अमूर्त

अवसाद विश्व स्तर पर अत्यधिक प्रचलित और अक्षम करने वाले मनोरोग विकार का प्रतिनिधित्व करता है। बढ़ते प्रमाणों से संकेत मिलता है कि हिप्पोकैम्पस के भीतर अत्यधिक न्यूरोइन्फ्लेमेटरी सक्रियता अवसादग्रस्त लक्षणों की शुरुआत और प्रगति में महत्वपूर्ण योगदान देती है। सिस्टैंच फेनिलथेनॉल ग्लाइकोसाइड्स (सीपीएचजी), पारंपरिक खाद्य-औषधीय जड़ी बूटी से निकाले गए प्रमुख जैव सक्रिय घटकसिस्टैंच डेजर्टिकोलाऔरसिस्टैंच ट्यूबुलोसा, ने पिछले अध्ययनों में कई न्यूरोप्रोटेक्टिव औषधीय गुण प्रदर्शित किए हैं। इस वर्तमान जांच का उद्देश्य C57BL/6 चूहों में क्रोनिक अप्रत्याशित हल्के तनाव (सीयूएमएस) से उत्पन्न अवसाद-जैसे व्यवहार संबंधी फेनोटाइप पर सीपीएचजी द्वारा लगाए गए चिकित्सीय प्रभावों और आणविक तंत्र का पता लगाना है।

साठ एसपीएफ़-ग्रेड सी57बीएल/6 चूहों को बेतरतीब ढंग से छह प्रयोगात्मक समूहों में विभाजित किया गया: नियंत्रण समूह, सीयूएमएस-मॉडल समूह, उच्च खुराक सीपीएचजी समूह (700 मिलीग्राम/किग्रा), मध्यम खुराक सीपीएचजी समूह (350 मिलीग्राम/किग्रा), कम खुराक सीपीएचजी समूह (175 मिलीग्राम/किग्रा), और सकारात्मक-नियंत्रण फ्लुओक्सेटीन समूह (15 मिलीग्राम/किग्रा)। सीयूएमएस मॉडलिंग के बाद चार सप्ताह के ड्रग गैवेज हस्तक्षेप के बाद, सुक्रोज वरीयता परीक्षण (एसपीटी), ओपन-फील्ड टेस्ट (ओएफटी), टेल सस्पेंशन टेस्ट (टीएसटी), और फोर्स्ड-स्विम टेस्ट (एफएसटी) सहित व्यापक न्यूरोबिहेवियरल आकलन लागू किए गए। एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) किट ने हिप्पोकैम्पस प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स और इंफ्लेमेटरी मध्यस्थों के साथ-साथ सीरम मोनोमाइन न्यूरोट्रांसमीटर सांद्रता की मात्रा निर्धारित की। हेमेटोक्सिलिन-ईओसिन (एचई) स्टेनिंग और निस्सल स्टेनिंग ने हिप्पोकैम्पस डेंटेट गाइरस क्षेत्रों के अंदर न्यूरोनल पैथोलॉजिकल चोटों की कल्पना की। इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री ने ग्लियाल फाइब्रिलरी एसिडिक प्रोटीन (जीएफएपी), आयनित कैल्शियम-बाइंडिंग एडाप्टर अणु-1 (आईबीए-1), एनएलआरपी3 और कैस्पेज़-1 प्रोटीन की अभिव्यक्ति तीव्रता का पता लगाया। इम्यूनोफ्लोरेसेंस स्टेनिंग ने अपस्ट्रीम टीएलआर4/एनएफ-κबी सिग्नलिंग कैस्केड की सक्रियण स्थिति का और अधिक मूल्यांकन किया।

हमारे प्रयोगात्मक परिणामों से पता चला कि मौखिक सीपीएचजी प्रशासन ने अवसाद संबंधी व्यवहार संबंधी असामान्यताओं को उल्लेखनीय रूप से कम कर दिया है। सीपीएचजी ने सुक्रोज वरीयता प्रतिशत को बढ़ाया और निराशा-आधारित व्यवहार प्रतिमानों में गतिहीनता की अवधि को कम किया। इसके अलावा, सीपीएचजी उपचार ने घटे हुए सीरम और हिप्पोकैम्पस सेरोटोनिन (5‑HT) के साथ-साथ डोपामाइन (डीए) के स्तर को बहाल कर दिया। जैव रासायनिक जांच से हिप्पोकैम्पस प्रो-इंफ्लेमेटरी मध्यस्थों और साइटोकिन के अति-उत्पादन के महत्वपूर्ण दमन का पता चला। हिस्टोपैथोलॉजिकल अवलोकनों ने सीयूएमएस-उत्तेजित हिप्पोकैम्पस न्यूरोनल क्षति की खुराक-निर्भर राहत का चित्रण किया। इम्यूनोहिस्टोकेमिकल परिणामों से पता चला कि सीपीएचजी ने जीएफएपी द्वारा चिह्नित एस्ट्रोसाइट घनत्व को बढ़ाया, आईबीए-1-पॉजिटिव माइक्रोग्लिया के पैथोलॉजिकल हाइपर-सक्रियण को रोक दिया, और डाउन-रेगुलेटेड एनएलआरपी 3 इन्फ्लेमसोम-संबंधित प्रोटीन बहुतायत को रोक दिया। इम्यूनोफ्लोरेसेंस परीक्षण ने पुष्टि की कि सीपीएचजी ने हिप्पोकैम्पस ऊतक के भीतर अत्यधिक टीएलआर4 और फॉस्फोराइलेटेड एनएफ-κबी पी65 सक्रियण को रोक दिया।

सामूहिक रूप से, ये निष्कर्ष पुष्टि करते हैं कि सीपीएचजी चूहों में सीयूएमएस-उत्तेजित अवसाद-जैसी अभिव्यक्तियों के खिलाफ प्रमुख अवसादरोधी-जैसी प्रभावकारिता प्रदर्शित करते हैं। इसका औषधीय तंत्र आंशिक रूप से दोहरे नियामक कार्यों के माध्यम से मध्यस्थ होता है: मोनोमाइन न्यूरोट्रांसमीटर होमियोस्टेसिस को बहाल करना और टीएलआर4/एनएफ‑κबी/एनएलआरपी3 सिग्नलिंग अक्ष द्वारा मध्यस्थ न्यूरोइन्फ्लेमेटरी प्रतिक्रियाओं को रोकना। यह पशु अध्ययन अवसाद-सहायक हस्तक्षेप के लिए आशाजनक प्राकृतिक उम्मीदवार एजेंटों या कार्यात्मक खाद्य सामग्री के रूप में सीपीएचजी के आगे के शोषण का समर्थन करने वाला पूर्व-नैदानिक ​​​​प्रयोगात्मक आधार प्रदान करता है।

कीवर्ड: सिस्टैंच फेनिलएथेनॉल ग्लाइकोसाइड्स (सीपीएचजी); अवसाद; पुराना अप्रत्याशित हल्का तनाव; न्यूरोइन्फ्लेमेशन; एस्ट्रोसाइट्स; माइक्रोग्लिया; टीएलआर4/एनएफ‑κबी/एनएलआरपी3 इन्फ्लेमसोम मार्ग

1 परिचय

अवसाद एक बहुआयामी भावात्मक मनोरोग बीमारी है, जिसकी मुख्य नैदानिक ​​​​अभिव्यक्तियाँ लगातार कम मूड, एनाडोनिया, साइकोमोटर मंदता, नींद-जागने में परेशानी और दैहिक शिथिलता शामिल हैं। गंभीर अवसादग्रस्तता प्रकरण संभावित रूप से आत्म-नुकसान और आत्मघाती विचार को जन्म देते हैं, जिससे दुनिया भर में सार्वजनिक-स्वास्थ्य पर जबरदस्त बोझ पड़ता है। चीन के महामारी विज्ञान सर्वेक्षण के आंकड़ों से पता चला है कि राष्ट्रीय अवसाद का प्रसार 2.1% तक पहुंच गया है, और विश्व स्वास्थ्य संगठन ने वैश्विक विकलांगता-समायोजित जीवन-वर्ष के नुकसान में योगदान देने वाली शीर्ष-रैंक वाली बीमारियों में प्रमुख अवसादग्रस्तता विकार को वर्गीकृत किया है।

फिर भी, अवसाद रोगजनन में अंतर्निहित पूर्ण आणविक एटियलजि अपूर्ण रूप से स्पष्ट है, जो सही नैदानिक ​​​​चिकित्सीय समाधानों में बाधा उत्पन्न करता है। समसामयिक पैथोफिजियोलॉजिकल परिकल्पनाओं ने न्यूरो-इम्यून क्रॉसस्टॉक तंत्र की ओर ध्यान केंद्रित कर दिया है। प्री-क्लिनिकल और क्लिनिकल शोध का संचय अवसादग्रस्त विकारों के लिए एक महत्वपूर्ण रोगजनक चालक के रूप में लगातार न्यूरोइन्फ्लेमेशन पर प्रकाश डालता है। पुरानी मनोवैज्ञानिक या शारीरिक तनाव चुनौतियों के तहत, हिप्पोकैम्पस ग्लियाल कोशिका आबादी असामान्य सक्रियण से गुजरती है। अति-सक्रिय माइक्रोग्लिया और डिसफंक्शनल एस्ट्रोसाइट्स कई प्रो-इंफ्लेमेटरी मध्यस्थों की मजबूत रिलीज को ट्रिगर करते हैं, जिससे प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन कैस्केड प्रवर्धन प्रभाव पैदा होता है। इस तरह के न्यूरो-भड़काऊ अपमान न्यूरोनल रूपात्मक गिरावट, न्यूरोट्रांसमीटर चयापचय गड़बड़ी और सिनैप्टिक प्लास्टिसिटी हानि को प्रेरित करते हैं, अंततः अवसाद जैसी रोग प्रगति को सुविधाजनक बनाते हैं।

वर्तमान मुख्यधारा के क्लिनिकल एंटीडिप्रेसेंट हस्तक्षेप मुख्य रूप से फ्लुओक्सेटीन, एक चयनात्मक सेरोटोनिन रीपटेक अवरोधक (एसएसआरआई) द्वारा प्रस्तुत सिंथेटिक रासायनिक एंटीडिप्रेसेंट्स पर निर्भर करते हैं। कुछ रोगियों के लिए आंशिक लक्षण राहत के बावजूद, सिंथेटिक एंटीडिपेंटेंट्स में अच्छी तरह से मान्यता प्राप्त कमियां हैं: असंतोषजनक पूर्ण छूट अनुपात, लगातार अवशिष्ट अवसादग्रस्तता लक्षण, दवा बंद करने के बाद उच्च पुनरावृत्ति की संभावना, साथ ही दीर्घकालिक प्रशासन के दौरान प्रतिकूल गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल, यकृत और चयापचय दुष्प्रभाव। इसके विपरीत, पारंपरिक हर्बल दवाओं में बहु-लक्ष्य विनियामक विशेषताएं और अपेक्षाकृत हल्के सुरक्षा प्रोफाइल होते हैं, इसलिए मूड-विकार सहायक चिकित्सा के लिए शोध में रुचि बढ़ रही है।

सिस्टैंच डेजर्टिकोलाऔरसिस्टैंच ट्यूबुलोसा, जिसे आमतौर पर "रेगिस्तान जिनसेंग" नाम दिया गया है, ओरोबैंचेसी परिवार से संबंधित है। उनके मांसल तने पारंपरिक एशियाई हर्बल अभ्यास में क्लासिक घरेलू औषधीय-खाद्य कच्चे माल के रूप में काम करते हैं। आधुनिक फार्माकोलॉजिकल जांच कई न्यूरोप्रोटेक्टिव बायोएक्टिविटीज़ का दस्तावेजीकरण करती हैCistancheअर्क, जिसमें अल्जाइमर रोग और पार्किंसंस रोग के खिलाफ न्यूरोडीजेनेरेशन विरोधी प्रभाव शामिल हैं। फेनिलथेनॉल ग्लाइकोसाइड्स अंदर प्रमुख बायोएक्टिव अंश बनाते हैंCistancheअर्क, जिसमें मुख्य रूप से इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड शामिल हैं। सिस्टैंच फेनिलएथेनॉल ग्लाइकोसाइड्स (सीपीएचजी) कई प्रायोगिक प्लेटफार्मों पर एंटी-ट्यूमर, एंटीऑक्सिडेंट, इम्यूनोमॉड्यूलेटरी और न्यूरो-सुरक्षात्मक जैव सक्रियता प्रदर्शित करते हैं।

पूर्व प्रारंभिक प्रयोगशाला कार्य से पता चला है कि सीपीएचजी स्ट्राइटल डोपामाइन एकाग्रता को बढ़ा सकते हैं और कृंतक पशु मॉडल में रजोनिवृत्ति-संबंधी अवसादग्रस्तता-जैसे फेनोटाइप को कम कर सकते हैं। हालाँकि, क्या सीपीएचजी क्रोनिक-तनाव-ट्रिगर अवसाद पर सुरक्षात्मक प्रभाव उत्पन्न करते हैं, और ऐसी बायोएक्टिविटी की मध्यस्थता करने वाले विस्तृत सिग्नल ट्रांसडक्शन कैस्केड में अभी भी व्यवस्थित अन्वेषण का अभाव है। दीर्घकालिक अप्रत्याशित हल्के तनाव (सीयूएमएस) पशु प्रतिमान एक अच्छी तरह से स्थापित पूर्व-नैदानिक ​​​​अवसाद मॉडल के रूप में खड़ा है। लगातार हफ्तों में प्रयोगशाला कृंतकों को विविध यादृच्छिक हल्के तनावों के संपर्क में लाकर, सीयूएमएस विश्वसनीय रूप से एनाडोनिया, व्यवहारिक निराशा और हिप्पोकैम्पस न्यूरोपैथोलॉजिकल क्षति जैसे मुख्य अवसादग्रस्तता लक्षणों को दोहराता है।

तदनुसार, इस शोध ने सीपीएचजी की तीन क्रमिक खुराकों की इन-विवो एंटीडिप्रेसेंट-जैसी क्षमता का व्यवस्थित मूल्यांकन करने के लिए सीयूएमएस-प्रेरित अवसादग्रस्त माउस मॉडल का निर्माण किया। हमने विशेष रूप से मोनोमाइन न्यूरोट्रांसमीटर रिकवरी, हिप्पोकैम्पस ग्लियाल सेल फेनोटाइपिक ट्रांसफॉर्मेशन और टीएलआर4/एनएफ‑κबी-शासित एनएलआरपी3 इन्फ्लामेसोम न्यूरो-इंफ्लेमेटरी पाथवे पर ध्यान केंद्रित किया। इस अध्ययन का उद्देश्य अवसादग्रस्त लक्षणों में सुधार को लक्षित करने वाले भविष्य के फार्मास्युटिकल विकास और सीपीएचजी के कार्यात्मक-खाद्य अनुप्रयोग का समर्थन करने के लिए वस्तुनिष्ठ प्रयोगात्मक साक्ष्य प्रस्तुत करना है।

2। सामग्री और विधि

2.1 प्रायोगिक सामग्री, अभिकर्मक और उपकरण

मानकीकृत सीपीएचजी कच्चा अर्क हॉटन डिचेन फार्मास्युटिकल बायोलॉजिकल कंपनी लिमिटेड (बैच नंबर . 20231221, झिंजियांग, चीन) से प्राप्त किया गया था। कुल फेनिलथेनॉल ग्लाइकोसाइड सामग्री 85% से अधिक या उसके बराबर, इचिनाकोसाइड युक्त 40% से अधिक या उसके बराबर और वर्बास्कोसाइड 16% से अधिक या उसके बराबर। फ्लुओक्सेटीन हाइड्रोक्लोराइड कैप्सूल पैथियन फ्रांस से प्राप्त किए गए थे। 5‑HT, DA, iNOS, COX‑2, PGE2, TNF‑ , IL‑1 , IL‑18, IL‑6, IFN‑ के लिए वाणिज्यिक एलिसा परख किट योग्य जैविक अभिकर्मक आपूर्तिकर्ताओं से प्राप्त किए गए थे। इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री और इम्यूनोफ्लोरेसेंस के लिए लागू प्राथमिक एंटीबॉडी में एंटी-जीएफएपी, एंटी-आईबीए-1, एंटी-एनएलआरपी3, एंटी-कैस्पेज़-1, एंटी-टीएलआर4 और एंटी-फॉस्फो-एनएफ-κबी पी65 एंटीबॉडी शामिल हैं। पैराफिन ब्रेन-सेक्शन प्रसंस्करण के लिए एचई और निस्सल स्टेनिंग के लिए हिस्टोलॉजिकल स्टेनिंग किट तैयार किए गए थे।

प्रमुख प्रयोगशाला विश्लेषणात्मक उपकरणों में उच्च-परिशुद्धता इलेक्ट्रॉनिक विश्लेषणात्मक संतुलन, मिल्ली-क्यू अल्ट्राप्योर-जल शोधन कार्य केंद्र, स्पेक्ट्रामैक्स मल्टी-मोड माइक्रोप्लेट रीडर, लीका ईमानदार प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप, साथ ही पूर्ण कृंतक व्यवहार-विश्लेषण हार्डवेयर और स्मार्ट 3.0 मोशन-ट्रैकिंग सॉफ़्टवेयर सिस्टम शामिल हैं।

साठ नर एसपीएफ़-ग्रेड सी57बीएल/6 चूहे, सात-सप्ताह पुराने, प्रारंभिक शरीर-वजन सीमा 18-22 ग्राम के साथ, बीजिंग वाइटल रिवर लेबोरेटरी एनिमल टेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड से खरीदे गए थे। सभी माउस प्रयोगात्मक जोड़तोड़ को चीनी चिकित्सा के शानक्सी विश्वविद्यालय की पशु आचार समिति (नैतिकता अनुमोदन आईडी: एसयूसीएमडीएल20231015003) द्वारा औपचारिक नैतिक अनुमोदन प्राप्त हुआ। चूहों को विशिष्ट-रोगज़नक़-मुक्त पशु आवास सुविधाओं के अंदर रखा गया था। पर्यावरणीय मापदंडों को परिवेश के तापमान (21 ± 2) डिग्री, सापेक्ष आर्द्रता 60% ± 10% पर बनाए रखा गया, मानक 12 घंटे के प्रकाश-अंधेरे रोशनी चक्र को लागू किया गया। कृंतक चाउ और पीने का पानी यथाशीघ्र उपलब्ध था। औपचारिक प्रायोगिक वर्कफ़्लो शुरू करने से पहले एक सप्ताह की अनुकूली अनुकूलन अवधि पूरी की गई।

2.2 पशु समूहन, सीयूएमएस मॉडलिंग और औषधि प्रशासन

एक सप्ताह की अनुकूली वृद्धि के बाद, प्रारंभिक सुक्रोज-वरीयता स्क्रीनिंग में अंतर्निहित कम चीनी-पीने की प्राथमिकता वाले व्यक्तिगत चूहों को बाहर रखा गया। योग्य प्रायोगिक चूहों को छह अध्ययन समूहों में यादृच्छिक किया गया (प्रत्येक समूह में n = 10 जानवर):

नियंत्रण समूह (कॉन): कोई सीयूएमएस तनाव नहीं, आइसोवॉल्यूमेट्रिक विआयनीकृत पानी का इंट्रागैस्ट्रिक प्रशासन;

सीयूएमएस मॉडल समूह (मॉड): पूर्ण सीयूएमएस उत्तेजना प्राप्त करना, समान मात्रा में विआयनीकृत पानी के साथ गैवेज;

उच्च खुराक सीपीएचजी समूह (सीपीएचजी-एच): सीयूएमएस एक्सपोजर, सीपीएचजी 700 मिलीग्राम/किलोग्राम शरीर का वजन दैनिक गेज द्वारा;

मध्यम-खुराक सीपीएचजी समूह (सीपीएचजी-एम): सीयूएमएस एक्सपोजर, दैनिक गैवेज द्वारा सीपीएचजी 350 मिलीग्राम/किग्रा;

कम खुराक वाले सीपीएचजी समूह (सीपीएचजी-एल): सीयूएमएस एक्सपोजर, सीपीएचजी 175 मिलीग्राम/किग्रा दैनिक गैवेज द्वारा;

फ्लुओक्सेटीन पॉजिटिव-कंट्रोल ग्रुप (एफएलएक्स): सीयूएमएस एक्सपोजर, फ्लुओक्सेटीन 15 मिलीग्राम/किग्रा गैवेज प्रति दिन एक बार।

सीयूएमएस मॉडल के निर्माण के लिए, दस अलग-अलग प्रकार के हल्के तनाव को अपनाया गया: शारीरिक संयम (60 मिनट), क्षैतिज झटकों की उत्तेजना (60 मिनट), पूंछ निलंबन (60 मिनट), 45 डिग्री के कोण पर झुका हुआ पिंजरा (24 घंटे), नम बिस्तर का वातावरण (24 घंटे), खाली पिंजरे का अलगाव (24 घंटे), रात भर प्रकाश-रोशनी (12 घंटे), 5 मिनट के लिए 41 डिग्री पर गर्म पानी में तैरना, 4 डिग्री पर ठंडे पानी में तैरना। 5 मिनट, और टेल-क्लिप उत्तेजना 2 मिनट तक चलती है। हर दिन दो अलग-अलग तनाव कारकों को यादृच्छिक रूप से लागू किया गया; समान तनाव लगातार दो आसन्न दिनों में प्रकट नहीं होगा। सीयूएमएस मॉडलिंग प्रक्रिया चार सप्ताह तक जारी रही।

चार सप्ताह के तनाव मॉडलिंग को पूरा करने पर, संबंधित परीक्षण पदार्थ या विलायक वाहन को लगातार चार सप्ताह तक प्रतिदिन एक बार इंट्रागैस्ट्रिक रूप से वितरित किया गया। आठवें प्रायोगिक सप्ताह में, सभी न्यूरोबिहेवियरल डिटेक्शन परियोजनाओं को क्रमिक रूप से लागू किया गया।

2.3 न्यूरो-व्यवहार परीक्षण बैटरी

2.3.1 सुक्रोज वरीयता परीक्षण (एसपीटी)

सुक्रोज वरीयता परीक्षण कृंतकों में एनहेडोनिया-जैसे कोर अवसादग्रस्त फेनोटाइप का मूल्यांकन करता है। औपचारिक माप से पहले, प्रत्येक चूहे को व्यक्तिगत रूप से रखा जाता था। तीन दिवसीय सुक्रोज-पेय अनुकूलन चरण निष्पादित किया गया। पहला दिन: 1% सुक्रोज घोल की दो बोतलें 24 घंटे के लिए प्रत्येक पिंजरे में रखी गईं। दूसरा दिन: एक सुक्रोज-समाधान की बोतल को एक शुद्ध पानी की बोतल के साथ जोड़ा गया। दिन-तीन: स्थान पूर्वाग्रह प्रभाव को खत्म करने के लिए चीनी-पानी और शुद्ध-पानी के कंटेनरों की अदला-बदली करें। अनुकूलन चक्र के बाद, चूहों ने 24 घंटे तक भोजन और पानी से उपवास रखा। इसके बाद, पहले से तौली गई 1% सुक्रोज पानी की बोतल और शुद्ध पानी की बोतल प्रदान की गई। 12 घंटे के बाद बोतल की स्थिति बदल दी गई। कुल 24 घंटे की परीक्षण अवधि के बाद, दोनों बोतलों का शेष तरल वजन सटीक रूप से दर्ज किया गया। सुक्रोज-वरीयता दर (%)=(सुक्रोज-समाधान की खपत)/(सुक्रोज-समाधान की खपत + शुद्ध-पानी की खपत) × 100%।

2.3.2 ओपन-फील्ड टेस्ट (ओएफटी)

ओपन-फील्ड उपकरण ने 50 सेमी × 50 सेमी × 50 सेमी ओपन-टॉप क्यूबिक बॉक्स बनाया। केंद्रीय वर्ग क्षेत्र को मैदान के अंदर केंद्रित 25 सेमी × 25 सेमी केंद्रीय क्षेत्र के रूप में परिभाषित किया गया था। प्रत्येक माउस को धीरे से खुले-क्षेत्र बॉक्स की केंद्रीय सतह पर रखा गया था। पांच मिनट के निःशुल्क अनुकूलन समय की अनुमति थी। व्यवहार रिकॉर्डिंग और डेटा विश्लेषण बाद की पांच मिनट की अवलोकन अवधि पर केंद्रित है। प्राथमिक रीड-आउट संकेतकों में कुल आवाजाही की दूरी, केंद्रीय क्षेत्र के अंदर बिताया गया समय और केंद्रीय-क्षेत्र प्रविष्टियों की आवृत्ति शामिल थी। ये पैरामीटर अपरिचित पर्यावरणीय परिस्थितियों में सहज लोकोमोटर गतिविधि और खोजपूर्ण इच्छा को दर्शाते हैं।

2.3.3 टेल सस्पेंशन टेस्ट (टीएसटी)

चूहे की पूंछ वाले हिस्से को सुरक्षित रूप से बांधा गया था, जिससे जानवर जमीन की सतह से ऊपर उल्टा लटक सका। कुल रिकॉर्डिंग का समय छह मिनट था। बाद के चार मिनट के खंड के दौरान स्थिर समय अवधि का दस्तावेजीकरण किया गया था। बढ़ी हुई गतिहीनता समय बढ़ी हुई व्यवहार-निराशा अवसादग्रस्तता जैसी स्थिति का प्रतिनिधित्व करती है।

2.3.4 फोर्स्ड-स्विम टेस्ट (एफएसटी)

पारदर्शी बेलनाकार तैराकी बैरल (व्यास 15 सेमी, ऊंचाई 50 सेमी) पानी से भरा हुआ था (25 ± 2) डिग्री पर बनाए रखा गया था; पानी की गहराई 20 सेमी तक पहुंच गई। प्रत्येक चूहे को छह मिनट के कुल रिकॉर्डिंग अंतराल के लिए धीरे से स्विमिंग कंटेनर में रखा गया। पिछले चार मिनट की फ़्लोटिंग गतिहीनता का समय सांख्यिकीय रूप से निर्धारित किया गया था। लंबी गतिहीनता अवधि गहन निराशा-संबंधित व्यवहार प्रदर्शन को इंगित करती है।

2.4 नमूना संग्रह और ऊतक तैयार करना

सप्ताह‑8 प्रायोगिक टर्मिनल बिंदु पर, चूहों को गहरे एनेस्थीसिया के लिए 3% पेंटोबार्बिटल सोडियम (10 एमएल/किग्रा) का इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन दिया गया। नेत्रगोलक-निकासी रक्तस्राव तकनीक के माध्यम से रक्त के नमूने एकत्र किए गए। इसके बाद सर्वाइकल-डिस्लोकेशन इच्छामृत्यु का प्रदर्शन किया गया। शीत सामान्य-सलाइन कार्डियक छिड़काव से मस्तिष्क के ऊतकों के अंदर परिसंचारी रक्त साफ हो गया। पूरे मस्तिष्क के नमूनों को तेजी से विच्छेदित किया गया। बाद के ऊतक विज्ञान के लिए 72 घंटे के ऊतक-निर्धारण के लिए आधे मस्तिष्क के ऊतकों को 4% पैराफॉर्मल्डिहाइड समाधान के भीतर डुबोया गया था। हिप्पोकैम्पस मस्तिष्क क्षेत्रों को पूर्व-ठंडा बर्फ मंच पर शेष मस्तिष्क नमूनों से तेजी से अलग किया गया और तरल-नाइट्रोजन भंडारण वातावरण के अंदर संरक्षित किया गया। जैव रासायनिक माप के लिए, 10 मिलीग्राम हिप्पोकैम्पस ऊतक के नमूने को बर्फ-स्नान यांत्रिक समरूपीकरण से गुजरते हुए द्रव्यमान-आयतन अनुपात 1:9 के बाद पूर्व-ठंडा सामान्य खारा के साथ मिलाया गया था। ऊतक होमोजेनेट को 15 मिनट के लिए 4000 आर/मिनट के तहत सेंट्रीफ्यूज किया गया था, और एलिसा बायोमार्कर मात्रा निर्धारण के लिए सतह पर तैरनेवाला अंश एकत्र किए गए थे।

2.5 जैवरासायनिक सूचकांक मापन

वाणिज्यिक एलिसा किट के निर्माता ऑपरेटिंग मैनुअल के अनुसार, 5‑HT और DA सहित मोनोमाइन न्यूरोट्रांसमीटर के एकाग्रता मूल्यों को प्राप्त करने के लिए सीरम और हिप्पोकैम्पस होमोजेनेट के सतह पर तैरनेवाला नमूनों को मापा गया था। हिप्पोकैम्पल होमोजेनेट सुपरनैटेंट को सूजन-मध्यस्थ संकेतक iNOS, COX-2, PGE2, प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स TNF‑, IL-1, IL-18, IL-6 और IFN‑ के साथ-साथ जांचा गया। ऑप्टिकल-घनत्व अवशोषक रीडिंग को माइक्रोप्लेट स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के माध्यम से कैप्चर किया गया। साइटोकिन का पता लगाने से पहले बीसीए प्रोटीन-मात्राकरण किट का उपयोग करके नमूना प्रोटीन एकाग्रता को कैलिब्रेट किया गया था।

2.6 हिप्पोकैम्पस हिस्टोपैथोलॉजिकल स्टेनिंग

स्थिर मस्तिष्क ऊतक के नमूनों को पैराफिन मोम के भीतर एम्बेड किया गया और 4‑μm-मोटाई वाले हिस्टोलॉजिकल अनुभागों में काटा गया। एचई स्टेनिंग के लिए: पैराफिन सेक्शन जाइलीन डीवैक्सिंग, ग्रेडिएंट इथेनॉल हाइड्रेशन, हेमेटोक्सिलिन न्यूक्लियर स्टेनिंग, ईओसिन साइटोप्लास्मिक काउंटर-स्टेनिंग, हाइड्रोक्लोरिक-अल्कोहल विभेदन, ग्रेडिएंट इथेनॉल डिहाइड्रेशन, जाइलीन ट्रांसपेरेंसी ट्रीटमेंट और न्यूट्रल गम माउंटिंग से गुजरे। सूक्ष्म अवलोकन हिप्पोकैम्पस डेंटेट गाइरस क्षेत्र के भीतर सेलुलर आकृति विज्ञान, परमाणु स्थिति और साइटोप्लाज्मिक संरचनात्मक अखंडता पर केंद्रित है।

निस्सल स्टेनिंग न्यूरोनल निस्सल कणिकाओं की कल्पना करता है जो न्यूरोनल बायोसिंथेटिक गतिविधि और कोशिका जीवन शक्ति को दर्शाता है। डीवैक्सयुक्त पैराफिन स्लाइस को निस्सल स्टेनिंग वर्किंग सॉल्यूशन में इनक्यूबेट किया गया। आसुत जल धोने के चरणों के बाद, अनुभागों को निर्जलीकरण, पारदर्शिता प्रक्रिया और सीलिंग प्राप्त हुई। ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप के तहत हिप्पोकैम्पस न्यूरॉन्स की हिस्टोमोर्फोलॉजिकल विविधताएं देखी गईं।

2.7 इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री परख

पैराफिन-एम्बेडेड हिप्पोकैम्पस ऊतक अनुभागों को डीवैक्स किया गया और हाइड्रेटेड किया गया। एंटीजन पुनर्प्राप्ति, अंतर्जात पेरोक्सीडेज अवरोधन और गैर-विशिष्ट प्रोटीन-बाध्यकारी अवरोधन चरणों को क्रमिक रूप से कार्यान्वित किया गया। ऊतक के टुकड़ों को पतला प्राथमिक एंटीबॉडी के साथ 4 डिग्री तापमान पर रात भर इनक्यूबेट किया गया: एंटी-जीएफएपी (1:400), एंटी-आईबीए-1 (1:400), एंटी-एनएलआरपी3 (1:300), एंटी-कैस्पेज़-1 (1:400)। द्वितीयक-एंटीबॉडी ऊष्मायन के बाद, डीएबी क्रोमोजेनिक प्रतिक्रिया की गई। न्यूक्लियस काउंटर-स्टेनिंग, निर्जलीकरण और माउंटिंग प्रक्रियाएं पूरी की गईं। लाइट-माइक्रोस्कोप ने दृश्य क्षेत्र की डिजिटल छवियां खींचीं। इमेज-जे इमेज-प्रोसेसिंग सॉफ्टवेयर ने लक्ष्य-प्रोटीन अभिव्यक्ति तीव्रता का अर्ध-मात्रात्मक मूल्यांकन करने के लिए औसत ऑप्टिकल-घनत्व मानों की गणना की।

2.8 इम्यूनोफ्लोरेसेंस धुंधलापन

तैयार पैराफिन हिप्पोकैम्पल अनुभागों में डीवैक्सिंग, एंटीजन पुनर्प्राप्ति और ब्लॉकिंग ऑपरेशन का अनुभव हुआ। प्राथमिक एंटीबॉडी एंटी-टीएलआर4 (1:400) और एंटी-फॉस्फो-एनएफ-κबी पी65 (1:200) लगाए गए और रात भर चार-डिग्री-सेल्सियस स्थिति में इनक्यूबेट किए गए। प्रकाश-परिरक्षण स्थिति के तहत एक घंटे के ऊष्मायन के लिए फ्लोरोसेंट-लेबल वाले माध्यमिक एंटीबॉडी जोड़े गए थे। डीएपीआई परमाणु काउंटर-स्टेन को बढ़ते माध्यम में शामिल किया गया था। लेजर-प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप ने प्रतिदीप्ति संकेतों का फोटो खींचा। इमेज‑J सॉफ़्टवेयर ने TLR4 और p‑NF‑κB p65 प्रोटीन सक्रियण परिमाण का प्रतिनिधित्व करने वाली औसत प्रतिदीप्ति तीव्रता की गणना की।

2.9 सांख्यिकीय विश्लेषण

मूल प्रायोगिक डेटा को SPSS 26.0 सांख्यिकी सॉफ़्टवेयर और ग्राफ़पैड प्रिज़्म 9.0 ग्राफ़िंग प्रोग्राम का उपयोग करके संसाधित किया गया था। सभी मात्रात्मक परिणाम डेटा को माध्य ± मानक विचलन (\\(\\bar{x} \\pm s\\)) के रूप में व्यक्त किया गया था। उचित सांख्यिकीय परीक्षणों के साथ अंतर-समूह सांख्यिकीय तुलनाएं की गईं। 0.05 से कम पी-मान को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अंतर माना गया; पी< 0.01 represented highly significant statistical distinction.

3. प्रायोगिक परिणाम

3.1 सीपीएचजी ने एनहेडोनिया लक्षण में सुधार किया और मोनोमाइन न्यूरोट्रांसमीटर स्तर को बहाल किया

सीयूएमएस मॉडलिंग आरंभ होने से पहले, बेसलाइन सुक्रोज-वरीयता दरों ने सभी प्रायोगिक पशु समूहों में कोई स्पष्ट सांख्यिकीय भिन्नता प्रदर्शित नहीं की। चार सप्ताह के सीयूएमएस तनाव और चार सप्ताह के हस्तक्षेप चक्रों के बाद, सीयूएमएस-मॉडल समूह ने गैर-तनावग्रस्त नियंत्रण जानवरों (पी) के सापेक्ष सुक्रोज-वरीयता अनुपात में स्पष्ट रूप से कमी देखी।< 0.01), demonstrating successful establishment of anhedonia depressive‑like phenotype. Serum and hippocampal tissue 5‑HT and DA concentrations in Mod group were significantly reduced compared with Con group (P < 0.05 or P < 0.01).

मॉड मॉडल समूह की तुलना में, उच्च‑, मध्यम‑ और कम खुराक वाले सीपीएचजी उपचार समूहों के साथ-साथ फ्लुओक्सेटीन सकारात्मक समूह ने सुक्रोज‑वरीयता प्रतिशत, सीरम 5‑एचटी, सीरम डीए, हिप्पोकैम्पल 5‑एचटी और हिप्पोकैम्पल डीए सामग्री (पी) पर प्रमुख उन्नयन उत्पन्न किया।< 0.05 or P < 0.01). Pharmacological improvement effect exhibited apparent dose‑dependent tendency; high‑dose CPhGs group achieved more robust biomarker‑rescue outcome than medium‑dose and low‑dose subgroups. This set of findings illustrated CPhGs could ameliorate anhedonic behavioral performance and reverse stress‑provoked depletion of key mood‑regulating monoamine neurotransmitters inside peripheral circulation and hippocampal brain tissue.

3.2 सीपीएचजी ने ओपन-फील्ड टेस्ट में खोजपूर्ण गतिविधि को बढ़ाया

खुले-क्षेत्र व्यवहार मूल्यांकन में, सीयूएमएस-मॉडल चूहों ने कुल आंदोलन दूरी, केंद्रीय-क्षेत्र में रहने का समय और केंद्रीय-क्षेत्र प्रवेश आवृत्ति बनाम नियंत्रण चूहों (पी) पर उल्लेखनीय कमी दिखाई< 0.01). Chronic unpredictable stress suppressed spontaneous exploratory behaviors. Following CPhGs or fluoxetine intervention, those three open‑field‑test indicators increased observably (P < 0.05 or P < 0.01). High‑dose CPhGs‑treated mice displayed 46.63 % increase of total travel distance, 127.92 % growth of central‑zone residence time compared against Mod group. Medium‑dose and low‑dose CPhGs also produced measurable but weaker improvement effects. It indicated CPhGs alleviated stress‑induced suppression of autonomous exploration activity.

3.3 सीपीएचजी ने निराशा-आधारित व्यवहार प्रतिमानों में गतिहीनता का समय कम कर दिया

टेल सस्पेंशन टेस्ट और फोर्स्ड-स्विम टेस्ट व्यवहार संबंधी निराशा का पता लगाता है, जो मूल अवसादग्रस्तता जैसे व्यवहार संबंधी रीड-आउट का प्रतिनिधित्व करता है। मॉड समूह ने टीएसटी और एफएसटी (पी) दोनों में अत्यधिक लंबे समय तक गतिहीनता प्रदर्शित की< 0.01) relative to Con group. After drug intervention, CPhGs‑H, CPhGs‑M, CPhGs‑L and FLX groups generated statistically significant shortening of immobility durations (P < 0.05 or P < 0.01). For forced‑swim immobility time, high‑dose CPhGs brought 34.67 % reduction; medium‑dose 30.71 % reduction; low‑dose 20.78 % reduction. For tail‑suspension immobile time: CPhGs‑H achieved 35.91 % decrease. Results suggested CPhGs mitigated despair‑related passive coping behavioral patterns triggered by long‑term unpredictable stress stimulation.

3.4 सीपीएचजी ने अति-व्यक्त हिप्पोकैम्पल प्रो-इन्फ्लेमेटरी साइटोकिन्स को कम किया

सीयूएमएस-मॉडल जानवरों में हिप्पोकैम्पस प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन सांद्रता (टीएनएफ‑, आईएल‑1, आईएल‑18, आईएल‑6, आईएफएन‑) नियंत्रण समकक्षों (पी) की तुलना में काफी अधिक थी।< 0.01). After CPhGs intervention, these pro‑inflammatory cytokine contents descended in dose‑responsive fashion. High‑dose CPhGs generated the most powerful inhibitory influence. For instance, relative to Mod group, CPhGs‑H decreased TNF‑α level by 42.93 %, lowered IL‑1β by 45.72 %, and reduced IL‑18 by 35.17 %. Medium‑dose CPhGs delivered moderate anti‑inflammatory potency, and low‑dose group exerted limited but detectable inhibitory impacts. This data demonstrated CPhGs could suppress excessive pro‑inflammatory‑cytokine release inside hippocampal tissue under chronic‑stress challenge.

3.5 सीपीएचजी डाउन‑रेगुलेटेड हिप्पोकैम्पल इन्फ्लेमेटरी‑मध्यस्थ बायोमार्कर

सीयूएमएस मॉडल चूहों में हिप्पोकैम्पस सूजन मध्यस्थ iNOS, COX-2 और PGE2 में काफी वृद्धि हुई है (पी)< 0.01). After drug intervention, CPhGs‑H, CPhGs‑M markedly diminished iNOS, COX‑2 and PGE2 concentrations (P < 0.05 or P < 0.01). Low‑dose CPhGs‑L group showed limited statistical significance for partial indicators. High‑dose CPhGs treatment group exhibited iNOS reduction rate reaching 49.55 %, COX‑2 reduction 39.58 %. Collectively, CPhGs suppressed stress‑induced up‑regulation of inflammatory‑mediator molecules inside hippocampus.

3.6 सीपीएचजी क्षीण सीयूएमएस-ट्रिगर हिप्पोकैम्पल न्यूरोनल पैथोलॉजिकल चोट

हे स्टेनिंग के परिणाम: मॉड समूह के हिप्पोकैम्पल डेंटेट-गाइरस न्यूरॉन्स ने गंभीर रोग संबंधी घाव प्रस्तुत किए: अव्यवस्थित सेलुलर व्यवस्था, न्यूक्लियस पाइकोनोसिस, साइटोप्लास्मिक वेक्यूलर डिजनरेशन, प्रमुख न्यूरोनल क्षति को प्रकट करना। CPhGs‑L समूह ने केवल मामूली सुधार प्रभाव दिखाया। मध्यम-खुराक और उच्च-खुराक सीपीएचजी ने स्पष्ट रूप से ऐसे रोग संबंधी परिवर्तनों को उलट दिया; उच्च खुराक वाले सीपीएचजी-एच समूह ने आंशिक दृश्य क्षेत्रों में फ्लुओक्सेटीन समूह की तुलना में बेहतर न्यूरोनल-सुरक्षा प्रभाव प्रदर्शित किया।

निस्सल-स्टेनिंग परिणाम: मॉड-समूह हिप्पोकैम्पस न्यूरॉन्स ने अव्यवस्थित व्यवस्था का प्रदर्शन किया, निस्सल कणिका मात्रा में स्पष्ट कमी, जो बिगड़ा हुआ न्यूरोनल सिंथेटिक फ़ंक्शन और कम सेलुलर जीवन शक्ति को दर्शाता है। सीपीएचजी प्रशासन खुराक-निर्भरता से निस्सल-शरीर प्रचुरता को बहाल करता है। CPhGs-H समूह के भीतर न्यूरोनल आकृति विज्ञान और निस्सल-कॉर्पसकल घनत्व सामान्य नियंत्रण-समूह स्तर पर पहुंच गया। हिस्टोपैथोलॉजिकल निष्कर्षों ने पुष्टि की कि सीपीएचजी ने क्रोनिक-तनाव-मध्यस्थ विनाश के खिलाफ हिप्पोकैम्पस न्यूरॉन अखंडता की रक्षा की।

3.7 सीपीएचजी विनियमित हिप्पोकैम्पल ग्लियाल-सेल सक्रियण स्थिति

जीएफएपी एस्ट्रोसाइट आबादी के लिए विशिष्ट बायोमार्कर है। कॉन समूह की तुलना में, मॉड-समूह हिप्पोकैम्पस जीएफएपी सकारात्मक-सिग्नल तीव्रता में काफी गिरावट आई (पी)< 0.01), indicating massive astrocyte functional impairment induced by CUMS stress. CPhGs‑H and CPhGs‑M intervention groups distinctly elevated GFAP expression level (P < 0.05 or P < 0.01); high‑dose CPhGs‑H enhanced GFAP average optical density by 64.23 % relative to Mod group. Low‑dose CPhGs‑L generated upward trend without statistical significance.

Iba-1 प्रोटीन मार्कर माइक्रोग्लिया का प्रतिनिधित्व करता है। CUMS मॉडल समूह ने नाटकीय रूप से बढ़ा हुआ Iba‑1 सकारात्मक‑अभिव्यक्ति संकेत (P) प्रदर्शित किया< 0.01), implying robust microglia hyper‑activation. After CPhGs intervention, Iba‑1 expression intensity decreased dose‑dependently. CPhGs‑H produced 23.73 % reduction of Iba‑1 optical‑density value versus Mod group. It illustrated CPhGs preserved astrocyte abundance while dampening pathological microglia over‑activation inside hippocampal compartments.

3.8 सीपीएचजी ने हिप्पोकैम्पस एनएलआरपी3‑इन्फ्लैमसोम‑संबंधित‑प्रोटीन अभिव्यक्ति को बाधित किया

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री का पता लगाने से मॉड-ग्रुप हिप्पोकैम्पस के अंदर एनएलआरपी3 और कैस्पेज़-1 प्रोटीन की अभिव्यक्ति स्पष्ट रूप से ऊपर-विनियमित की गई (पी)< 0.01). Following CPhGs treatment, NLRP3 and Caspase‑1 protein abundance declined dose‑responsively. High‑dose CPhGs‑H decreased NLRP3 expression by 50.00 %, lowered Caspase‑1 expression level by 57.65 %. It demonstrated CPhGs suppressed pathological NLRP3 inflammasome complex activation in CUMS‑damaged hippocampal tissue.

3.9 सीपीएचजी ने टीएलआर4/एनएफ‑κबी सिग्नलिंग पाथवे के अत्यधिक सक्रियण को दबा दिया

इम्यूनोफ्लोरेसेंस डिटेक्शन से पता चला कि CUMS-मॉडल चूहों ने TLR4 रिसेप्टर और फॉस्फोराइलेटेड NF-κB p65 सबयूनिट (P) की काफी बढ़ी हुई प्रतिदीप्ति तीव्रता प्रदर्शित की< 0.01). CPhGs intervention obviously reduced TLR4 and p‑NF‑κB p65 fluorescence signal strength (P < 0.05 or P < 0.01). Combined with above‑mentioned NLRP3 inflammasome‑protein detection results, these observations supported the inference: CPhGs inhibited TLR4/NF‑κB upstream signal‑cascade hyper‑activation, which sequentially restrained downstream NLRP3 inflammasome assembly and neuro‑inflammatory cascade amplification.

4. चर्चा

प्रमुख अवसादग्रस्तता विकार गंभीर न्यूरो-मनोरोग रोग का गठन करता है। हाल के वर्षों में, अवसाद के न्यूरो-इन्फ्लेमेटरी सिद्धांत ने व्यापक शोध का ध्यान आकर्षित किया है। बार-बार दोहराया जाने वाला मनोवैज्ञानिक तनाव केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के अंदर जन्मजात-प्रतिरक्षा-प्रणाली सक्रियण को ट्रिगर कर सकता है। हिप्पोकैम्पस, एक मस्तिष्क क्षेत्र जो तनाव अपमान के प्रति अत्यधिक संवेदनशील है, मूड मॉड्यूलेशन, रिवॉर्ड प्रोसेसिंग और मेमोरी फ़ंक्शन के साथ घनिष्ठ रूप से जुड़ा हुआ है। निरंतर तनाव उत्तेजना के तहत, हिप्पोकैम्पस ग्लियाल-सेल होमोस्टैसिस ढह जाता है। हाइपर-सक्रिय माइक्रोग्लिया और क्षतिग्रस्त एस्ट्रोसाइट्स बड़ी मात्रा में प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स का स्राव करते हैं, जो न्यूरोनल संरचनात्मक चोट, मोनोमाइन-न्यूरोट्रांसमीटर चयापचय विकार को जन्म देते हैं, अंततः अवसाद जैसे व्यवहार उद्भव को बढ़ावा देते हैं।

पारंपरिक हर्बल-चिकित्सा-व्युत्पन्न सक्रिय प्राकृतिक उत्पादों में बहु-लक्ष्य औषधीय लाभ होते हैं, जो अवसादरोधी दवा की खोज के लिए आशाजनक उम्मीदवार संसाधन बन जाते हैं। सीपीएचजी हस्ताक्षरित जैव-सक्रिय घटक हैं जिन्हें पृथक किया गया हैCistancheऔषधीय जड़ी बूटी. इस शोध ने सीयूएमएस-प्रेरित क्रोनिक-तनाव अवसाद माउस मॉडल का निर्माण किया, जो ग्रेडिएंट-डोज़ सीपीएचजी की इन-विवो एंटीडिप्रेसेंट-जैसी प्रभावकारिता को व्यापक रूप से सत्यापित करता है। व्यवहारिक प्रयोगात्मक परिणामों से पता चला है कि सीपीएचजी उपचार से एनहेडोनिया लक्षण में काफी सुधार हुआ है, खोजपूर्ण गतिविधि में सुधार हुआ है, और अवसाद-मॉडल चूहों में निराशा-संबंधी गतिहीनता का समय कम हो गया है, जो स्पष्ट खुराक-प्रभाव सहसंबंध दिखाता है।

मोनोमाइन न्यूरोट्रांसमीटर परिकल्पना क्लासिक अवसाद-रोगजनन सिद्धांत है। सेरोटोनिन और डोपामाइन भावनात्मक स्थिरीकरण, इनाम-प्रतिक्रिया धारणा और प्रेरणा-संबंधित व्यवहार मॉड्यूलेशन को कवर करते हुए महत्वपूर्ण नियामक भूमिका निभाते हैं। सीयूएमएस तनाव के कारण हमारे मॉडल जानवरों में सीरम और हिप्पोकैम्पस ऊतक के भीतर 5‑HT और DA सांद्रता में स्पष्ट गिरावट आई। सीपीएचजी के हस्तक्षेप ने इन दो मोनोमाइन न्यूरोट्रांसमीटर स्तरों को प्रभावी ढंग से बहाल कर दिया। यह परिणाम पहले प्रकाशित शोध रिपोर्टों के अनुरूप हैCistancheमस्तिष्क मोनोमाइन न्यूरोट्रांसमीटर को मॉड्यूलेट करने वाले अर्क।

आगे जैव रासायनिक बायोमार्कर परीक्षण से पता चला कि सीयूएमएस ने हिप्पोकैम्पस ऊतक के भीतर कई प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स (टीएनएफ‑, आईएल‑1, आईएल‑18, आईएल‑6, आईएफएन‑) प्लस इंफ्लेमेटरी मध्यस्थों (आईएनओएस, सीओएक्स‑2, पीजीई2) की मजबूत वृद्धि को प्रेरित किया। सीपीएचजी के हस्तक्षेप ने ऐसी भड़काऊ अति-अभिव्यक्ति स्थिति को काफी हद तक उलट दिया। हिस्टोपैथोलॉजिकल एचई और निस्सल स्टेनिंग ने सहज रूप से साबित कर दिया कि सीपीएचजी ने तनाव के कारण होने वाले हिप्पोकैम्पल-न्यूरॉन क्षति को कम किया और न्यूरोनल रूपात्मक अखंडता की रक्षा की।

ग्लियाल-सेल आबादी न्यूरो-भड़काऊ प्रतिक्रियाओं में मध्यस्थता करने वाले केंद्रीय प्रतिभागियों के रूप में कार्य करती है। एस्ट्रोसाइट्स न्यूरोट्रांसमीटर रीसाइक्लिंग, रक्त-मस्तिष्क-बाधा संरचनात्मक स्थिरता और न्यूरोनल पोषण आपूर्ति को बनाए रखते हैं। माइक्रोग्लिया मस्तिष्क पैरेन्काइमा के अंदर निवासी जन्मजात-प्रतिरक्षा प्रभावक कोशिकाओं के रूप में कार्य करता है। क्रोनिक तनाव माइक्रोग्लिया पैथोलॉजिकल हाइपर-एक्टिवेशन के साथ-साथ एस्ट्रोसाइट हानि या कार्यात्मक अक्षमता को भड़काता है। हमारे इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री डेटा ने संकेत दिया कि सीपीएचजी उपचार ने जीएफएपी-पॉजिटिव एस्ट्रोसाइट घनत्व को बढ़ा दिया, इस बीच हिप्पोकैम्पस में आईबीए-1-चिह्नित अति-सक्रिय माइक्रोग्लिया मात्रा को कम कर दिया। यह ग्लियाल-सेल-फेनोटाइप नियामक संपत्ति आंशिक रूप से सीपीएचजी के न्यूरो-सुरक्षात्मक और एंटी-डिप्रेशन फार्माकोलॉजिकल क्षमता को रेखांकित कर सकती है।

एनएलआरपी3 इन्फ्लेमसोम न्यूरो-इंफ्लेमेटरी कैस्केड की मध्यस्थता करने वाले महत्वपूर्ण आणविक मंच का प्रतिनिधित्व करता है। इसकी सक्रियता डाउनस्ट्रीम IL-1 और IL-18 प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स की परिपक्वता और स्राव को बढ़ाती है। टीएलआर4/एनएफ‑κबी सिग्नल अक्ष एनएलआरपी3 इन्फ्लेमसोम सक्रियण के लिए आवश्यक अपस्ट्रीम प्राइमिंग सिग्नल के रूप में कार्य करता है। टीएलआर4 रिसेप्टर उत्तेजना एनएफ-κबी सबयूनिट फॉस्फोराइलेशन और परमाणु ट्रांसलोकेशन को बढ़ावा देती है, आगे एनएलआरपी3, प्रो-आईएल-1 जीन ट्रांसक्रिप्शन को ट्रांस-एक्टिवेट करती है। हमारे वर्तमान अध्ययन में, CUMS तनाव ने TLR4, फॉस्फोराइलेटेड NF‑κB p65, NLRP3 और कैस्पेज़‑1 प्रोटीन अभिव्यक्ति के लिए समवर्ती वृद्धि को ट्रिगर किया। सीपीएचजी के हस्तक्षेप ने इस संपूर्ण सिग्नल कैस्केड की सक्रियता को स्पष्ट रूप से बाधित कर दिया। इसलिए हम यह निष्कर्ष निकालते हैं कि सीपीएचजी टीएलआर4/एनएफ-κबी-मध्यस्थता वाले एनएलआरपी3 इनफ्लेमसोम सक्रियण को रोककर आंशिक रूप से न्यूरो-इंफ्लेमेटरी चोट को कम करता है।

एक साथ लिया जाए, तो हमारे पशु-मॉडल प्रायोगिक साक्ष्य यंत्रवत मॉडल का समर्थन करते हैं: सीपीएचजी दो प्राथमिक आयामों के माध्यम से सीयूएमएस-प्रेरित अवसादग्रस्त चूहों में एंटीडिप्रेसेंट-जैसे प्रभाव उत्पन्न करते हैं: (1) मूड-संबंधित मोनोमाइन न्यूरोट्रांसमीटर (5-एचटी, डीए) के होमोस्टैसिस को बहाल करना; (2) हिप्पोकैम्पस ग्लियाल-सेल होमोस्टैसिस को संशोधित करना और टीएलआर4/एनएफ-κबी-संचालित एनएलआरपी3 इन्फ्लामासोम-निर्भर न्यूरो-इंफ्लेमेटरी पैथोलॉजिकल कैस्केड को दबाना।

इस जाँच की कई सीमाएँ विचार योग्य हैं। इस कार्य ने पूरी तरह से पशु-स्तर के इन-विवो प्रयोगों को लागू किया। हमने न तो सेलुलर-स्तरीय यांत्रिक सत्यापन किया है और न ही मानव नैदानिक ​​​​परीक्षण। इसलिए, मानव-अवसाद चिकित्सा के प्रति अनुवाद संबंधी निष्कर्ष विवेकपूर्ण रहना चाहिए। इसके अलावा, इस शोध ने मिश्रित सीपीएचजी अर्क के भीतर व्यक्तिगत मोनोमर यौगिकों (इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड) के योगदान का विश्लेषण नहीं किया। भविष्य के अनुसंधान सेल-कल्चर यंत्रवत सत्यापन, व्यक्तिगत-घटक गतिविधि तुलना, साथ ही प्रारंभिक मानव-विषय पायलट अवलोकन पर ध्यान केंद्रित कर सकते हैं।

5। उपसंहार

सिस्टैंच फेनिलएथेनॉल ग्लाइकोसाइड्स (CPhGs) C57BL/6 चूहों में क्रोनिक अप्रत्याशित हल्के-तनाव-उत्तेजित अवसाद-जैसे व्यवहार संबंधी फेनोटाइप के खिलाफ महत्वपूर्ण एंटीडिप्रेसेंट-जैसी औषधीय क्रियाएं उत्पन्न करते हैं। इसके चिकित्सीय-संबंधी तंत्र सीरम और हिप्पोकैम्पस सेरोटोनिन और डोपामाइन न्यूरोट्रांसमीटर के स्तर की वसूली, हिप्पोकैम्पस न्यूरोनल संरचना अखंडता के संरक्षण, एस्ट्रोसाइट-माइक्रोग्लिया कार्यात्मक संतुलन के मॉड्यूलेशन के साथ-साथ टीएलआर 4/एनएफ-κबी/एनएलआरपी 3 इनफ्लेमसोम-मध्यस्थता वाले न्यूरो-इन्फ्लेमेटरी पैथोलॉजिकल कैस्केड के दमन से जुड़े हैं। यह पूर्व-नैदानिक ​​​​पशु अध्ययन अवसादग्रस्तता-लक्षण सुधार को लक्षित करने वाले प्राकृतिक चिकित्सीय सहायक पदार्थ या कार्यात्मक-खाद्य घटक के रूप में सीपीएचजी के आगे के विकास के लिए प्रयोगात्मक संदर्भ प्रदान करता है।

संदर्भ

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