Pentraxin-3-रीनल इस्किमिया/रीपरफ्यूजन इंजरी के एक स्वाइन मॉडल में मध्यस्थता पूरक सक्रियण

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चियारा डिवेल्ला एट अल

सार

पेंट्राक्सिन जन्मजात प्रतिरक्षा और सूजन में महत्वपूर्ण भूमिकाओं के साथ क्रमिक रूप से संरक्षित पैटर्न मान्यता अणुओं का एक परिवार है, जैसे कि बैक्टीरिया और वायरल संक्रमण के दौरान रोगजनकों का ऑप्सोनाइजेशन। विशेष रूप से, लंबे पेंट्राक्सिन 3 (पीटीएक्स 3) को ठोस अंग प्रत्यारोपण के दौरान संवहनी और ऊतक सूजन के कई पहलुओं को विनियमित करने के लिए दिखाया गया है।

हमारे अध्ययन ने गुर्दे की इस्किमिया / रेपरफ्यूजन (आई / आर) चोट के एक सूअर मॉडल में पूरक सक्रियण के संभावित न्यूनाधिक के रूप में पीटीएक्स 3 की भूमिका की जांच की। हमने प्रदर्शित किया कि पेरिटुबुलर और ग्लोमेरुलर केशिका स्तरों पर I / R चोट-प्रेरित प्रारंभिक PTX3 जमा। कन्फोकल लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी ने सीडी 31 प्लस एंडोथेलियल कोशिकाओं के साथ सह-स्थानीयकरण पीटीएक्स 3 जमा का खुलासा किया। इसके अलावा, PTX3 घुसपैठ करने वाले मैक्रोफेज (CD163), डेंड्राइटिक सेल्स (SWC3a), और मायोफिब्रोब्लास्ट्स (FSP1) से जुड़ा था। विशेष रूप से, हमने पूरक के महत्वपूर्ण पीटीएक्स 3- शास्त्रीय (C1q मध्यस्थता) और लेक्टिन (एमबीएल-मध्यस्थता) मार्गों की मध्यस्थता सक्रियण का प्रदर्शन किया। दिलचस्प बात यह है कि PTX3 एंडोथेलियल कोशिकाओं पर टर्मिनल पूरक परिसर (C5b -9) के सक्रियण के साथ सह-स्थानीयकृत जमा करता है, यह दर्शाता है कि PTX 3- मध्यस्थता पूरक सक्रियण मुख्य रूप से वृक्क संवहनी स्तर पर हुआ। निष्कर्ष में, इन आंकड़ों से संकेत मिलता है कि पूरक-प्रेरित I/R चोट को रोकने के लिए PTX3 एक संभावित चिकित्सीय लक्ष्य हो सकता है।

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परिचय

इस्किमिया-रीपरफ्यूजन (आई/आर) चोट तीव्र . के प्रमुख कारण का प्रतिनिधित्व करती हैगुर्दाचोटप्रत्यारोपण के बाद और पूरक प्रणाली [1, 2] के एक महत्वपूर्ण सक्रियण की विशेषता है। इस परिदृश्य में, एंडोथेलियल कोशिकाएं (ईसी) आई / आर के बाद घातक मरम्मत में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं, जिससे एंडोथेलियल से मेसेनकाइमल संक्रमण (एंडएमटी) [3] के लिए प्रारंभिक फाइब्रोसिस होता है। पुनर्संयोजन चरण के दौरान, पूरक प्रतिरक्षात्मक और भड़काऊ प्रक्रियाओं को व्यवस्थित करता है, विभिन्न प्रतिरक्षा और सूजन संबंधी बीमारियों में योगदान देता है [2-5]। जन्मजात प्रतिरक्षा प्रणाली के विनोदी हाथ के अन्य आवश्यक घटक पेंट्राक्सिन द्वारा दर्शाए जाते हैं जिन्हें संवहनी जीव विज्ञान [6] में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाने के लिए माना जाता है।

पेंट्राक्सिन मल्टीमेरिक घुलनशील प्रोटीन [6] का एक परिवार है जिसे उनकी संरचना के आधार पर छोटे और लंबे परिवारों में वर्गीकृत किया गया है [7]। ये क्रमिक रूप से संरक्षित प्रोटीन तीव्र-चरण प्रभावकारक हैं, जो सूजन की शुरुआत के लिए सेंसर के रूप में काम करते हैं और संक्रमण के दौरान प्लाज्मा में तेजी से वृद्धि करते हैं [8]। लॉन्ग पेंट्राक्सिन 3 (पीटीएक्स3) एक घुलनशील पैटर्न मान्यता अणु है जो जन्मजात प्रतिरक्षा सुरक्षा में महत्वपूर्ण है और पूरक प्रणाली [9-11] को सक्रिय कर सकता है।

विशेष रूप से, PTX3 ने C1q, MBL, Ficolin -2 के साथ जुड़कर शास्त्रीय और लेक्टिन पाथवे सक्रियण को प्रेरित किया और CFH [10–12] के माध्यम से वैकल्पिक मार्ग को प्रभावित करने में सक्षम है।

रक्त प्रवाह (यानी सीआरपी) में अन्य यकृत-उत्पादित पेंट्राक्सिन के विपरीत, पीटीएक्स 3 सूजन की साइट के भीतर निवासी कोशिकाओं द्वारा जारी किया जा सकता है, उदाहरण के लिए मोनोन्यूक्लियर फागोसाइट्स, डेंड्राइटिक कोशिकाएं, फाइब्रोब्लास्ट, और ईसी [9] एक पैरासरीन तरीके से अभिनय करते हैं। [13]। पीटीएक्स3 को न्यूट्रोफिल में तैयार रूप में भी संग्रहित किया जाता है, विशिष्ट कणिकाओं में स्थानीयकृत किया जाता है, और माइक्रोबियल मौएट्स [14] की मान्यता के जवाब में स्रावित किया जाता है। ईसी में, पीटीएक्स 3 की अभिव्यक्ति टीएनएफ- और आईएल -1 द्वारा आसानी से प्रेरित होती है, जो एक प्रोकोआगुलेंट और प्रिनफ्लेमेटरी अवस्था में एक मौन, विरोधी भड़काऊ फेनोटाइप से एक संक्रमण देती है, जिससे माइक्रोवैस्कुलर फ़ंक्शन को दृढ़ता से विनियमित किया जाता है [7, 8 ]. इसी कारण से, PTX3 स्तरों को इस प्रकार वर्णित किया गया हैदीर्घकालिकगुर्दाबीमारी, PTX3 के प्रोटीन स्तर में वृद्धि को GFR गिरावट और हृदय संबंधी जटिलताओं के साथ सहसंबद्ध किया गया है, हालांकि, प्रारंभिक सेटिंग्स में I/R-प्रेरित तीव्र के रूप में PTX3 की भूमिका के बारे में अभी भी बहुत कम जानकारी है।गुर्दाचोट [15, 16]।

गुर्दे की सूजन संबंधी बीमारियों में पीटीएक्स 3 की भूमिका द्विसंयोजक है, एक तरफ से प्रोटीन शास्त्रीय और लेक्टिन मार्गों को सक्रिय कर सकता है जो प्रारंभिक सूजन और चोट को बढ़ावा देता है [10-12]। दूसरी ओर, पीटीएक्स 3 के एन-टर्मिनल डोमेन ने पूरक सक्रियण को ल्यूकोसाइट भर्ती में शामिल किया और ऊतक की मरम्मत को बढ़ावा देने वाले तीव्र गुर्दे की चोट में इंटरस्टिशियल फाइब्रोसिस को रोक दिया [17-20]।

I/R चोट-प्रेरित एक्यूट के पैथोफिज़ियोलॉजी में पूरक एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता हैगुर्दाचोट[21, 22]। वृक्क I/R चोट के एक स्वाइन मॉडल में, हमने शास्त्रीय और लेक्टिन दोनों मार्गों [23] की भागीदारी के साथ EndMT और प्रारंभिक फाइब्रोसिस उत्प्रेरण में पूरक प्रणाली सक्रियण की महत्वपूर्ण भूमिका का प्रदर्शन किया। इसके अलावा, हमने दिखाया कि पुनः संयोजक C 1-INH (rhC1INH) द्वारा इन पूरक मार्गों के चिकित्सीय निषेध ने पूरक बयान में एक महत्वपूर्ण कमी का उत्पादन किया, घुसपैठ करने वाली भड़काऊ कोशिकाओं और ट्यूबलोइंटरस्टीशियल क्षति [23] की भर्ती में कमी के साथ। इन परिणामों की पुष्टि डेलपेच पीओ एट अल [24] द्वारा भी की गई थी; C1q, MASP, और C4d ग्लोमेरुलर और ट्यूबलर डिपोजिशन में एक महत्वपूर्ण मॉड्यूलेशन का आकलन 30 मिनट के बाद के रीपरफ्यूजन के बाद किया गया था, जो शास्त्रीय और लेक्टिन रास्तों का मुकाबला करने के लिए C 1-INH की केंद्रीय भूमिका का संकेत देता है।

इस अध्ययन में, हमने PTX3 के विभिन्न सेलुलर स्रोतों की विशेषता, गुर्दे I / R चोट में प्रारंभिक पूरक सक्रियण की मध्यस्थता में PTX3 की संभावित भागीदारी की जांच की।

परिणाम

पीटीएक्स3 को आई/आर चोट के स्वाइन मॉडल में एंडोथेलियल कोशिकाओं और प्रतिरक्षा घुसपैठ करने वाली कोशिकाओं द्वारा व्यक्त किया जाता है

सबसे पहले, हमने गर्म I / R- प्रेरित गुर्दे की चोट के सूअर मॉडल में PTX3 की उपस्थिति की जांच की। हमने सामान्य ऊतक (चित्रा 1ए) में बहुत सीमित पीटीएक्स3 जमा का अवलोकन किया। I/R चोट के कारण ट्यूबलोइंटरस्टीशियल क्षेत्र (चित्र 1E) में पेरिटुबुलर केशिकाओं (चित्र 1D; तीर), और ग्लोमेरुलर स्तरों (चित्र 1D) में 15min के बाद पहले से ही 15min पर पीटीएक्स3 का फैलाना बयान होता है। पेरिटुबुलर केशिकाओं के स्तर पर पुनर्संयोजन के 1 घंटे बाद भी पीटीएक्स3 जमा का पता लगाया जा सकता था (चित्र 1जी)। अपने पिछले काम [23] में हमने दिखाया कि आई/आर चोट की मुख्य विशेषताएं ट्यूबलर एपिथेलियल सेल एपोप्टोसिस और मोनोसाइट्स, डेंड्राइटिक कोशिकाओं और लिम्फोसाइटों जैसी घुसपैठ करने वाली भड़काऊ कोशिकाओं की भर्ती हैं। फिर भी, नियमित हिस्टोलॉजिकल मूल्यांकन (पूरक चित्रा 1) द्वारा, हमने दिखाया कि 30 मिनट के गर्म इस्किमिया के बाद 15 मिनट के रेपरफ्यूजन-प्रेरित प्रारंभिक ट्यूबल इंटरस्टिशियल क्षति, बड़ी केशिका भीड़ और गुर्दे की ट्यूबल एपिथेलियम के फोकल साइटोप्लाज्मिक टीकाकरण की विशेषता है, बेसल की तुलना में। स्थि‍ति।

पीटीएक्स 3 जमा के सेलुलर स्थानीयकरण को आगे बढ़ाने और भड़काऊ प्रतिक्रिया और चोट के मॉड्यूलेशन में इसके संभावित प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए, हमने डबल-इम्यूनोस्टेनिंग और कन्फोकल माइक्रोस्कोपी विश्लेषण किया। पीटीएक्स3 प्रोटीन अभिव्यक्ति का पता अधिकांश ईसी में पेरिटुबुलर (चित्रा 2ए) और ग्लोमेरुलर (चित्रा 2बी)केशिका स्तर पर पाया गया, पुनर्संयोजन के बाद 15 मिनट।

यह सर्वविदित है कि I/R चोट को जन्मजात और अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं की सक्रियता में वृद्धि की विशेषता है, जिसमें रोगग्रस्त अंग में भड़काऊ सेल तस्करी शामिल है जो प्रतिरक्षा कोशिकाओं और पूरक प्रणाली [25] के माध्यम से चोट को और बढ़ा देती है। हमारे स्वाइन मॉडल में, हमने यह भी देखा, पहले से ही रेपरफ्यूजन के 15 मिनट बाद, एक घने भड़काऊ घुसपैठ बड़े पैमाने पर मैक्रोफेज और डेंड्राइटिक कोशिकाओं से बना होता है जो ट्यूबल-इंटरस्टिशियल क्षेत्र में होता है। हमने पाया कि इन दोनों एंटीजन-प्रेजेंटिंग कोशिकाओं को टी 0 की तुलना में बढ़ी हुई पीटीएक्स 3 अभिव्यक्ति की विशेषता थी क्योंकि हमने सीडी 163 प्लस / पीटीएक्स 3 प्लस (चित्रा 2 ई, 2 एफ, 2 के) और एसडब्ल्यूसी 3 ए प्लस / पीटीएक्स 3 प्लस की बढ़ी हुई संख्या देखी। (चित्रा 2जी, 2एच, 2एल) टी15 पर ट्यूबल इंटरस्टीशियल स्तर पर कोशिकाएं।

PTX3 अभिव्यक्ति I/R चोट में EndMT में योगदान कर सकती है

पिछली टिप्पणियों में, हमने दिखाया कि I/R चोट EndMT [26, 27] के लिए जिम्मेदार थी, जो विशिष्ट एंडोथेलियल मार्करों के नुकसान और फाइब्रोब्लास्ट-विशिष्ट जैसे मेसेनकाइमल मार्करों के लाभ के साथ ईसी द्वारा मेसेनकाइमल फेनोटाइप के अधिग्रहण की विशेषता थी। प्रोटीन 1 (FSP-1), न्यूरोनल कैडरिन (N-Cadherin) और अल्फा-स्मूथ मसल एक्टिन (अल्फा-SMA)। इस प्रकार, हमने जांच की कि क्या चुनाव आयोग द्वारा PTX3 अभिव्यक्ति इस प्रक्रिया को प्रभावित कर सकती है। जैसा कि अपेक्षित था, जब हमने सक्रिय मायोफिब्रोब्लास्ट के मार्कर के रूप में अल्फा-एसएमए अभिव्यक्ति की जांच की, तो हमें अल्फा-एसएमए और पीटीएक्स3 (चित्रा 2सी, 2डी) के बीच कोई सह-स्थानीयकरण नहीं मिला। इसके विपरीत, हमने अवलोकन अवधि (चित्रा 2K-2M) के दौरान ट्यूबलोइन्टरस्टीशियल FSP1 प्लस / PTX3 प्लस मायोफिब्रोब्लास्ट में वृद्धि देखी।

PTX3 जमा पूरक प्रणाली के सक्रियण से जुड़े हैं

अंत में, हमने जांच की कि क्या पीटीएक्स 3 जमा पूरक सक्रियण से जुड़े थे। दरअसल, पेंट्राक्सिन परिवार के अन्य घटकों के साथ, पीटीएक्स 3 शास्त्रीय पूरक मार्ग [7] के सक्रियण को विनियमित कर सकता है। पीटीएक्स 3 और पूरक सक्रियण के बीच संबंध को परिभाषित करने के लिए, हमने पीटीएक्स 3 और टर्मिनल की अभिव्यक्ति का मूल्यांकन करने के लिए डबल-लेबल इम्यूनोफ्लोरेसेंस का प्रदर्शन किया। पूरक कॉम्प्लेक्स, C5b-9, एक C9-नियोपिटोप के खिलाफ निर्देशित एंटीबॉडी का उपयोग करते हुए। हमने PTX3 और C5b -9 जमा (चित्र 3ए, 3बी) का एक महत्वपूर्ण सह-स्थानीयकरण देखा। पूरक टर्मिनल परिसर को पेरिटुबुलर स्तर पर और साथ ही पेरिटुबुलर केशिकाओं के भीतर एंडोथेलियल सेल परत के साथ स्थानीयकृत किया गया था, जैसा कि हमने पहले [23, 28] प्रदर्शित किया था। चूंकि PTX3 क्लासिक और लेक्टिन रास्तों के माध्यम से पूरक प्रणाली को सक्रिय कर सकता है, इसलिए हमने वृक्क पैरेन्काइमा में C1q और MBL के जमाव का मूल्यांकन किया। दिलचस्प बात यह है कि C1q (चित्र 3E, 3F) और MBL (चित्र 3C, 3D) जमा मुख्य रूप से अंतरालीय और केशिका स्तर (चित्र 3C से 3F) पर पाए गए, जैसा कि पहले वर्णित [23] और PTX3 जमाओं के साथ सहस्थानीयकृत था।

C1-अवरोधक एंडोथेलियल कोशिकाओं पर PTX3 बाइंडिंग में हस्तक्षेप करता है

अपने पिछले काम [23] में हमने दिखाया कि सी 1- अवरोधक प्रशासन ने पूरक बयान में उल्लेखनीय कमी की, घुसपैठ करने वाली भड़काऊ कोशिकाओं की भर्ती में कमी और ट्यूबलोइंटरस्टीशियल क्षति के साथ। इसलिए, हमने rhC 1-INH उपचारित पशुओं में PTX3 अभिव्यक्ति के स्तर की जांच की। हमने पाया कि सी 1-अवरोधक के जलसेक ने पेरिटुबुलर केशिकाओं पर पीटीएक्स3 जमा को कम कर दिया और 15 मिनट पोस्ट-रीपरफ्यूजन (चित्रा 4ए) के बाद अंतरालीय स्तर पर।

इसके अलावा, इस परिकल्पना का समर्थन करने के लिए कि rhC1-INH उपचारित पशुओं में PTX3 जमा की कमी एंडोथेलियल क्षति के निषेध से जुड़ी थी, हमने इन विट्रो प्रयोगों में प्रदर्शन किया और हमने rhC1-INH और PTX3 बाइंडिंग का मूल्यांकन किया सुसंस्कृत चुनाव आयोग सामान्य परिस्थितियों में या सेलुलर तनाव (चित्रा 4 बी) की उपस्थिति में। FACS विश्लेषण से पता चला है कि EC सामान्य परिस्थितियों में rhC1-INH और PTX3 दोनों को बांधता नहीं है। हमारे पिछले अध्ययन [26] के अनुसार, हमने बेसल स्थितियों की तुलना में rhC 1-INH पर H2O2-उत्तेजित ईसी के सेलुलर बंधन में वृद्धि देखी। इसके अलावा, rhC1-INH की अनुपस्थिति में, PTX3 सक्रिय EC को बाँध सकता है। दिलचस्प बात यह है कि जब H2O2-सक्रिय EC को PTX3 और rhC1-INH के साथ जोड़ा गया था, तो हमने देखा कि C1INH PTX3 बाइंडिंग को अवरुद्ध करके EC की रक्षा करने में सक्षम था।

बहस

इस अध्ययन में, हमने गुर्दे I/R चोट के प्रारंभिक चरण में PTX3 बयान और EndMT के विकास में इसके संभावित योगदान का प्रदर्शन किया। दिलचस्प बात यह है कि हमने पाया कि पीटीएक्स 3- की मध्यस्थता वाला पूरक सक्रियण मुख्य रूप से संवहनी स्तर पर होता है, C1q और MBL के साथ सह-स्थानीयकरण, पूरक कैस्केड के शास्त्रीय और लेक्टिन मार्गों के मान्यता अणु।

I/R चोट पूरक सक्रियण, ऑक्सीजन मुक्त रेडिकल्स, और प्रिनफ्लेमेटरी साइटोकिन उत्पादन द्वारा विशेषता एक चिह्नित भड़काऊ प्रतिक्रिया को ट्रिगर करती है, जिसके परिणामस्वरूप संवहनी एंडोथेलियम और परिधीय ल्यूकोसाइट्स [29, 30] की सक्रियता होती है। आई/आर चोट के दौरान, पूरक सक्रियण क्षतिग्रस्त और निष्क्रिय ईसी की सतह झिल्ली पर पूरक घटकों के जमाव की ओर जाता है, साथ ही एनाफिलेटॉक्सिन की पीढ़ी और भड़काऊ प्रक्रिया के प्रवर्धन के साथ [31]। सूजन के दौरान, PTX3 तेजी से बढ़ता है और एंडोथेलियल प्रतिक्रिया को संशोधित करने में केंद्रीय भूमिका निभा सकता है। दरअसल, पीटीएक्स 3 को क्रोनिक सहित कई बीमारियों में संवहनी एंडोथेलियल डिसफंक्शन के संभावित बायोमार्कर के रूप में इंगित किया गया हैगुर्दारोग, प्रीक्लेम्पसिया, और कई संवहनी रोग [7, 16, 17, 32]। हमने यह भी प्रदर्शित किया कि PTX3 अन्य संवहनी जटिलताओं में शामिल है जैसे हेमोडायलिसिस रोगियों में धमनीविस्फार नालव्रण की विफलता [33]। इन टिप्पणियों से पता चलता है कि PTX3 भड़काऊ प्रतिक्रिया और एंडोथेलियल डिसफंक्शन [34] के बीच एक सेतु हो सकता है। इन अध्ययनों के अनुरूप, हमने पीटीएक्स3 जमा को एक एंडोथेलियल स्तर पर 15 मिनट के बाद रिपेरफ्यूजन (चित्रा 2ए, 2बी) के बाद देखा। हमारे परिणामों ने यह भी प्रदर्शित किया कि I/R चोट के प्रारंभिक चरण में, PTX3 myofibroblast मार्कर, FSP -1 (चित्र 2I, 2J) के साथ कोलोकलाइज़ किया गया, लेकिन अल्फा-SMA के साथ नहीं, सक्रिय मायोफिब्रोब्लास्ट (चित्र 2C) द्वारा व्यक्त किया गया मार्कर। 2डी)। एक साथ लिया गया, ये आंकड़े सुझाव दे सकते हैं कि एंडोथेलियल डिसफंक्शन और एंडएमटी प्रक्रिया [35], आई / आर जानवरों [26] में देखी गई, सबसे पहले ईसी में पीटीएक्स 3 को व्यक्त किया गया।

PTX3 और भड़काऊ कोशिकाओं के बीच की कड़ी को व्यापक रूप से मान्यता प्राप्त है। इस पत्र में, हमने विशेष रूप से ल्यूकोसाइट्स के अंतरालीय घुसपैठ में PTX3 के अंतर्निहित प्रभावों पर ध्यान केंद्रित किया है जो PTX3 [36] का एक प्रमुख स्रोत हैं। विशेष रूप से, हमने मैक्रोफेज और डेंड्राइटिक कोशिकाओं को पाया, 15 मिनट के बाद रेपरफ्यूजन के बाद, पीटीएक्स 3 के उच्च स्तर को व्यक्त करते हुए (चित्र 2ई से 2एच)। ये डेटा साक्ष्य के बढ़ते शरीर के साथ हैं जो I / R चोट [23] में प्रारंभिक क्षति की मध्यस्थता में जन्मजात प्रतिरक्षा के लिए एक प्रासंगिक भूमिका का सुझाव देते हैं। I/R चोट के बाद वृक्क ऊतक में पूरक की प्रारंभिक सक्रियता कई भड़काऊ मध्यस्थों की पीढ़ी की ओर ले जाती है जो प्रतिरक्षा कोशिकाओं की भर्ती को बढ़ाते हैं [21, 23, 37, 38]। हाल के अध्ययनों ने पीटीएक्स 3 को नेटवर्क के प्रमुख घटकों में से एक के रूप में पहचाना है जो आई / आर चोट [39] से उत्पन्न भड़काऊ प्रतिक्रिया को व्यवस्थित करता है। I / R चोट के विभिन्न प्रायोगिक मॉडल में, PTX3 विशिष्ट ऊतकों [40, 41] पर दोहरी विपरीत भूमिकाएँ निभा सकता है। PTX3 का प्रारंभिक उत्पादन गुर्दे की क्षति से जुड़ा है क्योंकि यह एंडोथेलियल आसंजन अणुओं और केमोकाइन की प्रारंभिक अभिव्यक्ति को प्रेरित करता है जो स्थानीय घातक भड़काऊ प्रतिक्रिया को तेज करता है।

इसके विपरीत, पीटीएक्स3 का लंबे समय तक स्थानीय उत्पादन अत्यधिक अंग सूजन और शिथिलता को रोकता है [41]।

PTX3 एक पूरक कैस्केड मॉड्यूलेटर है [9, 42]; यह पीटीएक्स3 के प्लियोट्रोपिक गुणों के अनुरूप है, जो जन्मजात प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया [39] के न्यूनाधिक या प्रवर्धक के रूप में पीटीएक्स3 की दोहरी भूमिका को दर्शाता है। प्रारंभ में, PTX3 C1q और MBL [43] को बाइंड करके पूरक को सक्रिय करता है; हालांकि, जल्दी बढ़ी हुई सूजन को लक्ष्य क्षेत्र तक सीमित करने की आवश्यकता है। इसलिए, PTX3, कारक H को भर्ती करके या एंजियोजेनेसिस को रोककर, भड़काऊ प्रतिक्रिया को कम कर सकता है और वृक्क पैरेन्काइमा को भड़काऊ क्षति से संरक्षित करने वाले सक्रियण को पूरक कर सकता है [43]। यद्यपि कृन्तकों में I/R में पूरक सक्रियण मुख्य रूप से ट्यूबलर स्तर [44] पर स्थानीयकृत होता है, पुनर्संयोजन चरण के दौरान, एंडोथेलियम विभिन्न समर्थक भड़काऊ एजेंटों का प्राथमिक लक्ष्य है, जिसमें पूरक मध्यस्थ [2] शामिल हैं। हमने पहले दिखाया था कि आई/आर चोट के स्वाइन मॉडल में और साथ ही डीजीएफ रोगियों में, पूरक प्रणाली की सक्रियता प्रारंभिक चरण में, पेरिटुबुलर केशिकाओं पर, इंटरस्टिटियम के भीतर और ग्लोमेरुलर एंडोथेलियम [23] पर होती है। हमारे डेटा ने 15 मिनट के बाद पुनर्संयोजन (चित्रा 3ए, 3बी) के बाद पीटीएक्स3 प्लस ईसी पर C5b -9 जमा का एक स्पष्ट सह-स्थानीयकरण दिखाया। इसलिए, वृक्क एंडोथेलियम प्रीक्लिनिकल और क्लिनिकल सेटिंग्स दोनों में I/R चोट के प्रारंभिक चरण में पीटीएक्स 3- की मध्यस्थता पूरक सक्रियण का प्रचलित स्थल प्रतीत होता है।

C1q के साथ पेंट्राक्सिन की परस्पर क्रिया और शास्त्रीय पूरक मार्ग के सक्रियण में इसकी भूमिका का अच्छी तरह से वर्णन किया गया है [45-47]। जन्मजात प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं के संदर्भ में, PTX3 विभिन्न पूरक घटकों को बांध सकता है और पूरक सक्रियण को संशोधित कर सकता है [43, 48]। PTX3 C1q बाइंडिंग [49] द्वारा पूरक को सक्रिय करता है। पशु मॉडल में हमारे परिणामों ने स्पष्ट रूप से प्रदर्शित किया कि PTX3 C1q (चित्र 3E, 3F) के साथ बातचीत करके शास्त्रीय मार्ग सक्रियण का मध्यस्थता कर सकता है। इसके अलावा, पीटीएक्स3 पूरक के लेक्टिन मार्ग को भी संशोधित करता है, जैसा कि चित्र 3सी, 3डी में दिखाया गया है। MBL अपने कोलेजन-जैसे डोमेन [45] के माध्यम से PTX3 को बांधता है और MBL/PTX3 कॉम्प्लेक्स C1q की भर्ती करता है और लक्ष्य सेल सतहों पर C3 और C4 जमा करता है।

कुल मिलाकर, ये परिणाम मध्यस्थता में PTX3 की केंद्रीय भूमिका का सुझाव देते हैंगुर्दाआई/आर चोट में क्षति, जो गुर्दे की आई/आर चोट में पूरक-निर्देशित उपचारों के लिए महत्वपूर्ण प्रभाव डाल सकती है।

हमारे पिछले अध्ययन [26] में, हमने C1-INH के एक पुनः संयोजक रूप का उपयोग करके ईसी सक्रियण की मध्यस्थता में पूरक की भागीदारी की जांच की, जो शास्त्रीय और लेक्टिन पूरक मार्ग (C1r, C1 s) के प्रोटीज का एक प्रबल अवरोधक है। और एमएएसपी 2)। उसी पशु मॉडल में, हमने दिखाया (चित्र 4ए) कि rhC1INH द्वारा दोनों मार्गों के चिकित्सीय निषेध ने पेरिटुबुलर केशिकाओं पर PTX3 जमा को कम कर दिया और 15 मिनट के बाद रेपरफ्यूजन के बाद अंतरालीय स्तर पर। ईसी (चित्रा 4बी) पर इन विट्रो परिणामों के साथ पुष्टि किए गए इन आंकड़ों ने हमें यह अनुमान लगाने के लिए प्रेरित किया कि rhC1INH PTX3 बाइंडिंग को अवरुद्ध करने पर क्षतिग्रस्त ईसी की रक्षा कर सकता है। साहित्य में, एंडोथेलियल आसंजन अणुओं के लिए सी 1- आईएनएच के बंधन के बारे में सबूत है, जो सक्रिय एंडोथेलियम पर व्यक्त किया जाता है, विशेष रूप से पी और ई-चयनकर्ता [50, 51]। ईसी पर यह बंधन सूजन के दौरान एंडोथेलियल-ल्यूकोसाइट बातचीत में हस्तक्षेप कर सकता है और यह एक अन्य महत्वपूर्ण विरोधी भड़काऊ तंत्र का प्रतिनिधित्व करता है [50, 51]। इसलिए, हमने अनुमान लगाया कि rh-C1INH सक्रिय EC को बाँध सकता है और पूरक सक्रियण और भड़काऊ प्रक्रिया के स्थानीय विनियमन की मध्यस्थता करता है। हमारे पिछले अध्ययनों में, हमने I / R चोट और अन्य प्रतिरक्षा-मध्यस्थता वाले गुर्दे की बीमारियों [38, 52-54] में पूरक की भागीदारी का प्रदर्शन किया है। इस पशु मॉडल में पूरक सक्रियण के तंत्र मानव सेटिंग में अपेक्षित डेटा की व्याख्या के लिए महत्वपूर्ण प्रभाव डाल सकते हैं। पूरक-सक्रियण [36, 54] की ओर लक्षित चिकित्सीय हस्तक्षेपों को सफलतापूर्वक विकसित करने के लिए, नैदानिक ​​​​परिस्थितियों में जो होता है, उसके सापेक्ष सुअर डेटा की वैधता स्थापित करना आवश्यक है। चूंकि यह शोध अवलोकन संबंधी अध्ययनों तक सीमित है, इसलिए पीटीएक्स3 और पूरक के बीच परस्पर जुड़े तंत्र को चित्रित करने के लिए और प्रयोगों की आवश्यकता है जो नई चिकित्सीय रणनीतियों को उजागर कर सकते हैं। उपरोक्त परिणामों से, हमारा डेटा इस परिकल्पना का समर्थन करता है कि PTX3 पूरक-मध्यस्थता I / R चोट के कई पहलुओं को विनियमित कर सकता है जिससे संभावित चिकित्सीय लक्ष्य का प्रतिनिधित्व होता है।

सामग्री और तरीके

गुर्दे I/R चोट सुअर मॉडल

वृक्क I/R चोट के पशु मॉडल को पहले वर्णित [23] के रूप में विकसित किया गया था। स्वास्थ्य मंत्रालय की नैतिक समिति द्वारा अनुमोदन के बाद, 4-महीने की मादा बड़े सफेद सूअर (n=8, n=4 समूह के लिए, 20 kg) सामान्य संज्ञाहरण के तहत प्रयोगात्मक खुली शल्य प्रक्रिया। संज्ञाहरण के शामिल होने से पहले जानवरों ने 24 घंटे तक उपवास किया। इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम, हृदय गति, ऑक्सीजन की हीमोग्लोबिन संतृप्ति, श्वसन गैस की संरचना, श्वसन दर, ज्वार की मात्रा, वायुमार्ग का दबाव, सिस्टोलिक धमनी रक्तचाप और केंद्रीय शिरापरक दबाव की लगातार निगरानी की जाती थी और स्वचालित रूप से रिकॉर्ड किया जाता था (ओमेडा मॉड्यूलस सीडी; डेटेक्सओमेडा, हेलसिंकी, फिनलैंड) . बाईं वृक्क धमनी और शिरा को अलग कर दिया गया था और एक पोत लूप को वृक्क धमनी के चारों ओर एक समकोण क्लैंप के साथ तैनात किया गया था। इस्किमिया (T0) से पहले एक गुर्दे की बायोप्सी की गई थी। फिर, इस्केमिक चरण को पोत लूप पर खींचकर (30 मिनट) प्रेरित किया गया था। कई बायोप्सी तो 15, 30, और 60 मिनट पर reperfusion के बाद किया गया; सर्जिकल प्रक्रिया के 24 घंटे बाद जानवरों की बलि दी गई। प्रत्येक बायोप्सी नमूने का एक हिस्सा तुरंत इष्टतम काटने के तापमान (टिशूटेक, पिट्सबर्ग, पीए) माध्यम में स्नैप-फ्रोजन था और तरल नाइट्रोजन में संग्रहीत किया गया था। एक अन्य भाग को 12 घंटे के लिए बफर्ड फॉर्मेलिन (4 प्रतिशत) में तय किया गया था और मानक प्रक्रियाओं का उपयोग करके पैराफिन में एम्बेड किया गया था।

माइक्रोस्कोपी अध्ययन

गुर्दे की बायोप्सी से पैराफिन-एम्बेडेड गुर्दे के नमूनों का उपयोग पारंपरिक ऊतकीय धुंधला (एच एंड ई, आवधिक एसिड-शिफ) के लिए किया गया था। छवियों को Aperio ScanScope CS2 डिवाइस (Aperio Technologies, Vista, CA, USA) द्वारा अधिग्रहित किया गया था। दो पर्यवेक्षकों (सीडी, एमआर) द्वारा गुणात्मक विश्लेषण का उपयोग करके ट्यूबल-इंटरस्टिशियल और ग्लोमेरुलर घावों का मूल्यांकन किया गया था जो मूल से अनजान थे

एंटीबॉडी

इस अध्ययन में प्रयुक्त प्राथमिक एंटीबॉडी ने निम्नलिखित एंटीजन को मान्यता दी: पीटीएक्स 3 (एमएनबी 4: पीटीएक्स 3 एन-टर्मिनल डोमेन के खिलाफ प्रत्यक्ष, एक्सिरा लाइफ साइंसेज इन।, लार्सन, स्विटजरलैंड); CD163 (मोनोसाइट्स/मैक्रोफेज, यूएस बायोलॉजिकल, स्वैम्पस्कॉट, एमए); SWC3a (डेंड्रिटिक कोशिकाएं, [55] 74-22-15ए, बीडी बायोसाइंसेज); FSP1 (फाइब्रोब्लास्ट विशिष्ट प्रोटीन 1, Abcam, कैम्ब्रिज, यूके); अल्फा-स्मूथ मसल एक्टिन (सांता क्रूज़ बायोटेक्नोलॉजी इंक।; सांता क्रूज़, सीए, यूएसए); C1q (R9/2, AbDSerotec; किडलिंगटन, यूनाइटेड किंगडम); MBL (3E7: MBL कार्बोहाइड्रेट रिकग्निशन डोमेन, Hycult बायोटेक्नोलॉजी, Uden, नीदरलैंड्स) और C9 नियोएंटीजेन (aE11, Hycult बायोटेक्नोलॉजी) के खिलाफ प्रत्यक्ष। क्रॉस-रिएक्टिविटी को उनके उपयोग से पहले विशिष्ट एंटीबॉडी को पूर्व-इनक्यूबेट करके मान्य किया गया था, मानव पेप्टाइड्स उन्हें बढ़ाने के लिए उपयोग किए जाते थे। पूर्व-ऊष्मायन ने सूअर के ऊतकों पर विशिष्ट धुंधलापन को समाप्त कर दिया।

ऊतक इम्यूनोफ्लोरेसेंस और कंफोकल लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी

OCT माध्यम (टिशू-टेक) में शामिल जमे हुए ऊतक पर PTX3 सिग्नल के लक्षण वर्णन और स्थानीयकरण की जांच की गई। स्लाइड्स को 37 डिग्री सेल्सियस पर 1 घंटे के लिए 5 प्रतिशत खरगोश सीरम के साथ इनक्यूबेट किया गया था। स्लाइड्स को विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ कमरे के तापमान पर 1 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया था। पीबीएस में तीन washes के बाद, स्लाइड्स को उपयुक्त माध्यमिक एंटीबॉडी (एलेक्सा आटा 488 और 555, आणविक जांच, यूजीन, या) के साथ जोड़ा गया था। सभी वर्गों को TO-PRO-3 (आणविक जांच) के साथ उलट दिया गया था। अप्रासंगिक एंटीबॉडी के साथ नकारात्मक नियंत्रण तैयार किए गए थे। Leica TCS SP2 (Leica, Wetzlar, Germany) कन्फोकल लेजर-स्कैनिंग माइक्रोस्कोप का उपयोग करके वर्गों का विश्लेषण किया गया था। घुसपैठ करने वाली कोशिकाओं की संख्या को कम से कम 10 उच्च शक्ति (x630) क्षेत्रों/अनुभाग में दो स्वतंत्र पर्यवेक्षकों द्वारा स्लाइड की उत्पत्ति के लिए अंधा करके मापा गया था। अंतिम गणना दो उपायों का माध्य थी। किसी भी मामले में, इंटरऑब्जर्वर परिवर्तनशीलता 20 प्रतिशत से अधिक नहीं थी।

सेल संस्कृति और प्रवाह साइटोमेट्री विश्लेषण

मानव गर्भनाल नसों की एंडोथेलियल कोशिकाएं (HUVEC, EC) अमेरिकन टाइप कल्चर कलेक्शन (ATCC-LGC Standards, Sesto San Giovanni, इटली) से खरीदी गई थीं। ईसी को उनके अनुशंसित मीडिया, एंडोग्रो (मर्क मिलिपोर, डार्मस्टैड, जर्मनी) में उगाया गया था। ईसी को 1{{10}},000कोशिकाओं/सेमी2 के घनत्व पर चढ़ाया गया था और इसे H2O2 उपचार (3 प्रतिशत, 1 घंटा) से प्रेरित किया गया था। फिर बेसल और उत्तेजित ईसी को दो बार पीबीएस से धोया गया और पीबीएस-ईडीटीए 2 एमएम और ट्रिप्सिन 0.001 × से हटा दिया गया। तब कोशिकाओं को पीबीएस में फिर से जोड़ा गया और क्रमशः पीटीएक्स3 (पुनः संयोजक मानव पीटीएक्स3, सिग्मा-एल्ड्रिच, मर्क, जर्मनी) (1ug/ml) या/और rhC1-INH (Ruconest®, Pharming) (2.5ug) के साथ इनक्यूबेट किया गया। /एमएल) 60 मिनट के लिए। पीबीएस 1X के साथ तीन बार धोने के बाद, कोशिकाओं को प्रवाह साइटोमेट्री (एफएसीएस) बफर (फॉस्फेट-बफर खारा, पीएच 7.2, 0.2 प्रतिशत गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन, और 0.02 प्रतिशत सोडियम एज़ाइड) में फिर से जोड़ा गया और एफसीआर अवरोधक अभिकर्मक (मिल्टनी बायोटेक) के साथ ऊष्मायन किया गया। कमरे के तापमान पर 10 मि. अवरुद्ध करने के बाद, ईसी को खरगोश-विरोधी मानव C1-INH (प्रो। एम। दाहा, लीडेन विश्वविद्यालय, 1//100 कमजोर पड़ने द्वारा प्रदान किया गया) या/और चूहे विरोधी PTX3 (MNB4, Exira Life द्वारा प्रदान किया गया) के साथ जोड़ा गया। विज्ञान में, 1/20 कमजोर पड़ने) 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर और FACS बफर के साथ धोया। फिर, कोशिकाओं को 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर बकरी विरोधी खरगोश आईजीजी पीई (आणविक जांच, 1/100 कमजोर पड़ने) या / विरोधी चूहे आईजीजी एफआईटीसी (आणविक जांच, 1/100 कमजोर पड़ने) के साथ ऊष्मायन किया गया और तीन बार धोया गया। FC500 (बेकमैन कल्टर, ब्रे, सीए, यूएसए) और कलुजा सॉफ्टवेयर के साथ कोशिकाओं का विश्लेषण किया गया। सकारात्मकता का क्षेत्र एक आइसोटाइप-मिलान एमएबी का उपयोग करके निर्धारित किया गया था, और कुल मिलाकर, प्रत्येक नमूने के लिए 104 घटनाओं का अधिग्रहण किया गया था। तीन स्वतंत्र अनुप्रयोग किए गए।

सांख्यिकीय विश्लेषण

डेटा को माध्य ± मानक विचलन (एसडी) के रूप में प्रस्तुत किया जाता है और इसकी तुलना विचरण या युग्मित छात्र टी-टेस्ट के विश्लेषण का उपयोग करके की जाती है, जैसा उपयुक्त हो। अंतर को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना जाता था जब p मान 0.05 से कम थे। स्टेटव्यू सॉफ्टवेयर पैकेज (5.0 संस्करण) (एसएएस इंक। कं, कैरी, एनसी, यूएसए) का उपयोग करके डेटा का विश्लेषण किया गया था। ग्राफपैड प्रिज्म सॉफ्टवेयर 5 का उपयोग करके रेखांकन प्रदर्शित किए गए थे।

लघुरूप

I/R: ischemia/reperfusion; ईसी: एंडोथेलियल कोशिकाएं; पीटीएक्स 3: पेंट्राक्सिन 3; FSP-1: फ़ाइब्रोब्लास्ट-विशिष्ट प्रोटीन 1; एन-कैडरिन: न्यूरोनल कैडरिन; अल्फा-एसएमए: अल्फा-चिकनी मांसपेशी एक्टिन।

लेखक का योगदान

सीडी ने अध्ययन का समन्वय किया, वृक्क वर्गों के इम्यूनोलैबलिंग और कन्फोकल माइक्रोस्कोपी में भाग लिया और पांडुलिपि का मसौदा तैयार किया। एएस और आरएफ ने अध्ययन के डिजाइन में भाग लिया, डेटा विश्लेषण में योगदान दिया, इन विट्रो प्रयोगों में प्रदर्शन किया और पांडुलिपि को गंभीर रूप से संशोधित किया। एमआर और जीएसएन ने हिस्टोपैथोलॉजिकल इमेज विश्लेषण किया। एलएल, एफएस, एएमसी ने इस्किमिया-रीपरफ्यूजन चोट के पशु मॉडल का प्रदर्शन किया और पांडुलिपि को संशोधित करने में मदद की। जीएल, पीडी, और एमबी ने सुअर के मॉडल पर सभी सर्जिकल प्रक्रियाओं को अंजाम दिया और पांडुलिपि को संशोधित करने में मदद की। MRD, P.vdP., C.vK., और FS ने पांडुलिपि को संशोधित किया।

पीपी, ईआर, जीजी, जीएस, और एलजी ने पांडुलिपि को गंभीर रूप से संशोधित किया। जीसी ने नए विश्लेषणात्मक उपकरण प्रदान किए, अनुसंधान को डिजाइन और पर्यवेक्षण किया। सीडी, एएस और आरएफ ने इस अध्ययन में समान रूप से योगदान दिया। सभी लेखकों ने लेख में योगदान दिया और प्रस्तुत संस्करण को मंजूरी दी।

आभार

हम गुर्दे, डायलिसिस और प्रत्यारोपण इकाई, आपातकालीन और अंग प्रत्यारोपण विभाग से क्लाउडिया कर्सी को धन्यवाद देते हैं,

उत्कृष्ट तकनीकी सहायता के लिए बारी विश्वविद्यालय।

हितों का टकराव

लेखक घोषणा करते हैं कि उनके हितों का कोई टकराव नहीं है।

वित्तपोषण

इस अध्ययन को बारी विश्वविद्यालय "एल्डो मोरो", इतालवी स्वास्थ्य मंत्रालय (जीआर 2016- 02362239 "एक ट्रांसक्रिपटॉमिक्स-आधारित दृष्टिकोण की पहचान के लिए भविष्य कहनेवाला कारकों की पहचान और देरी से ग्राफ्ट फ़ंक्शन के लिए चिकित्सीय लक्ष्यों द्वारा समर्थित किया गया था।गुर्दाट्रांसप्लांट प्राप्तकर्ता", बंदो डि राइसरका फाइनलिजाटा 2016, सीडी को इस परियोजना पर छात्रवृत्ति मिली) और फोंडो सोशल यूरोपो, एज़ियोन I.2 "एट्राज़ियोन ई मोबिलिटा इंटरनेज़ियोनेल दे रिसरकोटोरी" - एआईएम -1810057- एएस को दी गई गतिविधि 2

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1. बोनवेंट्रे जेवी, यांग एल। इस्केमिक एक्यूट के सेलुलर पैथोफिज़ियोलॉजीगुर्दाचोट। जे क्लिन इन्वेस्ट। 2011; 121:4210-21.

2. जंग एचआर, रब एच। इस्केमिक एक्यूट में जन्मजात प्रतिरक्षा प्रतिक्रियागुर्दाचोट। क्लिन इम्यूनोल। 2009; 130:41-50.

3. रिकलिन डी, हाजीशेंगलिस जी, यांग के, लैम्ब्रिस जेडी। पूरक: प्रतिरक्षा निगरानी और होमोस्टैसिस के लिए एक प्रमुख प्रणाली। नेट इम्यूनोल। 2010; 11:785-97.

4. थुरमन जेएम, होलर्स वीएम। मानव रोग में वैकल्पिक पूरक मार्ग की केंद्रीय भूमिका। जे इम्यूनोल। 2006; 176:1305–10। पीएमआईडी:16424154

5. फ्रांजिन आर, स्टेसी ए, फिओरेंटिनो एम, स्टेलोन जी, केंटालुप्पी वी, गेसुअलडो एल, कैस्टेलानो जी। सूजन और पूरक प्रणाली: एक्यूट के बीच एक लिंकगुर्दाचोट और क्रॉनिक ग्राफ्ट डैमेज। फ्रंट इम्यूनोल।

2020; 11:734.पीएमआईडी:32457738

6. देबन एल, जेलोन एस, गारलैंडा सी, बोटाज़ी बी, मंटोवानी ए। जन्मजात प्रतिरक्षा में पेंट्राक्सिन: पीटीएक्स 3 से सबक। सेल ऊतक रेस। 2011; 343:237-49.पीएमआईडी:20683616

7. Cieślik P, Hrycek A. Long pentraxin 3 (PTX3) इसकी संरचना, क्रिया के तंत्र और नैदानिक ​​​​निहितार्थ के प्रकाश में। ऑटोइम्यूनिटी। 2012; 45:119–28.पीएमआईडी:21988562

8. कुन्स पी, होलुबकोवा जेड, कोलाकोवा एम, क्रेजेसेक जे। पेंट्राक्सिन 3 (पीटीएक्स 3): भड़काऊ प्रतिक्रिया का एक अंतर्जात न्यूनाधिक। मध्यस्थ सूजन। 2012; 2012:920517.पीएमआईडी:22577258

9. गारलैंडा सी, बोटाज़ी बी, बास्टोन ए, मंटोवानी ए। पेंट्राक्सिन्स इंटरसेंज एट इननेट इम्युनिटी, इंफ्लेमेशन, मैट्रिक्स डिपोजिशन और फीमेल फर्टिलिटी। अन्नू रेव इम्यूनोल। 2005; 23:337–66.115756 PMID:15771574

10. बोटाज़ी बी, गारलैंडा सी, कोटेना ए, मौली एफ, जेलोन एस, डेबन एल, मंटोवानी ए। एक प्रोटोटाइप ह्यूमरल पैटर्न रिकग्निशन रिसेप्टर के रूप में लॉन्ग पेंट्राक्सिन पीटीएक्स 3: सेलुलर जन्मजात प्रतिरक्षा के साथ परस्पर क्रिया। इम्यूनोल रेव। 2009; 227:9-18.पीएमआईडी:19120471

11. मा वाईजे, डोनी ए, हम्मेलशोज टी, होनोरे सी, बास्टोन ए, मंटोवानी ए, थिएलेंस एनएम, गैरेड पी। फिकोलिन के बीच तालमेल -2 और पेंट्राक्सिन 3 जन्मजात प्रतिरक्षा पहचान और पूरक बयान को बढ़ावा देता है। जे बायोल केम। 2009; 284:28263-75.पीएमआईडी:19632990

12. नेट्टी जीएस, लुकारेली जी, स्पाडासिनो एफ, कैस्टेलानो जी, गिगांटे एम, डिवेला सी, रोचेट्टी एमटी, रासियो एफ, मैनसिनी वी, स्टेलोन जी, कैरीरी जी, गेसुअलडो एल, बटाग्लिया एम, रैनिरी ई। पीटीएक्स 3 ट्यूमर में इम्यूनोफ्लोगोसिस को नियंत्रित करता है। माइक्रोएन्वायरमेंट और क्लियर सेल रीनल सेल कार्सिनोमा वाले रोगियों के लिए एक रोगसूचक कारक है। एजिंग (अल्बानी एनवाई)। 2020; 12:7585–602.पीएमआईडी:32345771

13. सूजा डीजी, अमरल एफए, फागुंडेस सीटी, कोएल्हो एफएम, अरांटिस आरएम, सूसा एलपी, मतज़ुक एमएम, गारलैंडा सी, मंटोवानी ए, डायस एए, टेक्सीरा एमएम। लंबे समय तक पेंट्राक्सिन पीटीएक्स3 ऊतक सूजन के लिए महत्वपूर्ण है

आंतों की इस्किमिया और चूहों में पुनर्संयोजन। एम जे पैथोल। 2009; 174:1309-18.पीएमआईडी:19286566

14. जेलोन एस, पेरी जी, डेलनेस्टे वाई, फ्रैमॉक्स आई, डोनी ए, मोली एफ, गारलैंडा सी, रोमानी एल, गस्कैन एच, बेलोचियो एस, बोज़ा एस, कैसेटेला एमए, जीनिन पी, मंटोवानी ए। ह्यूमरल पैटर्न रिकग्निशन रिसेप्टर पीटीएक्सएक्सएनएक्सएक्स न्यूट्रोफिल कणिकाओं में जमा हो जाता है और बाह्य कोशिकीय जाल में स्थानीयकृत हो जाता है। जे Expक्स्प मेड. 2007; 204:793–804.पीएमआईडी:17389238

15. टोंग एम, कैरेरो जेजे, कुरैशी एआर, एंडरस्टैम बी, हेमबर्गर ओ, बारानी पी, एक्सेलसन जे, अल्वेस्ट्रैंड ए, स्टेनविंकेल पी, लिंडहोम बी, सुलेमान एमई। पुराने रोगियों में प्लाज्मा पेंट्राक्सिन 3गुर्दारोग: गुर्दे के कार्य, प्रोटीन-ऊर्जा, बर्बादी, हृदय रोग और मृत्यु दर के साथ संबंध। क्लिन जे एम सोक नेफ्रोल। 2007; 2:889-97.पीएमआईडी:17702732

16. Witasp A, Rydén M, Carrero JJ, Qureshi AR, Nordfors L, Näslund E, Hammarqvist F, Arefin S, Kublickiene K, Stenvinkel P. एलिवेटेड सर्कुलेटिंग लेवल और यूरीमिया में पेंट्राक्सिन 3 के टिश्यू एक्सप्रेशन: एंडोथेलियल डिसफंक्शन का प्रतिबिंब। एक और। 2013; 8: e63493.PMID:23658833

17. Presta M, Camozzi M, Salvatori G, Rusnati M. संवहनी जीव विज्ञान में घुलनशील पैटर्न मान्यता रिसेप्टर PTX3 की भूमिका। जे सेल मोल मेड। 2007; 11:723–38.PMID:17760835

18। बोटाज़ी बी, इंफोर्ज़ैटो ए, मेसा एम, बारबागलो एम, मैग्रिनी ई, गारलैंडा सी, मंटोवानी ए। जन्मजात प्रतिरक्षा में पेंट्राक्सिन पीटीएक्स 3 और एसएपी, सूजन और ऊतक रीमॉडेलिंग का विनियमन। जे हेपटोल। 2016; 64:1416-27.

19. जिओ वाई, यांग एन, झांग क्यू, वांग वाई, यांग एस, लियू जेड। पेंट्राक्सिन 3 आईएल -6 / स्टेट 3 मार्ग के दमन के माध्यम से तीव्र गुर्दे की चोट से प्रेरित अंतरालीय फाइब्रोसिस को रोकता है। सूजन और जलन। 2014; 37:1895–901.PMID:24854162

20. Inforzato A, Reading PC, Barbati E, Bottazzi B, Garlanda C, Mantovani A. The "Sweet" side of a long pentraxin: कैसे ग्लाइकोसिलेशन जन्मजात प्रतिरक्षा और सूजन में PTX3 कार्यों को प्रभावित करता है। फ्रंट इम्यूनोल। 2013; 3:407. पीएमआईडी: 23316195