फेनिलेथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स: फेनिथाइल अल्कोहल के कुल ग्लाइकोसाइड को अलग करने की विधि और मोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए पर इसका निरोधात्मक प्रभाव

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अलॉयसिया पॉलीस्टाच्या से फेनिलथेनॉइड ग्लाइकोसाइड का अलगाव और पहचान और मोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए के अवरोधक के रूप में इसकी गतिविधि

लेखकों

एना मारिया एस. परेरा1, कैमिला सी. गुइमारेस1, सराजेट IV परेरा1, एडुआर्डो जे. क्रेवेलिन2, गुस्तावो एचटी पिंटो1, लुकास जेएफ मोरेल1, बियांका डब्ल्यू. बर्टोनी1, सुजेली सी. फ्रांका1, सिल्विया एच. तालेब-कोंटिनी1

जुड़ाव

1 विभाग बायोटेक्नोलोजिया एम प्लांटस मेडिसिनैस, यूनिवर्सिडेड डी रिबेराओ प्रेटो (यूएनएईआरपी), रिबेराओ प्रेटो, एसपी, ब्राजील

2 डिपार्टमेंट डे क्विमिका, फैकुलडेड डे फिलोसोआ, सिएनसियास ई लेट्रास डी रिबेराओ प्रेटो, यूनिवर्सिडेड डे

साओ पाउलो (यूएसपी), मोंटे एलेग्रे, रिबेराओ प्रेटो, एसपी, ब्राजील

मुख्य शब्द:एलोयसिया पॉलीस्टाच्या, वर्बेनेसी, एंटीडिप्रेसेंट गतिविधि, फेनिलएथेनोइड्स, मोनोमाइन ऑक्सीडेज इनहिबिटर, एक्टोसाइड

सार

अर्जेंटीना और पराग्वे की स्वदेशी आबादी द्वारा अलॉयसिया पॉलीस्टाच्या का उपयोग शामक और अवसादरोधी के रूप में किया जाता है, लेकिन इन गतिविधियों से जुड़े यौगिकों का निर्धारण नहीं किया गया है। हमने अल्ट्रा-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा ए। पॉलीस्टाच्या के हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क के मुख्य घटकों को अलग और पहचाना है और एक्टोसाइड, आइसोएक्टोसाइड, 6'-एसिटाइलैक्टोसाइड, और 4', 4''', 5 की उपस्थिति की पुष्टि की है। 5''-टेट्राहाइड्रॉक्सी-6,6'',3'''-trimethoxy-[C7– O–C7'']-NMR स्पेक्ट्रोस्कोपी द्वारा biflavone। हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क और पुरी (एड) की निरोधात्मक गतिविधियाँफेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्समोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए के खिलाफ एक मानक फ्लोरोमेट्रिक परख का उपयोग करके मूल्यांकन किया गया था। हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क ने 9.2 माइक्रोग्राम/एमएल के IC5 0 के साथ खुराक पर निर्भर तरीके से मोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए गतिविधि को रोक दिया, जबकि चयनात्मक मोनोमाइन ऑक्सीडेज अवरोधक क्लॉर्जिलाइन ने 0.06 माइक्रोग्राम/एमएल (1) का एक IC5 0 प्रदर्शित किया। 0.22 µ एम).एक्टियोसाइडमोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए (5 माइक्रोन का आईसी50 मान) का सबसे मजबूत अवरोधक था, जबकि आइसोएक्टोसाइड और 6'-एसिटाइलैक्टोसाइड ने लगभग 10 माइक्रोन के आईसी 50 मूल्यों को दिखाया। परिणामों से पता चला कि ए। पॉलीस्टाच्या के हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क से फेनिलएथेनोइड्स में मोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए के खिलाफ निरोधात्मक गतिविधि पाई गई है। यह संभावना है कि एक्टोसाइड्स की क्रिया का तरीका बहु-लक्षित है, जिसमें भड़काऊ अणुओं के डाउनरेगुलेशन और ऑक्सीकरण प्रतिक्रियाओं के बेअसर होने के साथ-साथ मोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए का निषेध शामिल है।

परिचय

विश्व स्वास्थ्य संगठन [1] की एक हालिया रिपोर्ट के अनुसार, 320 मिलियन से अधिक लोग (विश्व जनसंख्या का 4.4 प्रतिशत) अवसाद और चिंता विकारों से पीड़ित हैं, इन मानसिक मुद्दों के परिणामस्वरूप प्रति वर्ष लगभग 800 हजार आत्महत्याएं की जाती हैं। . हालांकि सिंथेटिक एंटीडिपेंटेंट्स के साथ उपचार

उपलब्ध है, कई रोगी शुष्क मुँह, कब्ज, चक्कर आना, धुंधली दृष्टि, भूख में वृद्धि, वजन बढ़ना, अनिद्रा और गुर्दे की समस्याओं जैसे दुष्प्रभावों से पीड़ित हैं [2]। इस कारण से, कई प्रकार के मानसिक विकारों के उपचार में फाइटोथेरेपी सहित पूरक और वैकल्पिक चिकित्सा पद्धतियों का उपयोग किया गया है [3]।

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विभिन्न प्रीक्लिनिकल और क्लिनिकल अध्ययनों ने सामान्य और विशिष्ट चिंता विकारों के उपचार में पादप-आधारित दवाओं के लाभों के समर्थन में साक्ष्य प्रदान किए हैं [4, 5]। मुख्य रूप से अर्जेंटीना और पराग्वे में पाए जाने वाली एक सुगंधित प्रजाति, एलोसिया पॉलीस्टाच्या (ग्रिसेब।) मोल्डेनके (वर्बेनेसी) के चिंताजनक गुणों की जांच में विशेष रुचि है। नृवंशविज्ञान संबंधी अध्ययनों के अनुसार, स्थानीय आबादी पौधे का उपयोग करती है, जिसे आमतौर पर बूरिटो के रूप में जाना जाता है, एक पाचन, शामक और अवसादरोधी टॉनिक [6, 7] के रूप में। हालांकि ए. पॉलीस्टाच्या से हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क के चिंताजनक और अवसादरोधी गुणों की पुष्टि प्रीक्लिनिकल अध्ययनों [8-10] द्वारा की गई है, इन गतिविधियों से जुड़े यौगिकों की पहचान करने के उद्देश्य से कोई फाइटोकेमिकल जांच नहीं की गई है।

यह पहले दिखाया गया है कि कुछ औषधीय पौधों की अवसादरोधी गतिविधियाँ, उदाहरण के लिए, हाइपरिकम पेरफोराटम एल। (हाइपरिकासी) और पेगनम हरमाला एल। (नाइट्रारियासी), मोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए (एमएओ-ए) [11] के निषेध से जुड़ी हैं। -13]। एमएओ परिवार पूरे केंद्रीय और परिधीय तंत्रिका तंत्र में वितरित किया जाता है और इन एंजाइमों की अधिकता न्यूरोट्रांसमीटर सेरोटोनिन, नोरेपीनेफ्राइन और डोपामाइन के स्तर में कमी के साथ मोनोमाइन के ऑक्सीडेटिव डिमिनेशन को बढ़ावा देती है, जिसके परिणामस्वरूप मनोवैज्ञानिक विकारों की शुरुआत होती है। इस तरह की डीमिनेशन प्रक्रियाएं हाइड्रोजन पेरोक्साइड, ऑक्सीजन मुक्त रेडिकल्स और एल्डिहाइड जैसे पदार्थ भी उत्पन्न करती हैं जो कोशिकाओं के ऑक्सीडेटिव तनाव के लिए जिम्मेदार होते हैं। एमएओ दो प्रमुख समस्थानिकों में मौजूद हैं जो वितरण, सब्सट्रेट विशिष्टता और अवरोधकों के प्रति संवेदनशीलता के संबंध में भिन्न हैं। MAO-A आइसोफॉर्म अवसाद और चिंता विकारों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, जबकि MAO-B न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों [13-17] में शामिल होता है।

उपरोक्त के आलोक में, हमने अनुमान लगाया कि ए। पॉलीस्टाच्य के चिंताजनक और अवसादरोधी गुण, कम से कम भाग में, एमएओ-ए के अवरोधकों की उपस्थिति से प्राप्त होते हैं। इस परिकल्पना का परीक्षण करने के लिए, हमने ए। पॉलीस्टाच्या की पत्तियों से हाइड्रो-एथेनॉलिक अर्क में मौजूद सक्रिय सिद्धांतों की पहचान की और एमएओ-ए गतिविधि पर कच्चे तेल के अर्क और उससे अलग किए गए मुख्य घटकों के प्रभावों का आकलन किया।

परिणाम और चर्चा

A. polystachya की पत्तियों से हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क अल्ट्रा-परफॉर्मेंस लिक्विड क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (UPLC-MS) में जमा किया गया था, और इस प्रकार प्राप्त क्रोमैटोग्राम ▶Fig में पूर्व-सुगंधित है। 1ए. अर्क के मुख्य घटकों को कॉलम क्रोमैटोग्राफी और रिवर्स-फेज हाई-परफॉर्मेंस लिक्विड क्रोमैटोग्राफी (RP-HPLC) द्वारा शुद्ध किया गया था, और इसकी पहचान की गई थीएक्टोसाइड(syn verbascoside), isoacteoside, 6'-acetylacteoside, और 4',4''',5,5''-tetrahydroxy-6,6'',3'''-trimethoxy-[C7–O– C7'']-biflavone उनके 1H- और 13C-NMR, HSQC, HMBC (▶Table 1S, 2S, सपोर्टिंग इंफॉर्मेशन), और MS डेटा (▶Fig। 1b-e) की तुलना साहित्य में रिपोर्ट किए गए मूल्यों के साथ [18 -20]। की एकाग्रताएक्टोसाइडहाइड्रोएथेनॉलिक अर्क में, जैसा कि एचपीएलसी द्वारा निर्धारित किया गया था, सूखे अर्क का 108.65 ± 1.3 माइक्रोग्राम / मिलीग्राम था। यह ए। पॉलीस्टाच्या से पत्तियों के अर्क के घटकों के पहले रिकॉर्ड का प्रतिनिधित्व करता है, हालांकि पौधे के आवश्यक तेल का पहले विश्लेषण किया गया है और पाया गया है कि मोनोटेरपीन कार्वोन और लिमोनेन प्रमुख घटक हैं [21]।

A. polystachya की पत्तियों से कच्चे हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क ने MAO-A गतिविधि को खुराक पर निर्भर तरीके (▶Fig। 2a) में IC5 0 के साथ 9.2 µg/mL के साथ बाधित किया, जबकि चयनात्मक MAO अवरोधक क्लॉर्जीलाइन ने IC5 का प्रदर्शन किया। 0 0.06 µ g/mL (0.22 µm) का। शुद्धएक्टोसाइड्सएमएओ-ए (▶छवि 2बी) के खिलाफ भी निरोधात्मक गतिविधियों का प्रदर्शन किया, जिसमें एक्टिओसाइड 5 माइक्रोन (3.1 माइक्रोग्राम / एमएल) के न्यूनतम आईसी 50 मान को प्रस्तुत करता है, इसके बाद आइसोएक्टोसाइड 10.1 माइक्रोन (6.3 माइक्रोग्राम / एमएल) और 6'- के आईसी 50 के साथ होता है। 9.5 µm (6.3 µ g/mL) के IC50 के साथ एसिटाइलैक्टोसाइड। MAO-A के निषेध से सेरोटोनिन, नॉरपेनेफ्रिन, डोपामाइन और टायरामाइन के स्तर की पुन: स्थापना होती है, जो चिंता और अवसाद के नियंत्रण में प्रमुख न्यूरोट्रांसमीटर हैं [16]। इस प्रकार, ए। पॉलीस्टाच्या की पत्तियों में विविध एमएओ-ए अवरोधकों की उपस्थिति बताती है, कम से कम भाग में, प्रजातियों की पहले से बताई गई अवसादरोधी और चिंताजनक गतिविधि [8-10]।

चिंता, अवसाद और अन्य न्यूरोलॉजिकल स्थितियों जैसे जटिल एटियलजि के रोगों के उपचार में मल्टीकंपोनेंट प्लांट मिश्रण का उपयोग फायदेमंद हो सकता है। वर्तमान में, तंत्रिका तंत्र को प्रभावित करने वाले रोगों के उपचार में फाइटोमेडिसिन का उपयोग बहु-लक्ष्य-निर्देशित लिगैंड्स के प्रतिमान पर आधारित है,

यानी, ऐसी दवाएं जिनमें एंटी-इंफ्लेमेटरी, एंटीऑक्सिडेंट, और एमएओ निरोधात्मक गुणों वाले पॉलीफेनोलिक्स जैसे पदार्थों की उपस्थिति के परिणामस्वरूप बहु-लक्षित गतिविधियां होती हैं जो न्यूरोप्रोटेक्शन प्रदान करने में सक्षम हैं [20, 22-25]।

हालांकि, यह ध्यान देने योग्य है कि पॉलीफेनोलिक पदार्थों के ध्रुवीय चरित्र उनके आणविक लक्ष्यों के साथ बातचीत में बाधा डाल सकते हैं। फिर भी, नैदानिक ​​अध्ययनों से पता चला है कि अर्क में मौजूद पॉलीफेनोलिक्स और नॉनपोलर सेकेंडरी मेटाबोलाइट्स के बीच संपर्क कोशिका झिल्ली की पारगम्यता को संशोधित कर सकता है और ध्रुवीय यौगिकों के उत्थान की सुविधा प्रदान कर सकता है [23]। इस प्रकार, बहु-लक्षित एजेंटों वाले जटिल पौधे के अर्क, जो एक फुफ्फुसीय फैशन में अपने रिसेप्टर्स के साथ बातचीत करते हैं, एक औषधीय तालमेल उत्पन्न करते हैं जो सेल झिल्ली में ध्रुवीय चयापचयों के आंदोलन सहित कई प्रक्रियाओं को प्रभावित करता है। इस संदर्भ में, ली एट अल। [26] ने इसे प्रदर्शित करने के लिए एक जेब्राश मॉडल का इस्तेमाल कियाएक्टोसाइडरक्त-मस्तिष्क की बाधा को भेद सकता है, और प्रस्तावित किया कि फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड का पार्किंसंस रोग में संभावित चिकित्सीय प्रभाव हो सकता है।

मोनोएमिनर्जिक न्यूरोट्रांसमीटर आधुनिक एंटीडिपेंटेंट्स का मुख्य लक्ष्य हैं क्योंकि उनकी कमियां अवसाद के दुर्बल लक्षणों के लिए जिम्मेदार हैं। हाल ही में विवो अध्ययन में दिखाया गया है कि लिपिया सिट्रियोडोरा (वर्बेनेसी) के एथेनॉलिक और जलीय अर्क और उनके मुख्य घटकएक्टोसाइडने चिंताजनक, कृत्रिम निद्रावस्था और मांसपेशियों को आराम देने वाले प्रभावों का प्रदर्शन किया और इन गुणों को, भाग में, टाइप ए गामा-एमिनोब्यूट्रिक एसिड (जीएबीएए) रिसेप्टर [27] के साथ बातचीत के लिए जिम्मेदार ठहराया गया था।

नैदानिक ​​अध्ययनों से पता चला है कि टीएनएफ- जैसे भड़काऊ साइटोकिन्स को अवरुद्ध करने की क्षमता वाली दवाएं, या भड़काऊ सिग्नलिंग मार्ग के अन्य घटक, उदाहरण के लिए, साइक्लोऑक्सीजिनेज -2 (COX-2), कम करने में प्रभावी हैं रूमेटोइड गठिया, सोरायसिस, और कैंसर के साथ-साथ प्रमुख मनोवैज्ञानिक विकारों से पीड़ित रोगियों में अवसादग्रस्त लक्षण [28]। इस संदर्भ में यह बताया गया है किएक्टोसाइडलिपोपॉलेसेकेराइड/इंटरफेरॉन-गामा (LPS/IFN-)-उत्तेजित मैक्रोफेज [29] में नाइट्रिक ऑक्साइड (NO), TNF-, और इंटरल्यूकिन 12 (IL-12) जैसे भड़काऊ अणुओं के उत्पादन और रिलीज को क्षीण कर सकते हैं। , साथ ही RBL -2H3 मस्तूल कोशिकाओं [30] में हिस्टामाइन और एराकिडोनिक एसिड। इसके साथ ही,एक्टोसाइडTNF-, IL-1, IL-8, IL-6, और NO के स्तर को कम करने में सक्षम है, और caspase-1, परमाणु कारक-कप्पा-बी को सक्रिय करने में सक्षम है

(NF-κB), NO सिंथेज़ और एक्टिवेटर प्रोटीन-1 [31] IL-32 और/या LPS इन TH-1 कोशिकाओं और मैक्रोफेज [32] से प्रेरित है।

इनमें से कुछ भड़काऊ मध्यस्थ, जैसे कि IFNs, IL-6, IL-8, और IL-1, अवसादग्रस्त व्यक्तियों के परिधीय और पोस्टमार्टम ऊतक के नमूनों में असामान्य स्तर पर पाए गए हैं। , और अवसाद के लक्षणों से संबंधित हैं [33]। मनोसामाजिक तनावों द्वारा इन अणुओं की सक्रियता मस्तिष्क में महत्वपूर्ण कार्यात्मक परिवर्तनों को बढ़ावा दे सकती है, जिससे अवसादग्रस्तता व्यवहार और अन्य मानसिक विकारों का विकास हो सकता है। उदाहरण के लिए, IFNs, IL-1 और TNF-, सेरोटोनिन, नॉरएड्रेनालाईन और डोपामाइन रिसेप्टर पंपों की अभिव्यक्ति और कार्य को बढ़ा सकते हैं, इस प्रकार सिनैप्टिक फांक [28] में इन न्यूरोट्रांसमीटर की उपलब्धता को कम कर सकते हैं। इसके अलावा, IFN-, IL-6, TNF-, और ऑक्सीडेटिव तनाव इंडोलेमाइन 2,3 डाइअॉॉक्सिनेज (IDO) को सक्रिय कर सकते हैं, एक एंजाइम जो ट्रिप्टोफैन के क्षरण के लिए जिम्मेदार है और इस तरह, प्राथमिक अग्रदूत की एकाग्रता को कम करता है। सेरोटोनिन संश्लेषण [34]।

एक्टियोसाइड, isoacteoside, और 6'-acetylacteoside में हाइड्रॉक्सी-फेनिलेथाइल और caffeoyl moieties होते हैं जो एंटीऑक्सिडेंट गुणों [35, 36] से जुड़े होने के लिए जाने जाते हैं, और एक्टोसाइड स्वयं काफी एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि [37] प्रदर्शित करता है। अध्ययनों से पता चला है किएक्टोसाइडएक खुराक पर निर्भर तरीके से -एमाइलॉइड पेप्टाइड (ए) के एकत्रीकरण को रोकता है, एक न्यूरोप्रोटेक्टिव एजेंट के रूप में कार्य करता है, और स्मृति को बढ़ाता है, और इन गुणों को एजेंट [38, 39] की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि के लिए जिम्मेदार ठहराया गया है। यह देखते हुए कि एंटीऑक्सिडेंट गुणों के साथ कई फेनोलिक-समृद्ध प्रजातियों का उपयोग न्यूरोलॉजिकल विकारों के उपचार में किया जाता है [15], यह सुझाव दिया गया है कि एंटीडिप्रेसेंट और चिंताजनक प्रभावफेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्सए। पॉलीस्टाच्या से पृथक उनकी एंटी-ऑक्सीडेंट गतिविधियों का भी परिणाम हो सकता है। इस अनुमान को जू एट अल द्वारा समर्थित किया गया था। [40], जिन्होंने बढ़े हुए ऑक्सीडेटिव तनाव और अवसाद/चिंता के बीच संबंधों से संबंधित साक्ष्य प्रस्तुत किए।

उपरोक्त के आधार पर, हम यह निष्कर्ष निकालते हैं कि ए। पॉलीस्टाच्य की पत्तियों से हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क के अवसादरोधी गुण, और उससे अलग किए गए शुद्ध फेनिलएथेनोइड्स को बहु-लक्ष्य मोड द्वारा समझाया जा सकता है जिसमें एमएओ-ए का निषेध शामिल है, के डाउनरेगुलेशन भड़काऊ अणु, और ऑक्सीकरण प्रतिक्रियाओं का बेअसर। इसलिए, यहां प्रस्तुत परिणाम हमारी मूल परिकल्पना का समर्थन करते हैं कि ए। पॉलीस्टाच्या के हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क की चिंताजनक और अवसादरोधी गतिविधियों का परिणाम, कम से कम भाग में, एमएओ-ए के निषेध से होता है। हालाँकि, की संरचना-गतिविधि संबंधफेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्सइस अध्ययन में पहचाने जाने पर और अधिक ध्यान देने की आवश्यकता है ताकि विशिष्ट तंत्रिका संबंधी विकारों के उपचार के लिए नए अणुओं को डिजाइन किया जा सके।

सामग्री और तरीके

संयंत्र के लिए सामग्री

जनवरी 2016 में A. polystachya की पत्तियों को Farmácia da Na-tureza da Terra de Ismael (जार्डिनोपोलिस, SP, ब्राज़ील) में काटा गया था। पौधों की सामग्री की पहचान डॉ. लूसिया रॉसी (इंस्टीट्यूटो बोटानिको, साओ पाउलो, एसपी, ब्राज़ील) ने की थी। और एक वाउचर नमूना UNAERP में औषधीय पौधों के हर्बेरियम में वाउचर नंबर के साथ जमा किया गया था

एचपीएम-1213.

एचपीएम-1213. ब्राजील के पौधों के अर्क की जैव-सक्रियताओं का मूल्यांकन करने की अनुमति इंस्टिट्यूटो ब्रासीलीरो डो मेयो एम्बिएंटे ई डॉस रिकर्सोस नेचुराइस रेनोवाविस (सं. 02001.005074/ 2011-19) द्वारा प्रदान की गई थी।

एलोयसिया पॉलीस्टाच्या के हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क की तैयारी

पत्तियों (1000 ग्राम) को 45 डिग्री पर एक परिसंचारी वायु ओवन में 72 घंटे के लिए सुखाया गया, चूर्णित किया गया, और एक 40-जाली छलनी के माध्यम से पारित किया गया। पाउडर सामग्री पानी में डूबी हुई थी: इथेनॉल (20:80; वी / वी) 7 दिनों के लिए और बाद में व्हाटमैन नंबर 41 फिल्टर पेपर के माध्यम से फ़िल्टर किया गया। रोटरी बाष्पीकरण पर ltrate को सूखापन में कम किया गया था और उपज के लिए lyophilized किया गया था

130.2 ग्राम सूखा कच्चा अर्क, जिसके परिणामस्वरूप दवा निकालने का अनुपात 7.6: 1 है।

अल्ट्रा-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा घटकों का पृथक्करण और पहचान

क्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण एक डायोड एरे डिटेक्टर (डीएडी) से लैस वाटर्स एक्विटी यूपीएलसी एच-क्लास सिस्टम और एक वाटर्स ज़ेवो टीक्यू-एस टेंडेम क्वाड्रुपोल मास स्पेक्ट्रोमीटर का उपयोग करके किया गया था, जिसमें एक जेड-स्प्रे स्रोत नकारात्मक आयन मोड में काम कर रहा था। स्टॉक समाधान जिसमें 1.0 मिलीग्राम/एमएल अर्क या मानक शामिल हैंएक्टोसाइड, आइसोएक्टोसाइड, 6'-एसिटाइलैक्टोसाइड, और 4',4''',5,5''-टेट्राहाइड्रॉक्सी-6,6'',3'''- ट्राइमेथॉक्सी-[C7–O–C7''] एलसी-ग्रेड मेथनॉल में -फ्लेवोन को अलग से पहले से तैयार किया गया था, जब आवश्यक हो तो प्रत्येक के लिए 3 0 मिनट के लिए sonication के साथ, और 0.45 माइक्रोन मिलिपोर फिल्टर (मर्क मिलिपोर) के माध्यम से बदल दिया गया। समाधान मेथनॉल के साथ 1 0 माइक्रोग्राम / एमएल तक पतला थे, और एलिकोट्स (5 μL) को सिग्मा-एल्ड्रिच एसेंटिस एक्सप्रेस C18 कॉलम (1 0 0 × 4.6 मिमी आईडी पर इंजेक्ट किया गया था; 2.7 µm कण आकार). मोबाइल चरण में 0.1 प्रतिशत फॉर्मिक एसिड (विलायक ए) और मेथनॉल युक्त 0.1 प्रतिशत फॉर्मिक एसिड (विलायक बी) युक्त पानी शामिल था, जो क्षालन के अनुसार 0.5 एमएल / मिनट की प्रवाह दर पर आपूर्ति की गई थी: 0 और के बीच 3 प्रतिशत बी के साथ लोकतांत्रिक 4 मिनट, उसके बाद 4 से 19 मिनट के बीच 3 से 60 प्रतिशत बी और 19 से 23 मिनट के बीच 60 से 90 प्रतिशत बी, और अंत में 23 से 28 मिनट के बीच 3 प्रतिशत बी पर वापस आ गया। डीएडी द्वारा 210 से 720 एनएम की सीमा में और एमएस द्वारा अनुकूलित स्रोत और ऑपरेटिंग मापदंडों के साथ इस प्रकार की निगरानी की गई थी: केशिका वोल्ट-

आयु 2.50 केवी, जेड-स्प्रे स्रोत तापमान 150 डिग्री, डीसोल्वेशन तापमान (एन2) 350 डिग्री, डीसोलेशन गैस फ्लो 600 एल/एच, और मास रेंज एम/जेड 150 से 600 पूर्ण स्कैन मोड में।

पहचाने गए घटकों की शुद्धि

कच्चे हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क (10 ग्राम) को पानी में भंग कर दिया गया था: इथेनॉल (50:50; वी / वी) और हेक्सेन, एथिल एसीटेट और एन-ब्यूटानॉल के खिलाफ लगातार विभाजित किया गया। ब्यूटेनॉल अंश एक रोटरी बाष्पीकरण पर केंद्रित था और अंशित अर्क का 3 जी नमूना एक ग्लास कॉलम (10 × 3 सेमी ओडी) पर लागू किया गया था जिसे सी -18 आरपी सिलिका जेल (230-400 जाल; सिग्मा के साथ भरा गया था। -एल्ड्रिच) और पानी से युक्त, इसके बाद पानी के क्रमिक मिश्रण: मेथनॉल (90:10, 50:50, और 10:90; वी/वी)। पानी के साथ रेफरेंस द्वारा प्राप्त सबफ़्रेक्शन: मेथनॉल (90:10; वी/वी) को आरपी-एचपीएलसी द्वारा शिमदज़ू एलसी -20एपी सिस्टम के साथ एसपीडी-20एक यूवी/विज़ डिटेक्टर का उपयोग करके शुद्ध किया गया था। और एक फेनोमेनेक्स लूना® सी-18 कॉलम (250 × 10 मिमी आईडी; 5 माइक्रोन कण आकार) से सुसज्जित है। मोबाइल चरण पानी था: मेथनॉल 90:10 (v/v) पर शुरू होता है और चार ज्ञात यौगिकों को प्राप्त करने के लिए 100 मिनट में 30:70 (v/v) में बदल जाता है।एक्टोसाइड(750 मिलीग्राम), आइसोएक्टोसाइड (430 मिलीग्राम), 6'-एसिटाइलैक्टोसाइड (42 मिलीग्राम), और 4',4''', 5,5''-टेट्राड्रोक्सी-6,6'',3''' -ट्राइमेथॉक्सी- [सी7-ओ-सी7'']-फ्लेवोन (13 मिलीग्राम)। मोबाइल चरण की प्रवाह दर 1 एमएल / मिनट थी, इंजेक्शन की मात्रा 500 μL थी, क्रोमैटोग्राम 340 एनएम दर्ज किया गया था, और यूवी स्पेक्ट्रा 240 से 400 एनएम की सीमा में प्राप्त किया गया था। शुद्ध किए गए घटकों की पहचान उनके 1H- (500 मेगाहर्ट्ज) और 13C-NMR (125 मेगाहर्ट्ज) स्पेक्ट्रा से ब्रूकर मॉडल DPX 500 स्पेक्ट्रोमीटर पर दर्ज की गई थी, और डेटा की तुलना साहित्य में उपलब्ध लोगों के साथ की गई थी [18, 19, 41]. पृथक यौगिकों की शुद्धता की पुष्टि UPLC-DAD-MS (▶Fig। 1b-d) और NMR (▶Fig। S1-S12, सहायक सूचना) द्वारा की गई थी।

एचपीएलसी-डायोड सरणी द्वारा एक्टोसाइड की मात्रा का ठहरावडिटेक्टर

इस समाधान का विश्लेषण शिमदज़ू एलसी {{{1 0}}}} एपीवीपी सिस्टम पर एसपीडी-एम 1 0 एवीपी डीएडी और फेनोमेनेक्स लूना सी 18 कॉलम (250 × 4.6 मिमी) के साथ किया गया था। आईडी, 5 माइक्रोन) एक फेनोमेनेक्स सी18 प्रीकॉलम (4.0 × 3.0 मिमी आईडी, 5 माइक्रोन) द्वारा संरक्षित है। पानी में 0.1 प्रतिशत एसिटिक एसिड (विलायक ए) और मेथनॉल (विलायक बी;

जेटी बेकर एचपीएलसी ग्रेड) कार्यक्रम के अनुसार 1.0 एमएल/मिनट की निरंतर प्रवाह दर पर आपूर्ति की गई: रैखिक ढाल 10 से 70 प्रतिशत बी के बीच 0 और 32 मिनट के बीच, 70 से 10 तक 32 और 35 मिनट के बीच प्रतिशत बी, और 35 और 40 मिनट के बीच 10 प्रतिशत बी के साथ एक अंतिम ईश्वरीय क्षालन। डिटेक्शन वेवलेंथ को 330 एनएम पर सेट किया गया था।

अर्क में एक्टोसाइड की सामग्री का उपयोग करके अनुमान लगाया गया थाएक्टोसाइड(सिग्मा-एल्ड्रिच; सीएएस संख्या 61276-17-3) बाहरी मानक के रूप में। संदर्भ मानक के 5 0 0, 250, 125, 62.5, 31.2, और 15.6 कुरूप/एमएल युक्त समाधान तैयार किए गए थे, और प्रत्येक समाधान को तीन प्रतियों में एचपीएलसी विश्लेषण के अधीन करके अंशांकन वक्रों का निर्माण किया गया था [42] ]. मानक एक्टोसाइड के शिखर क्षेत्र का विश्लेषण की संगत सांद्रता के अनुपात को मानक वक्रों के रैखिक प्रतिगमन के माध्यम से स्थापित किया गया था (▶Fig। S13, सहायक सूचना)। विश्लेषणात्मक डेटा को रैखिकता, सटीकता और सटीकता के संबंध में Agência Nacional de Vigilância Sanitária [42] द्वारा जारी दिशानिर्देशों के अनुसार मान्य किया गया था। एक्टोसाइड की पहचान (LoD) और परिमाणीकरण (LoQ) की सीमा क्रमशः 0.30 और 0.92 µg/mL थी।

मोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए निषेध परख

पुनः संयोजक मानव MAO-A, tyramine, clorgyline, vanillic acid, 4-अमीनो एंटीपायरिन, और हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज़ सिग्मा-एल्ड्रिच से खरीदे गए थे। López et al द्वारा वर्णित विधि के संशोधित संस्करण के बाद 96-वेल प्लेट्स का उपयोग करके MAO-A निषेध assays का प्रदर्शन किया गया। [43]। प्रत्येक कुएं में 5 0 μL क्रोमोजेनिक सॉल्यूशन (0.8 mM वैनिलिक एसिड, 2.5 mM 4- अमीनो एंटीपायरिन, और 4 U/mL हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज pH 7.6 पर फॉस्फेट बफर में), 100 μL 3 से भरा हुआ था। mM tyramine, और कच्चे हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क का एक 50-μL विभाज्य या मेथनॉल में घुले हुए पुरी-एड फेनिलएथेनोइड्स में से एक। अंत में, प्रत्येक कुएं में 8 U/mL MAO-A के 50 μL विभाज्य जोड़े गए और प्लेट को 37 डिग्री पर 30 मिनट के लिए ऊष्मायन किया गया, इस दौरान माइक्रोप्लेट रीडर का उपयोग करके हर 5 मिनट में अवशोषण दर्ज किया गया। Clorgyline (97 प्रतिशत GC से अधिक या उसके बराबर; सिग्मा-एल्ड्रिच) और मेथनॉल को प्रत्येक परख प्लेट पर क्रमशः सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण के रूप में शामिल किया गया था।

सांख्यिकीय विश्लेषण

एमएओ-ए निरोधात्मक गतिविधियों के तीन स्वतंत्र मूल्यांकन किए गए और ग्राफ-पैड प्रिज्म सॉफ्टवेयर का उपयोग करके अधिग्रहित डेटा का विश्लेषण किया गया। हाइड्रोएथेनॉलिक अर्क, पुरी-एड फेनिलएथेनोइड्स और सकारात्मक नियंत्रण के IC50 मूल्यों की गणना गैर-रेखीय प्रतिगमन द्वारा की गई थी, जो लॉग (अवरोधक एकाग्रता) बनाम सामान्यीकृत प्रतिशत निषेध के भूखंडों का अनुकरण करते हैं।

सहायक सूचना

H- और 13C-NMR स्पेक्ट्रा ofएक्टोसाइड, आइसोएक्टोसाइड, 6'-एसिटाइलैक्टोसाइड, और 4',4''',5,5''-टेट्राहाइड्रॉक्सी-6,6'',3'''-ट्राइमेथॉक्सी-[C7-O- C7''] -फ्लेवोन और एचएसक्यूसी/एचएमबीसी तीन फेनिलएथेनोइड्स के लिए सहसंबंध विश्लेषण सहायक सूचना के रूप में उपलब्ध हैं।

प्राप्त 04.06.2018

संशोधित 19.10.2018

स्वीकृत 24.10.2018

ग्रन्थसूची

डीओआई https://doi.org/10.1055/a-0787-1665

प्लांटा मेड इंट ओपन 2019; 6: e1-e6

© जॉर्ज थिएम वेरलाग केजी स्टटगार्ट · न्यूयॉर्क आईएसएसएन 2509-9264

पत्र - व्यवहार

एना मारिया एस. परेरा

डिपार्टमेंट डे बायोटेक्नोलोजिया एम प्लांटस मेडिसिनिस

Universidade de Ribeirão Preto Av. कोस्टाबाइल रोमानो 2201 14096-900 रिबेरानिया

रिबेराओ प्रेटो, एसपी

ब्राज़िल

संदर्भ

[1] विश्व स्वास्थ्य संगठन। अवसाद और अन्य सामान्य मानसिक विकार: वैश्विक स्वास्थ्य अनुमान। जिनेवा: डब्ल्यूएचओ; 2017

[2] फर्ग्यूसन जेएम। SSRI अवसादरोधी दवाएं: प्रतिकूल प्रभाव और सहनशीलता। प्राइम केयर कंपेनियन जे क्लिन साइकियाट्री 2001; 3: 22-27

[3] वैन डेर वाट जी, लॉघर्न जे, जंका ए। चिंता और अवसाद के उपचार में पूरक और वैकल्पिक चिकित्सा। कर्र ओपिन मनश्चिकित्सा 2008; 21: 37-42

[4] सरिस जे, मैकइनटायर ई, कैमेल्ड डीए। चिंता विकारों के लिए पौधे आधारित दवाएं, भाग 1: प्रीक्लिनिकल स्टडीज की समीक्षा। सीएनएस ड्रग्स 2013; 27: 207-219

[5] सरिस जे, मैकइनटायर ई, कैमेल्ड डीए। चिंता विकारों के लिए संयंत्र-आधारित दवाएं, भाग 2: प्रीक्लिनिकल साक्ष्य के समर्थन के साथ नैदानिक ​​अध्ययनों की समीक्षा। सीएनएस ड्रग्स 2013; 27: 301–319

[6] डेल विट्टो एलए, पेटेनट्टी ईएम, पेटेनट्टी एमई। रिकर्सोस हरबोलारियोस डी सैन लुइस (रिपब्लिका अर्जेंटीना)। प्राइमेरा पार्ट: प्लांटस नेटिवस। मल्टीक्विना 1997; 6: 49-66

[7] गोंजालेज वाई, अररिया आरडी, रोजस जीडी, गार्सिया एमजी। Etnofarmacobotánica foliar de "burrito", Aloysia polystachya (Griseb.) Moldenke (Verben- aceae), कल्टीवाडो एन पराग्वे। रोजसियाना 2014; 13: 31-41

[8] मोरा एस, डियाज़-वेलिज़ जी, मिलन आर, लुंगेनस्ट्रैस एच, क्विरोस एस, कोटो-मोरालेस टी, हेलियन-इबारोला एमसी। चूहों में एलोसिया पॉलीस्टाच्या से हाइड्रोक्लोरिक अर्क के चिंताजनक और अवसादरोधी जैसे प्रभाव। फार्माकोल बायोकेम बिहेव 2005; 82: 373–378

[9] हेलियन-इबारोला एमसी, इबारोला डीए, मोंटालबेटी वाई, केनेडी एमएल, हेनिचेन ओ, कैम्पुज़ानो एम, टोर्टोरिलो जे, फर्नांडीज एस, वासोव्स्की सी, मार्डर एम, डी लीमा टीसीएम, मोरा एस। एलोसिया पॉलीस्टाच्या के चिंताजनक-जैसे प्रभाव (ग्रिसेब।) मोल्डेनके (वर्बेनेसी) चूहों में। जे एथनोफार्मा- कर्नल 2006; 105: 400-408

[10] हेलियन-इबारोला एमसी, इबारोला डीए, मोंटालबेटी वाई, केनेडी एमएल, हेनिचेन ओ, कैम्पुज़ानो एम, फेरो ईए, अल्वारेंगा एन, टोर्टोरिलो जे, डी लीमा टीसीएम, मोरा एस। एलोशिया पॉलीस्टाच्या (ग्रिसब। ) चूहों में मोल्डेनके (वर्बेनेसी)। फाइटोमेडिसिन 2008; 15: 478-483

[11] हेरेज़ टी, गोंजालेज डी, एंसिन-एज़पिलिकुएटा सी, अरन वीजे, गुइलेन एच। पेगनम हरमाला में कार्बोलिन एल्कलॉइड और मानव मोनोमाइन ऑक्सीडेज (MAO) का निषेध। फूड केम टॉक्सिकॉल 2010; 48: 839-845

[12] हेरेज़ टी, गुइलेन एच, अरन वीजे, सालगाडो ए। पेगनम हरमाला में क्विनाज़ोलिन एल्कलॉइड की पहचान, घटना और गतिविधि। फूड केम टॉक्सिकॉल 2017; 103: 261–269

[13] हेरेज़ टी, गुइलेन एच। मोनोमाइन ऑक्सीडेज-ए संभावित एंटीडिप्रेसेंट क्रियाओं के साथ पौधों के अर्क में निषेध और संबद्ध एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि। बायो-मेड रेस इंट 2018; 1018: 4810394

[14] कैराडोरी एस, डी'एसेंज़ियो एम, चिमेंटी पी, सेकसी डी, बोलस्को ए। चयनात्मक एमएओ-बी अवरोधक: प्राकृतिक उत्पादों से एक सबक। मोल डाइवर्स 2014; 18: 219–243

[15] फजेमिरॉय जो, सिल्वा डीएम, ओलिवेरा डीआर, कोस्टा ईए। चिंता और अवसाद का उपचार: पूर्वव्यापी में औषधीय पौधे। फंडम क्लिन फार्माकोल 2016; 30: 198-215

[16] Fišar Z. दवाएं मोनोअमीन ऑक्सीडेज गतिविधि से संबंधित हैं। प्रोग न्यूरोसाइकोफार्माकोल बायोल साइकियाट्री 2016; 69: 112–124

[17] नाओई एम, मारुयामा डब्ल्यू, शामोटो-नागई एम। टाइप ए मोनोमाइन ऑक्सीडेज और सेरोटोनिन अवसादग्रस्तता विकारों में समन्वित रूप से शामिल हैं: न्यूरोट्रांसमीटर असंतुलन से बिगड़ा हुआ न्यूरोजेनेसिस तक। जे न्यूरल ट्रांसम 2017; 125: 53-66