कर्क्यूमिन भाग 2 के एंटीऑक्सीडेंट प्रभाव

Apr 20, 2022

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करक्यूमिन, रुटिन, और करक्यूमिन और रुटिन के संयोजन के साथ चूहों के उपचारित समूहों में एमडीए, जीएसएच, जीएसएसजी, जीएसएच / जीएसएसजी, और कैट चर के औसत प्रभाव में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। इन परिणामों को कम एफ मूल्यों और उपचारों में परिवर्तन के कारण कम भिन्नता द्वारा समर्थित किया गया था (तालिका 3)।

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एमडीए और कैट मार्करों (चित्रा 4) के बारे में नरम ऊतक और रक्त के बीच एक सहसंबंध था।

रुटिन और कर्क्यूमिन के प्रशासन के बाद प्लेसबो समूह (डीपीपी) की तुलना में एमडीए का स्तर काफी कम हो गया। कर्क्यूमिन और रुटिन (डीपीसीआर) के बीच संयोजन का एमडीए स्तरों पर सिर्फ रुटिन (डीपीआर) की तुलना में अधिक सकारात्मक प्रभाव पड़ा और अकेले कर्क्यूमिन (डीपीसी) की तुलना में एक तुलनीय प्रभाव पड़ा। करक्यूमिन और रुटिन (डीपीसीआर) के संयोजन ने अकेले करक्यूमिन (डीपीसी) या रुटिन (डीपीआर) की तुलना में कैट के स्तर में वृद्धि की। Curcumin administrating rutin administrating की तुलना में अधिक सकारात्मक प्रभाव पड़ा।

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चूहों के सभी पांच समूहों के लिए एमडीए और कैट स्तरों के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर था जब विश्लेषण ऊतक स्तर पर किया गया था (तालिका 4)।

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मसूड़े के ऊतक स्तर पर, समूह 1 और अन्य सभी की तुलना में एमडीए मूल्यों के बीच महत्वपूर्ण अंतर थे, जो कैट (तालिका 5) के समान थे।

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3. चर्चा

इस अध्ययन के निष्कर्षों ने संकेत दिया कि रक्त और मसूड़े के ऊतक एमडीए स्तर और कैट गतिविधियों को सभी समूहों में सहसंबद्ध किया गया था।

periodontal अनुसंधान में पशु मॉडल का उपयोग नए biomaterials और उपचार के साथ नैदानिक परीक्षण शुरू करने से पहले एक आवश्यक कदम है। चूहा periodontal रोगों के लिए सबसे बड़े पैमाने पर अध्ययन कृंतक हैरोगजनन, क्योंकि यह छोटा है, बनाए रखने में आसान है, और महंगा नहीं है, और दंत मसूड़े की संरचना मनुष्यों में देखी जाने वाली संरचना के समान है, जिसमें उथले मसूड़े के सल्कस और सीमेंटम के लिए जंक्शनल उपकला का लगाव है। चूहों में महत्वपूर्ण periodontal दोषों के लिए एक सर्जिकल मॉडल मान्य किया गया है, यह विकास कारकों या mesenchymal स्टेम कोशिकाओं के साथ संयोजन में नए biomaterials का परीक्षण करने के लिए संभव बनाने[29,30]. सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले उपभेद विस्टार या स्प्राग-डॉली हैं, इसलिए हमारे शोध में 50 पुरुष विस्टार अल्बिनो चूहों का उपयोग किया गया था।

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Periodontal रोग एक multifactorial रोग subgingival पट्टिका में स्थित विविध माइक्रोबियल वनस्पतियों के कारण होता है। periodontal रोगों का वर्तमान प्रबंधन दांतों से जुड़े माइक्रोबियल लोड को कम करने और सर्जिकल और nonsurgical periodontal प्रक्रियाओं के माध्यम से मसूड़े के स्वास्थ्य को बहाल करने पर केंद्रित है [31]. कर्क्यूमिन, हल्दी का प्रमुख घटक, विरोधी भड़काऊ, रोगाणुरोधी और एंटीऑक्सिडेंट कार्रवाई [32-34] के लिए दिखाया गया है। इन विट्रो अध्ययन [35,36], पशु अध्ययन [27,37], और नैदानिक अध्ययन [38,39] ने दिखाया है कि कर्क्यूमिन और पीरियडोंटाइटिस के विकास के बीच एक सकारात्मक संबंध है।

महामारी विज्ञान के अध्ययनों ने पुष्टि की है कि मधुमेह पीरियडोंटाइटिस के लिए एक महत्वपूर्ण जोखिम कारक है, और पीरियडोंटाइटिस का खतरा अधिक है यदिग्लाइसेमिकनियंत्रण खराब है; खराब नियंत्रित मधुमेह वाले लोग (जो अन्य मैक्रोवैस्कुलर और माइक्रोवैस्कुलर जटिलताओं के लिए भी सबसे अधिक जोखिम में हैं) पीरियडोंटाइटिस और वायुकोशीय हड्डी के नुकसान के बढ़ते जोखिम में हैं[40,41].

रुटिन, फलों (नारंगी, अंगूर, नींबू, सेब और जामुन) में पाया जाने वाला एक साइट्रस फ्लेवोनोइड ग्लाइकोसाइड, कई मल्टीविटामिन तैयारी और हर्बल उपचार [42] की मुख्य सामग्री में से एक है। एंटीऑक्सीडेंट और विरोधी भड़काऊ गुणों और एंटीएजिंग और एंटीकैंसर गुणों से जुड़े साइटोप्रोटेक्टिव कार्यों के कारण, इसमें कुछ प्रलेखित औषधीय प्रभाव हैं[43,44].। ग्लाइसेमिक स्थिति पर रुटिन के लाभकारी प्रभाव औरमाइक्रोवैस्कुलरऔर मधुमेह से जुड़ी मैक्रोवैस्कुलर जटिलताएं इसके हाइपोलिपिडेमिक गुणों के कारण होती हैं। ग्लूकोज की एकाग्रता में कमी को कोशिका झिल्ली पर रुटिन के प्रभाव से और कोशिकाओं में ग्लूकोज के प्रवेश की सुविधा के द्वारा समझाया जा सकता है, इस प्रकार रक्त में ग्लूकोज की रिहाई को कम किया जा सकता है [45]।

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Cistanche प्रतिरक्षा में सुधार कर सकते हैं

इस अध्ययन में, हमने ऑक्सीडेटिव तनाव के प्रभाव और कर्क्यूमिन और रुटिन के प्रभाव की जांच की, अलग से और एक मिश्रण में, मधुमेह चूहों में प्रयोगात्मक रूप से प्रेरित पीरियडोंटाइटिस के एटिओपैथोलॉजी पर।

पीरियडोंटाइटिस की तुलना में तेजी से एक प्रयोगात्मक पीरियडोंटाइटिस की स्थिति को प्राप्त करने के लिए, आमतौर पर होता है, 0.1 मिमी के व्यास के साथ एक स्टेनलेस-स्टील लिगेचर को द्विपक्षीय दूसरे मैंडिबुलर चूहे दाढ़ के चारों ओर रखा गया था[ 46]। चूहे के दाढ़ के चारों ओर एक लिगचर का प्लेसमेंट की उपस्थिति के साथ एक भड़काऊ चुनौती को बढ़ावा देता हैन्यूट्रोफिल, T- औरबी-लिम्फोसाइट्स, अल्सर, और उपकला लगाव के एपिकल माइग्रेशन [47].।

एंटीऑक्सिडेंट और periodontal रोग के बीच सहसंबंध में एक बढ़ती रुचि है। इसलिए, यह शोध एक एकल एंटीऑक्सिडेंट और उन दोनों के मिश्रण के रूप में कर्क्यूमिन और रुटिन का उपयोग करता है। कर्क्यूमिन पीरियडोंटिक्स के उपयोग का मूल्यांकन नैदानिक अध्ययनों [38,39], पशु अध्ययन [37], और इन विट्रो अध्ययनों [35] में किया गया है।

हमने ऑक्सीडेटिव तनाव को निर्धारित करने के लिए बेसलाइन से दिन 70 तक एमडीए, जीएसएच, जीएसएससी, और कैट जैसे मापदंडों का मूल्यांकन किया। हमने पाया कि इन चरों के लिए अनुपचारित समूह और तीन उपचार समूहों के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर है, लेकिन समूह डीपीसी (करक्यूमिन के साथ इलाज किया गया) और डीपीआर (रुटिन के साथ इलाज), डीपीसी (करक्यूमिन के साथ इलाज किया गया) और डीपीसीआर (करक्यूमिन और रुटिन के साथ इलाज किया गया) और डीपीआर (रुटिन के साथ इलाज किया गया) और डीपीआर (करक्यूमिन और रुटिन के साथ इलाज किया गया) और डीपीसीआर (करक्यूमिन और रुटिन के साथ इलाज) के बीच औसत प्रभाव में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था।

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सीरम एमडीए में वृद्धि ने संकेत दिया कि पर्याप्त रूप से किए गए ऑक्सीडेटिव तनाव से कोशिका झिल्ली में लिपिड घटक के मुक्त कट्टरपंथी-मध्यस्थता पेरोक्सीडेशन हो सकता है; इस प्रकार, एमडीए अपक्षयी बीमारियों जैसे मधुमेह मेलिटस में ऑक्सीडेटिव तनाव का मूल्यांकन करने के लिए एक अच्छा संकेतक है[48]. औसत GSH, GHH / GSSC, और CAT नियंत्रण समूह की तुलना में समूह 2, 3, 4 और 5 में काफी कम हो गए थे। Tomofuji et al.[49] ने बताया कि GSHlevel में कमी आई और वायुकोशीय हड्डी के नुकसान और बहुरूपी परमाणु ल्यूकोसाइट घुसपैठ मसूड़े के ऊतकों में वृद्धि हुई, और de AraujoJunior et al. [50] ने बताया कि एमडीए के स्तर में वृद्धि हुई और पीरियडोंटाइटिस ऊतक में जीएसएच का स्तर कम हो गया।

पशु अध्ययन और सीमित नैदानिक परीक्षणों ने सकारात्मक और आशाजनक परिणाम दिखाए हैं, लेकिन अभी भी पीरियडोंटाइटिस रोगियों में कर्क्यूमिन के व्यापक नैदानिक उपयोग से पहले संबोधित करने के लिए सीमाएं और सावधानियां हैं। करक्यूमिन पानी में खराब घुलनशील है और इसे इथेनॉल या डाइमिथाइल सल्फोक्साइड में घुलनशील होना चाहिए, मौखिक खुराक के बाद कम प्रणालीगत जैव उपलब्धता होती है, और गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट [51,52] में खराब रूप से अवशोषित और तेजी से चयापचय किया जाता है।

करक्यूमिन और रुटिन के योगों और वितरण प्रणालियों में सुधार करने के लिए आगे के शोध की आवश्यकता है। अवशोषण प्रक्रिया को बढ़ाने, चयापचय को धीमा करने के लिए कर्क्यूमिन के लिए आशाजनक परिणाम हैं [25], और नैनोकणों [53], लिपोसोम [54], मिसेल [55], और फॉस्फोलिपिड कॉम्प्लेक्स [56] के उपयोग के माध्यम से इसकी जैव उपलब्धता में वृद्धि।

4. सामग्री और तरीके

4.1. रासायनिक / दवा का उपयोग किया जाता है

Streptozotocin (STZ), ग्लूकोज, curcumin (सी), rutin (R), 2-thiobarbituric एसिड, o-phthalaldehyde, हाइड्रोजन पेरोक्साइड, और कैल्शियम फॉस्फेट बफर सिग्मा Aldrich Chemicals GmbH (म्यूनिख, जर्मनी) से खरीदे गए थे। एसटीजेड और ग्लूकोज को आसुत पानी में भंग कर दिया गया था। C और R को खनिज तेल में 10 umol/L पर भंग कर दिया गया था।

4.2. प्रयोगात्मक पशु

पचास पुरुष Wistar albino चूहों (8 सप्ताह पुराने और एक मतलब ±एसडी 220±20 ग्राम) वजन) "Iuliu Hatieganu" चिकित्सा और फार्मेसी विश्वविद्यालय, Cluj-Napoca, रोमानिया के पशु विभाग से खरीदा वजन फिजियोलॉजी विभाग, Cluj Napoca, रोमानिया के BIOCOM अनुसंधान केंद्र में स्थानांतरित कर दिया गया था। जानवरों को 21 ±2 डिग्री सेल्सियस, 70% ±4% आर्द्रता के तापमान पर रखा गया था, और एक नियंत्रित वातावरण में 12-h अंधेरे / 12-h प्रकाश अवधि से कम, 5 प्रति पिंजरे। उन्हें एक मानक पेलेटलेबोरेटरी आहार खिलाया गया था और पानी के विज्ञापन लिबिटम प्राप्त हुए थे। प्रयोग 1 सप्ताह की अनुकूलन अवधि के बाद शुरू हुआ, और प्रोटोकॉल को "लुलु हटिगानू" के पशु कल्याण पर नैतिक समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था, जो कि चिकित्सा और फार्मेसी nr.172/13 जून 2019 विश्वविद्यालय, वैज्ञानिक उद्देश्यों के लिए जानवरों की देखभाल और उपयोग पर दिशानिर्देशों के अनुसार, प्रयोगशाला पशु अनुसंधान के लिए राष्ट्रीय सलाहकार समिति, प्रयोगशाला पशु अनुसंधान के लिए राष्ट्रीय सलाहकार समिति, 2004. 4.3. मधुमेह मेलिटस का प्रेरण

केटामाइन xylazine कॉकटेल (100mg / kg शरीर के वजन (BW) केटामाइन और 10-mg / kg-1 BW xylazine) के इंजेक्शन के साथ एक आई.एम. (इंट्रामस्क्युलर) संज्ञाहरण के बाद पहले दिन, मधुमेह 2-5 समूहों में चूहों में प्रेरित किया गया था। उन्हें पुच्छल शिरा एसटीजेड 30mgkg-1 bw में i.v. (अंतःशिरा) इंजेक्शन द्वारा दिया गया था, इसके बाद, 6 घंटे के बाद, ग्लूकोज 30%, 2mL / जानवर द्वारा। हाइपरग्लाइसेमिया वयस्क चूहों में स्ट्रेप्टोज़ोटोसिन (एसटीजेड) द्वारा प्रेरित होता है; कार्रवाई का तंत्र अग्नाशयी β कोशिकाओं के चयनात्मक ऑक्सीडेटिव तनाव विनाश द्वारा है। नतीजतन, यह परिसंचारी इंसुलिन को कम करता है, रक्त शर्करा के स्तर को बढ़ाता है, और महत्वपूर्ण लक्षणों का कारण बनता है [57]।

समूह 1 में जानवरों को केवल नियंत्रण वाहन के समान मात्रा प्राप्त हुई। 72 घंटे के बाद, ग्लूकोमीटर का उपयोग करके, ग्लाइसेमिया को पुच्छल शिरा से काटे गए रक्त में मापा गया था। एक के साथ चूहों<300 mg/dl="" glycemia="" level="" were="" readministered="" stz="" and="" glucose="" as="" stated="">

4.4. Periodontitis का प्रेरण

पीरियडोंटाइटिस में तेजी लाने के लिए, प्लाक-जमा करने वाले उपकरणों, जैसे ऑर्थोडॉन्टिक लिगेटर, को इंटरप्रोक्सिमल क्षेत्र में एपिकल रखा गया था और पट्टिका गठन की सुविधा के लिए दूसरे दाढ़ के चारों ओर मसूड़े के सल्कस में धकेल दिया गया था, साथ ही मसूड़ों के उपकला को बाधित करने के साथ-साथ मसूड़े की उपकला को बाधित करने, ऑस्टियोक्लास्टोजेनेसिस और हड्डी के नुकसान को बढ़ाने के लिए[58,59] लिगेचर रखने से बैक्टीरिया को लिगाचर के चारों ओर जमा होने की अनुमति मिली, जिससे तेजी से पीरियडोंटाइटिस हो गया। यह परीक्षा दांत की सभी सतहों पर दंत जांच को स्थानांतरित करके और 6 साइटों में जांच करके आयोजित की गई थी - 3 बुक्कल पक्ष पर और 3 मौखिक पक्ष पर। (मेसियल, केंद्रीय, और दांत का डिस्टल)। जेब की गहराई 15 दिनों के बाद अपने चरम पर पहुंच गई, और लिगेचर ने पीरियडोंटल पॉकेट के तल के साथ संपर्क खो दिया, जो एपिकल दिशा में चला गया, इसलिए इसकी प्रभावशीलता को कम कर दिया। नतीजतन, प्रयोग के दौरान, लिगचर को एपिकली रूप से धक्का दिया जाना चाहिए। सबसे गहरी जेब में 3.1 मिमी की औसत जेब गहराई थी। जब periodontitis की पुष्टि की गई थी, तो पट्टिका या पथरी को बाधित किए बिना लिगेटर को हटा दिया गया था।

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इस विधि को तीव्र रोग का एक उपयुक्त मॉडल माना जाता था[60]। लिगेचर-केवल प्लेसमेंट पीरियडोंटाइटिस प्रेरण (72.2%) के लिए सबसे आम तरीका है।[60] 4.5. समूह आवंटन और प्रयोगात्मक डिजाइन

Wistar albino चूहों को बेतरतीब ढंग से 5 समूहों में विभाजित किया गया था: (1) (नियंत्रण) - नियंत्रण समूह, (2) (डीपीपी) - प्रयोगात्मक रूप से प्रेरित मधुमेह मेलिटस और पीरियडोंटाइटिस, (3) (डीपीसी) - प्रयोगात्मक रूप से प्रेरित मधुमेह मेलिटस और पीरियडोंटाइटिस को कर्क्यूमिन (सी), (4) (डीपीआर) के साथ इलाज किया गया - प्रयोगात्मक रूप से प्रेरित मधुमेह मेलिटस और पीरियडोंटाइटिस को रुटिन (आर) और (5) (डीपीसीआर) के साथ इलाज किया गया - प्रयोगात्मक रूप से प्रेरित मधुमेह मेलिटस और पीरियडोंटाइटिस का इलाज किया गया।

मधुमेह और periodontitis स्थापित होने के बाद, समूह 3-5 के चूहों ने C, R, या संयुक्त के साथ उपचार प्राप्त किया: समूह 3 में C, 75 mg / kg BW / rat प्रशासित किया गया था, समूह 4 में R75 mg / kg BW / rat प्रशासित किया गया था और, समूह 5 में, समान अनुपात में, Cand R, 75 mg / kg BW का एक संयोजन, क्रमशः। समूह 2 को केवल वाहन की समान मात्रा प्राप्त हुई। उपचार 10 सप्ताह के लिए हर दिन मौखिक गैवेज द्वारा दिया गया था। खुराक का विकल्प अन्य समान अध्ययनों में उपयोग किए जाने वाले आंकड़ों पर आधारित था जिसमें ऑक्सीडेटिव तनाव मापदंडों की कमी पर कर्क्यूमिन (15-90 मिलीग्राम / किग्रा) [61-64] और रुटिन (25-100 मिलीग्राम / किग्रा) के प्रभावों की जांच की गई थी। 4.6. रक्त और ऊतक नमूना संग्रह और विश्लेषण

प्रयोग के अंत में, एक केटामाइन xylazine कॉकटेल (100 मिलीग्राम / किग्रा बीडब्ल्यू केटामाइन और 10 मिलीग्राम / किलोग्राम बीडब्ल्यू xylazine) के एक इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन के बाद, सभी जानवरों के रेट्रो-ऑर्बिटल शिरापरक साइनस से 5 मिलीलीटर रक्त खींचा गया था, और ऑक्सीडेटिव मार्करों को मापा गया था। ऊतक के नमूने लिगेटेड दांतों और होमोलोगस नियंत्रण दांतों के मसूड़े के म्यूकोसा से एकत्र किए गए थे। नमूनों का उपयोग जैव रासायनिक ऑक्सीडेटिव मार्करों को मापने के लिए किया गया था।

ऊतक के टुकड़ों को फॉस्फेट-बफ़र्ड नमकीन (पीबीएस) (pH7.4) में बर्फ पर 3 मिनट के लिए पॉलीट्रॉन होमोजेनाइज़र (ब्रिंकमैन किनेमेटीका, लुसर्न, स्विट्जरलैंड) के साथ homogenized किया गया था और 1: 4 (w / v) के अनुपात में जोड़ा गया था। साइटोसोलिक अंश तैयार करने के लिए निलंबन को 5 मिनट के लिए 300× जी और 4 डिग्री सेल्सियस पर सेंट्रीफ्यूज किया गया था। होमोजेनेट्स की प्रोटीन सामग्री को ब्रैडफोर्ड विधि [66] का उपयोग करके मापा गया था। 4.7. ऑक्सीडेटिव तनाव बायोमार्कर का निर्धारण

एमडीए को 2-थायोबार्बिट्यूरिक एसिड (टीबीए) के साथ फ्लोरोमेट्रिक विधि द्वारा निर्धारित किया गया था, जिसे कोंटी एट अल द्वारा वर्णित किया गया था।

कम ग्लूटाथियोन (जीएसएच) और ऑक्सीकृत ग्लूटाथियोन (जीएसएसजी) को ओ-थैलेल्डिहाइड [68] का उपयोग करके फ्लोरो-मीट्रिक रूप से मापा गया था। परिणाम मोल्स / एमएल में व्यक्त किए गए थे।

मसूड़े के नमूनों में एमडीए मूल्यांकन के लिए, होमोजेनेट्स की प्रोटीन सामग्री को ब्रैडफोर्ड विधि द्वारा निर्धारित किया गया था [69] मानक के रूप में गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन का उपयोग करके। मसूड़े के ऊतकों के होमोजेनेट्स को 75-mMK2HPO4, pH3 में 1h के लिए उबलते पानी के स्नान में गर्म किया गया था, जिसमें 10-mM TBA शामिल था। ठंडा करने के बाद, समाधान को टीबीए के 0.6 मिलीलीटर में एन-ब्यूटेनॉल के 3 एमएल के साथ निकाला गया था। एमडीए को 534 एनएम उत्तेजना और 548 एनएम उत्सर्जन के साथ एक तुल्यकालिक तकनीक का उपयोग करके कार्बनिक चरण में स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्रिक रूप से निर्धारित किया गया था। एमडीए को एनएमओएल / मिलीग्राम प्रोटीन के रूप में रिपोर्ट किया गया था।

होमोजेनेट्स और सेल लिसेट में कैटालेज (कैट) गतिविधि को 50-mM कैल्शियम फॉस्फेट बफर, pH7.4 में 10-mM हाइड्रोजन पेरोक्साइड युक्त प्रतिक्रिया मिश्रण में मापा गया था। एंजाइम की मात्रा जिसने इस प्रणाली में 240 एनएम पर 25 डिग्री सेल्सियस प्रति मिनट पर 0.43 की अवशोषण कमी का उत्पादन किया था, को कैटालेज गतिविधि की एक इकाई के रूप में परिभाषित किया गया था। गतिविधि को इकाई / मिलीग्राम प्रोटीन के रूप में व्यक्त किया गया था। [70]4.8.सांख्यिकीय विश्लेषण

नियंत्रण और प्रयोगात्मक समूहों के बीच महत्व के स्तर की तुलना करने के लिए शेफे के परीक्षण के साथ एनोवा का उपयोग करके डेटा का सांख्यिकीय विश्लेषण किया गया था। सभी सांख्यिकीय विश्लेषण SPSS24 सॉफ्टवेयर, Armonk, NY, संयुक्त राज्य अमेरिका का उपयोग कर प्रदर्शन किया गया था। p≤0.05 के मूल्यों को महत्वपूर्ण माना जाता था।

5. निष्कर्ष

यह निष्कर्ष निकाला जा सकता है कि कर्क्यूमिन और रुटिन, एकल या संयुक्त का मौखिक प्रशासन, मसूड़े के ऊतकों और रक्त दोनों में ऑक्सीडेटिव तनाव को कम कर सकता है और हाइपरग्लाइसेमिक पीरियडोंटाइटिस चूहों में एंटीऑक्सिडेंट की स्थिति को बढ़ा सकता है। ऑक्सीडेटिव तनाव मॉडलिंग, इन दो एंटीऑक्सिडेंट का सूजन पर निरोधात्मक प्रभाव हो सकता है। प्रणालीगत सूजन की तुलना में स्थानीय सूजन पर एंटीऑक्सिडेंट प्रभावों का मूल्यांकन करने के लिए भविष्य के शोध की आवश्यकता है।


यह लेख अणु 2021, 26, 1332 से निकाला गया है






























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