिवर्तन। पारंपरिक चीनी चिकित्सा के चेंगदू विश्वविद्यालय, 2019।

[2] चेन योंग। उच्च रक्तचाप के यिन-यांग सिंड्रोम और आंतों की वनस्पति विशेषताओं के बीच सहसंबंध [डी]। फ़ुज़ियान पारंपरिक चीनी चिकित्सा विश्वविद्यालय, 2019।

[3] झाओ किहान। नम-गर्मी सिंड्रोम और गैर-नम-गर्मी सिंड्रोम के साथ मधुमेह अपवृक्कता के बीच आंतों के वनस्पतियों में अंतर [डी]। बीजिंग पारंपरिक चीनी चिकित्सा विश्वविद्यालय, 2020।

[4] चांग बिंगलोंग। बड़ी आंत नम-गर्मी सिंड्रोम और अल्सरेटिव कोलाइटिस में प्लीहा और किडनी यांग कमी सिंड्रोम वाले रोगियों के बीच आंतों के वनस्पतियों में अंतर। बीजिंग पारंपरिक चीनी चिकित्सा विश्वविद्यालय, 2020।

[5] मार्ज़ानो एम, फोसो बी, पियानकोन ई, एट अल। कोलोरेक्टल कैंसर में होस्ट-माइक्रोबायोटा इंटरफ़ेस पर स्टेम सेल हानि [जे]। कर्क राशि (बेसल), 2021, 13(5)।

[6] लियू डब्ल्यू, झांग एक्स, जू एच, एट अल। कोलोरेक्टल नियोप्लासिया के भीतर माइक्रोबियल समुदाय विविधता और कोलोरेक्टल कार्सिनोजेनेसिस के साथ इसका सहसंबंध [जे]। गैस्ट्रोएंटरोलॉजी, 2021 [7] हेओ जी, ली वाई, इम ई। आंत के बीच परस्पर क्रिया कोलोरेक्टल कैंसर [जे] के विकास में माइक्रोबायोटा और सूजन मध्यस्थ। कैंसर (बेसल),2021,13(4)। [8] वांग सी, यांग एस, गाओ एल, एट अल। कार्बोक्सिमिथाइल पचीमैन (सीएमपी) आंतों के म्यूकोसाइटिस को कम करता है और फ्लोराउरासिल-उपचारित सीटी26 ट्यूमर-असर चूहों [जे] में आंतों के माइक्रोफ्लोरा को नियंत्रित करता है। फूड फंक्शन, 2018 ,9(5):2695-2704. [9]गेनारो एससी, लीमा डी सूजा रीस एलएस, रीस एसके, एट अल। प्रोबायोटिक अनुपूरण रासायनिक रूप से प्रेरित कोलोरेक्टल ट्यूमरिन चूहों की आक्रामकता को कम करता है [जे]। जीवन विज्ञान, 2019, 237(116895। [10] गोलखालखाली बी, राजंद्रम आर, पलियानी एएस, एट अल। तनाव-विशिष्ट प्रोबायोटिक (माइक्रोबियल सेल तैयारी) और ओमेगा -3 फैटी एसिड जीवन की गुणवत्ता और सूजन मार्करों को संशोधित करने में कोलोरेक्टल कैंसर के रोगियों में: एक यादृच्छिक नियंत्रित