पॉलीसिस्टिक किडनी रोग का कारण

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PKD1 की अधिकता पॉलीसिस्टिक किडनी रोग का कारण बनती है

कैरोलीन थिविर्ज, अल्मीरा कुर्बेगोविच, मार्टिन कुइलार्ड, रिचर्ड गिलाउम, ओलिवियर कोटे और मैरी ट्रूड

अंतर्निहित रोगजनक तंत्रऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग(ADPKD) स्पष्ट किया जाना बाकी है। जबकि सबूत हैं कि Pkd1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)जीन अगुणता और विषमयुग्मजीता के नुकसान से चूहों में पुटी का निर्माण हो सकता है, Pkd1 का विरोधाभासी रूप से उच्च स्तर (पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1ADPKD के गुर्दे में अभिव्यक्ति का पता चला है (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग) रोगी। यह निर्धारित करने के लिए कि क्या Pkd1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)कार्य का लाभ एक रोगजनक प्रक्रिया हो सकती है, एक Pkd1 जीवाणु कृत्रिम गुणसूत्र (Pkd 1- BAC) को समरूप पुनर्संयोजन द्वारा संशोधित किया गया था ताकि वयस्क गुर्दे के लिए अधिमानतः एक निरंतर Pkd1 अभिव्यक्ति को लक्षित किया जा सके, कई ट्रांसजेनिक लाइनें उत्पन्न हुईं जो विशेष रूप से अतिप्रवाहित थीं गुर्दे में Pkdl ट्रांसजीन 2- से 15- Pkd1 अंतर्जात स्तरों से अधिक गुना। सभी ट्रांसजेनिक चूहों ने पुनरुत्पादित रूप से ट्यूबलर और ग्लोमेरुलर लागत और गुर्दे की अपर्याप्तता विकसित की और गुर्दे की विफलता से मृत्यु हो गई। यह मॉडल दर्शाता है कि मानव ADPKD जैसा दिखने वाले सिस्टोजेनेसिस को ट्रिगर करने के लिए अकेले जंगली-प्रकार Pkd1 का ओवरएक्प्रेशन पर्याप्त है (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग). हमारे परिणामों ने सभी ट्रांसजेनिक लाइनों से चूहों में एक हड़ताली बढ़ी हुई वृक्क c-myc अभिव्यक्ति को भी उजागर किया, यह दर्शाता है कि Pkd1 के विवो डाउनस्ट्रीम इफ़ेक्टर में c-myc महत्वपूर्ण है।(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)आणविक दथवाव, इस अध्ययन ने न केवल एक अमूल्य और पहला पीकेडी बनाया(पॉलीसिस्टिक किडनी रोग)मॉडल आणविक रोगजनन और उपचारों का मूल्यांकन करने के लिए, लेकिन यह भी सबूत प्रदान करता है कि कार्य का लाभ ADPKD . में एक रोगजनक तंत्र हो सकता है (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग).

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ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग(ADPKD) मनुष्यों में सबसे अधिक बार होने वाली आनुवंशिक बीमारियों में से एक है। यह नेफ्रॉन के सभी खंडों को प्रभावित करने वाले कई गुर्दे के अल्सर के प्रगतिशील विकास की विशेषता है। अन्य अभिव्यक्तियों में यकृत और अग्न्याशय में अल्सर के गठन के साथ-साथ इंट्राक्रैनील एन्यूरिज्म और हृदय संबंधी दोष शामिल हैं। एडीपीकेडी (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)आम तौर पर देर से मध्य आयु तक गुर्दे की बीमारी के अंतिम चरण में प्रगति के साथ गुर्दे की कमी की ओर जाता है।

ADPKD का लगभग 85 प्रतिशत (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)मामले PKD1 . में उत्परिवर्तन से जुड़े हैं(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)जीन यह PKD1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)जीन बड़ा है, 54 केबी तक फैला है, और इसमें 46 एक्सॉन होते हैं। यह एक 14.2-kb प्रतिलेख उत्पन्न करता है और एक 4., एक 302-अमीनो-एसिड प्रोटीन जिसे पॉलीसिस्टिन कहा जाता है-1(4, 9-11) को एनकोड करता है। मानव PKD1 और पॉलीसिस्टिन -1 अभिव्यक्ति का विश्लेषण सामान्य और ADPKD . में किया गया है (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)गुर्दे। गुर्दे के विकास के दौरान, पॉलीसिस्टिन -1 को ग्लोमेरुलर और ट्यूबलर एपिथेलियल कोशिकाओं में आसानी से पाया जाता है (संदर्भ 37 और उसमें संदर्भ में समीक्षा की गई)। सामान्य वयस्कों में, हमने और अन्य लोगों ने दिखाया है कि PKD1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)आरएनए और प्रोटीन को एकत्रित और बाहर के नलिकाओं में मध्यम से निम्न स्तर पर व्यक्त किया जाता है, जबकि ADPKD में स्तरों में वृद्धि (~2-गुना) होती है। (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)गुर्दे (22, 39)। दिलचस्प रूप से, लगातार या संवर्धित पॉलीसिस्टिन -1 अभिव्यक्ति वृक्क उपकला अल्सर के बहुमत में पाई जाती है, हालांकि धुंधला अल्सर (29) के एक महत्वपूर्ण अल्पसंख्यक में अनुपस्थित था। गुर्दे के अलावा, PKD1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)अभिव्यक्ति आम तौर पर अन्य वयस्क ऊतकों में व्यापक होती है, जिसमें उपकला और नोनेपिथेलियल सेल प्रकार (6,14,18,29,30, 39) शामिल हैं।

200 से अधिक विभिन्न PKD1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)उत्परिवर्तनों का वर्णन किया गया है, जिनमें से अधिकांश विलोपन-सम्मिलन, फ्रेमशिफ्ट, या बकवास उत्परिवर्तन हैं। ये एक एलील की निष्क्रियता के अनुरूप, प्रोटीन के काटे गए रूपों के परिणामस्वरूप होने की भविष्यवाणी की जाती है।

हालांकि, एक महत्वपूर्ण अनुपात एक गलत या इन-फ्रेम म्यूटेशन है जो पूरे जीन में पाए जाते हैं और अक्सर एक विशेष परिवार (33, 34) के लिए अद्वितीय होते हैं। जैसा कि नाम से ही स्पष्ट है, ADPKD (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)प्रमुख है और संचरित उत्परिवर्तित PKD1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)एलील रोग उत्पन्न करने के लिए पर्याप्त है। हालांकि, ADPKD . में गुर्दे के अल्सर की फोकल प्रकृति (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)पता चलता है कि PKD1 . के लिए पारस्परिक तंत्र(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)दो-हिट या हेटेरोज़ायोसिटी का नुकसान हो सकता है। इस तंत्र के लिए समर्थन PKD1 . का पता लगाकर प्राप्त किया गया था(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)सिस्ट के एक महत्वपूर्ण अनुपात से कोशिकाओं में क्लोनल दैहिक उत्परिवर्तन (3, 21, 32)। हेटेरोज़ायोसिटी के नुकसान का एक तंत्र आमतौर पर अलग-अलग परिवारों में देखे जाने वाले व्यापक रूप से भिन्न फेनोटाइप के लिए जिम्मेदार हो सकता है।

माउस पर अध्ययन Pkd1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)मानव और murine जीन और जीन उत्पाद के बीच घनिष्ठ समानता के कारण जीन PKD1 फ़ंक्शन (ओं) में मूल्यवान अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकता है। सामान्य विकास में, murine Pkd1 को मोरुला चरण से उच्च स्तर पर व्यक्त किया जाता है और सभी तंत्रिका शिखा सेल डेरिवेटिव में पाया जाता है। वयस्क मस्तिष्क, महाधमनी चाप, उपास्थि और मेसेनकाइमल संघनन (16, 17) सहित। Pkd1 विलोपन के लिए लक्षित होमोजीगस उत्परिवर्ती चूहों को गर्भाशय में मरने और गुर्दे और अग्नाशय के अल्सर (2,19, 24-26, 40) विकसित करने की सूचना मिली है। दुर्भाग्य से माउस मॉडल उत्पन्न करने के इन पिछले प्रयासों ने प्रसवोत्तर व्यवहार्य जानवरों को प्रदान नहीं किया। फिर भी, इन समरूप Pkd1 उत्परिवर्ती चूहों में गुर्दे के अल्सर की घटना मनुष्यों में एक दो-हिट उत्परिवर्तनीय तंत्र की परिकल्पना के अनुरूप होगी जिसमें एक रोगाणु उत्परिवर्तन और सामान्य एलील की दैहिक निष्क्रियता शामिल है। हालाँकि, Pkd1 लक्षित विलोपन के लिए विषमयुग्मजी चूहों ने भी देर से वयस्क-शुरुआत के बावजूद, कभी-कभी जिगर और अग्नाशय के अल्सर के साथ PKD को प्रदर्शित किया, जो कि अगुणता या जीन खुराक में कमी के एक तंत्र का समर्थन करता है। इसके अलावा, ADPKD . के लिए हेटेरोज़ायोसिटी या अगुणता का नुकसान एकमात्र तंत्र नहीं हो सकता है (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)रोगजनन दरअसल, ये तंत्र PKD1 . की लगातार या बढ़ी हुई अभिव्यक्ति के साथ विचरण पर हैं(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)अधिकांश मानव गुर्दे के सिस्ट में देखा जाता है जब तक कि गैर-कार्यात्मक प्रोटीन का उत्पादन नहीं किया जाता है। निरंतर या बढ़ी हुई PKD1 अभिव्यक्ति की यह खोज इस सवाल को उठाती है कि क्या फ़ंक्शन या ओवरएक्प्रेशन का लाभ संचालित हो सकता है। Pkd1 गेन-ऑफ-फंक्शन रोगजनक तंत्र की जांच करने के लिए, हमने एक murine Pkd1 जीवाणु कृत्रिम गुणसूत्र (Pkd 1-BAC) को अलग और विशेषता दी है जिसे बाद में Pkd1 की अभिव्यक्ति को लक्षित करने के लिए Escherichia coli में समरूप पुनर्संयोजन द्वारा संशोधित किया गया था।(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)विशेष रूप से गुर्दे के लिए। हम तीन ट्रांसजेनिक लाइनों के उत्पादन की रिपोर्ट करते हैं जिन्होंने विभिन्न स्तरों पर Pkd1 ट्रांसजीन को व्यक्त किया। सभी चूहों ने पुनरुत्पादित रूप से मानव ADPKD के लिए कई समानताएं प्रदर्शित कीं और वृक्क रूपात्मक और कार्यात्मक परिवर्तनों की तीव्र प्रगति के साथ लगातार प्रारंभिक शुरुआत की और मध्यम आयु तक गुर्दे की विफलता से मृत्यु हो गई। इसके अलावा, वर्तमान अध्ययन इन विवो तंत्र का वर्णन करता है जिसके द्वारा Pkd1 इस PKD फेनोटाइप की मध्यस्थता कर सकता है। ये चूहे पीकेडी के पहले मॉडल का प्रतिनिधित्व करते हैं जो ऑर्थोलॉगस पीकेडी 1 के एकमात्र रीनल ओवरएक्प्रेशन द्वारा निर्मित होता है।(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)जीन

सामग्री और तरीके

Pkd1 . युक्त बीएसी क्लोनों का अलगाव(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)ठिकाना Pkd1-बैक्टीरिया होस्ट स्ट्रेन E. कोलाई DH10B (RecA; RecBC) से BAC क्लोन को 129Sv माउस pBelo11BAC लाइब्रेरी (रिसर्च जेनेटिक्स) से अलग किया गया था। पीसीआर द्वारा निम्नलिखित प्राइमरों के साथ बीएसी सुपर पूल की स्क्रीनिंग की गई: 5 क्षेत्र, 5-सीटीजी एटीजीएजीटीटीजीजीसीसीएटीजीजीएटीजी-3 (फॉरवर्ड पीकेडी1 एक्सॉन 1) और 5-सीटीजीसीसीए जीसीसीएएटीजीसीसीएटीएजीटीसीएसी-3 (रिवर्स Pkd1 एक्सॉन 1); और 3 क्षेत्र, 5-TCG GCCCTAGCGCTGCAGCC-3 (फॉरवर्ड Pkd1 एक्सॉन 39) और 5-TCCAGTCC CACCTACAGCCAAC-3 (रिवर्स Pkd1 एक्सॉन 40)। दोनों प्रवर्धन के लिए एक सकारात्मक क्लोन की पहचान की गई और उसका विश्लेषण मानक जेल और स्पंदित-क्षेत्र जेल वैद्युतकणसंचलन (पीएफजीई) पर किया गया, जिसके बाद दक्षिणी सोख्ता था। दक्षिणी धब्बा विश्लेषण के लिए, सात माउस Pkd1 जांच डिजाइन किए गए हैं: जीनोमिक एक्सॉन 1 (516 बीपी; न्यूक्लियोटाइड्स [एनटी] 1 से 516; एनसीबीआई परिग्रहण संख्या U70209), जीनोमिक एक्सॉन 2-3 (220 बीपी), जीनोमिक एक्सॉन {{ 31}} (8,479 बीपी), सीडीएनए एक्सॉन 15-20 (1,724 बीपी; एनटी 6455 से 8179), सीडीएनए एक्सॉन 25-34 (1,315 बीपी; एनटी 9415 से 10730), सीडीएनए एक्सॉन 36-45 ( 1,655 बीपी; एनटी 10963 से 12618), और जीनोमिक एक्सॉन 45-46 (1,640 बीपी) (16)। इस murine Pkd 1-BAC के बीएसी इंसर्ट एक्सट्रीम सहित कई क्षेत्रों को भी अनुक्रमित किया गया है और मानव PKD1 जीन और सन्निहित क्षेत्रों के लिए ऑर्थोलॉगस होने की पुष्टि की गई है।

परिणाम

SBPkdl . का उत्पादन(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1) सजातीय पुनर्संयोजन द्वारा आरएसी-बीएसी। यह निर्धारित करने के लिए कि क्या केवल Pkd1 फ़ंक्शन का लाभ ADPKD . का उत्पादन करने के लिए पर्याप्त है (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)फेनोटाइप, हमने पहले एक बीएसी वेक्टर 129 / Sv लाइब्रेरी में संपूर्ण Pkdl जीन वाले जीनोमिक क्लोन को अलग किया। इस पुस्तकालय को पीसीआर द्वारा Pkd1 जीन के लिए प्राइमरों के दो सेटों के साथ जांचा गया था, जो एक्सॉन 1 को 5'end पर और 39 से 40 को 3'end (Fig.1) की ओर फैलाता है। Pkd1 जीन के लिए एक सकारात्मक बीएसी क्लोन की पहचान की गई जिसमें संपूर्ण आसन्न Tsc2 जीन शरीर शामिल था। Pkd1 इंसर्ट को विस्तार से यह सुनिश्चित करने के लिए चित्रित किया गया था कि जीनोमिक संरचना अंतर्जात Pkd1 से मेल खाती है(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)129/Sv माउस स्ट्रेन का जीन जिसमें से इंसर्ट प्राप्त किया गया था और C57BL/6J इनब्रेड स्ट्रेन से। बीएसी में Pkd1 ठिकाने के जीनोमिक मानचित्र और दक्षिणी धब्बा विश्लेषण द्वारा इन इनब्रेड उपभेदों में, चार प्रतिबंध एंजाइम पाचन और पूरे Pkdl जीन को कवर करने वाली सात जांचों के साथ, पुनर्व्यवस्था के कोई सबूत नहीं के साथ समान दिखाई दिए (चित्र 1)। इस बीएसी में एक ~121-kb इंसर्ट शामिल है जिसमें -37 अपस्ट्रीम का kb और -39 Pkd1 के डाउनस्ट्रीम अनुक्रम का kb शामिल है।(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)वैद्युतकणसंचलन और अनुक्रमण द्वारा निर्धारित जीन।

इस Pkd1-BAC क्लोन को E.coli में लगातार दो समजातीय पुनर्संयोजन घटनाओं द्वारा संशोधित किया गया था। Pkd1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)सीडीएनए मानचित्र पर 2355 की स्थिति में एक उपन्यास इकोआरआई साइट बनाने के लिए एक न्यूक्लियोटाइड (जी से ए) को प्रतिस्थापित करके एक्सॉन 10 में जीन को टैग किया गया था। Pkd1 . को अलग करने के लिए यह मूक बिंदु उत्परिवर्तन उत्पन्न किया गया था(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)अंतर्जात मूल के बीएसी के जीन और प्रतिलेख। इसके अलावा, हमने पहले से पहचाने गए "SB" वृक्क उपकला-विशिष्ट तत्वों का लाभ SBM (c-Myc से जुड़ा हुआ) या SBF से जुड़े c- fos) गुर्दे तक अभिव्यक्ति को प्रतिबंधित करने के लिए निर्माण-ट्रांस-जीन (36,38) (चित्र। 2 ए)।

यह नया SBPkd1TAc-BAC Notl के साथ पच गया था, जो SB तत्वों के तुरंत ऊपर स्थित एक अनूठी साइट है, और Tsc2 जीन बॉडी के भीतर ClaI, Tsc2 नियामक तत्वों और जीन बॉडी के 5'आधे हिस्से को Tsc2 बहिर्जात अभिव्यक्ति की कमी सुनिश्चित करने के लिए छोटा करता है। सभी ऊतकों में और प्रोकैरियोटिक बीएसी वेक्टर अनुक्रमों को हटाने के लिए (चित्र 1 और 2)। यह 70-kb Notl-Cal रेखीयकृत टुकड़ा अलग, शुद्ध, और oocyte microinjection (36) के लिए मात्रा निर्धारित किया गया था।

SBPkd1rAc ट्रांसजेनिक चूहों का उत्पादन और विश्लेषण। SBPkd1rAc ट्रांसजीन की कई प्रतियां ले जाने वाले चार ट्रांसजेनिक संस्थापकों ने लगातार PKD . विकसित किया(पॉलीसिस्टिक किडनी रोग). दक्षिणी विश्लेषण द्वारा निर्धारित चार SBPkdlrAc संस्थापक चूहों से, तीन SBPkd1rAG ट्रांसजेनिक लाइनों को ट्रांसजीन की दो से नौ प्रतियों (छवि 2 बी) के साथ स्थापित किया गया था। इन पंक्तियों में ट्रांसजीन अखंडता की विशेषता की निगरानी 5 ', आंतरिक और 3' जांच के साथ की गई थी जैसा कि चित्र 2 बी में प्रतिनिधि उदाहरणों द्वारा दिखाया गया है। ट्रांसजेनिक लाइनों से पता चला है कि 5'"एसबी" 10.9 केबी पर एक बैंड की जांच करता है जो एसबीपीकेडी1आरएसी ट्रांस-जीन के अनुरूप है, जिसे हेड-टू-टेल ओरिएंटेशन में एकीकृत किया जाता है और 3'प्रोब ए 7.1-केबी बैंड के साथ प्रकट होता है। (चित्र 2बी)। इसके अलावा, आंतरिक जांच में 9.4-kb अंतर्जात Pkd1 बैंड के साथ-साथ 6.9-kb और 2.5-ecoRI सम्मिलन साइट के कारण ट्रांसजीन के kb बैंड का पता चला। एक्सॉन 10 (छवि 2 बी) में। इन चूहों में जीनोमिक अतिव्यापी संरचना विश्लेषण के आधार पर ट्रांसजीन की पूरी प्रतियां थीं।

पीकेडी1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)वयस्क SBPkdlrAc ट्रांसजेनिक चूहों में कार्य का लाभ। विभिन्न अंगों में SBPkdlrAG ट्रांसजीन और Pkd1 जीन की अभिव्यक्ति की जांच की गई। उत्तरी धब्बा विश्लेषण (छवि 3 ए) द्वारा ट्रांसजीन और / या अंतर्जात जीन से प्रतिलेख स्तर की मात्रा का ठहराव किया गया था। जैसा कि अपेक्षित था, ट्रांसजीन और अंतर्जात जीन टेप समान लंबाई (14.2 kb) के थे। नियंत्रण GAPDH अभिव्यक्ति के आधार पर, सभी SBPkd1TAG माउस लाइनों से गुर्दे ने समान उम्र के वयस्क गुर्दे (n=3) में सामान्य Pkdl स्तरों की तुलना में लगातार प्रतिलेख अभिव्यक्ति में वृद्धि की थी। विभिन्न ट्रांसजेनिक लाइनों के लिए वृक्क ट्रांसजीन और अंतर्जात अभिव्यक्ति ने नियंत्रण वृक्क अंतर्जात Pkd1 स्तरों (Fig.3a) से ऊपर 2- से 15- की एक सीमा प्रदर्शित की। विशेष रूप से, ट्रांसजेनिक लाइन 39 (n {{11} })उच्च Pkd1 . दिखाया(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)3(n=3) और 41 (n =4) की तुलना में स्तर। इसके अलावा, उत्तरी धब्बा विश्लेषण द्वारा मापा गया Pkd1 अभिव्यक्ति का स्तर वास्तविक समय पीसीआर द्वारा एक्सॉन 1 और 2 (छवि 3 बी) में प्राइमरों का उपयोग करके प्राप्त किया गया है।

ट्रांसजीन अभिव्यक्ति के स्तर का परिमाणीकरण विशेष रूप से वास्तविक समय पीसीआर और अर्धवार्षिक आरटी-पीसीआर द्वारा वयस्क उम्र में तीन ट्रांसजेनिक लाइनों में 5'अनट्रांसलेटेड क्षेत्र (बी, -ग्लोबिन प्रमोटर) में प्राइमरों का उपयोग करके और पीकेडी 1 के एक्सॉन 2 में किया गया था।(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)(चित्र.3बी)। ट्रांसजेनिक चूहों में SBPkdlrAc अभिव्यक्ति की तुलना आंतरिक मानक के रूप में S16 राइबोसोमल प्रोटीन जीन उत्पाद से की गई थी। अर्ध-मात्रात्मक आरटी-पीसीआर प्रवर्धन के लिए उपयोग की जाने वाली शर्तें रैखिक सीमा के भीतर थीं। वास्तविक समय पीसीआर और अर्धवार्षिक आरटी-पीसीआर द्वारा ट्रांसजीन अभिव्यक्ति लगातार और विशेष रूप से अन्य अंगों (छवि 3 बी और सी) के सापेक्ष सभी ट्रांसजेनिक लाइनों के गुर्दे में उच्चतम अभिव्यक्ति दिखाती है। एक व्यक्तिगत नमूने के लिए गुर्दे की अभिव्यक्ति का स्तर इस्तेमाल की जाने वाली किसी भी पहचान तकनीक के साथ प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य था। Pkd1 . का उच्चतम स्तर(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)ट्रांसजीन रीनल एक्सप्रेशन को 39 और 41 लाइनों के लिए मापा गया था। यह देखने के लिए कि क्या Pkd1 . में वृद्धि हुई है(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)अभिव्यक्ति ट्रांसजीन या अंतर्जात जीन के परिणामस्वरूप हुई, तीन ट्रांसजेनिक लाइनों से चूहों के एक ही समूह की तुलना वृक्क Pkd1 ट्रांसजीन अभिव्यक्ति के लिए और वृक्क Pkd1 कुल (ट्रांसजीन और अंतर्जात) अभिव्यक्ति के लिए वास्तविक समय पीसीआर द्वारा की गई थी। दिलचस्प बात यह है कि लाइन 3 के सापेक्ष 39 और 41 में दिखाया गया है कि बढ़ी हुई Pkdl ट्रांसजीन वृक्क अभिव्यक्ति Pkd1 कुल वृक्क अभिव्यक्ति के समान या उससे ऊपर थी, इस प्रेरित अभिव्यक्ति के लिए विशेष रूप से जिम्मेदार ट्रांसजीन की ओर इशारा करते हुए। विभिन्न अंगों (हृदय, फेफड़े, मस्तिष्क, यकृत, अग्न्याशय, और प्लीहा सहित) में, SBPkd1rAg ट्रांसजीन ने बहुत कमजोर अभिव्यक्ति अवसर-सहयोगी को तिल्ली और फेफड़े में दिखाया, अन्य अंगों में कम से कम undetectable अभिव्यक्ति के साथ (चित्र 3 बी)। वास्तविक समय पीसीआर द्वारा परिमाणीकरण ने गुर्दे की अभिव्यक्ति (छवि 3 सी) के सापेक्ष एक्सट्रारेनल ऊतकों में ट्रांसजीन अभिव्यक्ति के एक 10- से 1, 000- गुना निचले स्तर का प्रदर्शन किया। SBPkdlrA ट्रांसजीन के "SB" नियामक तत्वों ने अधिमान्य वृक्क अभिव्यक्ति प्रदान की; यह विशेष अंग वितरण भी निर्धारित किया गया था जब c-myc (SBM) और c-fos (SBF) (36, 38) से जुड़े ट्रांसजेन में उपयोग किया जाता है।

C-myc, Pkd1 . का डाउनस्ट्रीम इफ़ेक्टर है(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)SBPkdlrAc चूहों में सिग्नलिंग रास्ते। SBPkdlrAg ट्रांसजेनिक चूहों के इंट्रासेल्युलर रोगजनक तंत्र में अंतर्दृष्टि प्राप्त करने के लिए, हमने अगली बार मानव ADPKD में c-myc डेरेग्यूलेशन के हमारे पिछले अवलोकन के आधार पर c-myc वृक्क अभिव्यक्ति स्तर की निगरानी करने की मांग की। (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)गुर्दे (22)। गुर्दे का विश्लेषण तीनों ट्रांसजेनिक लाइनों 3 (एन =4), 39 (एन =7), और 41 (एन=4) के साथ-साथ नियंत्रण से किया गया था। (n=4)। जैसा कि Fig.3d में दिखाया गया है, समान उम्र के चूहों को नियंत्रित करने के सापेक्ष SBPkd1TAG चूहों में प्रेरित अंतर्जात c-myc की पर्याप्त अभिव्यक्ति है। दिलचस्प बात यह है कि कुछ SBPkd1-c किडनी में c-myc अभिव्यक्ति का स्तर। विशेष रूप से पंक्ति 39 में, गुर्दे की सी-माइसी अभिव्यक्ति द्वारा निर्मित पीकेडी एसबीएम ट्रांसजेनिक माउस मॉडल में देखे गए स्तरों की तुलना में पहुंच गया।

SBPkd1raG चूहों में PKD . के समान गुर्दे की विसंगतियाँ(पॉलीसिस्टिक किडनी रोग). To characterize the phenotype caused by the transgene expression, gross and histologic examinations were undertaken on transgenic kidneys. Adult kidneys from all transgenic lines were affected bilaterally. Kidneys contained numerous cortical cysts that varied from microscopic to macroscopic in size(Fig.4a and b). SBPkdl-AG kidneys were pale, a typical finding in PKD. On histologic examination, all transgenic founder mice and progenies (n =25;n>6) विकसित कई ट्यूबलर (टी) और ग्लोमेरुलर सिस्ट (जी) (अंजीर। 4 डी, एफ, और जी)। सिस्ट को कॉर्टिकल और मेडुलरी क्षेत्रों से नलिकाओं में देखा गया था और साथ ही पैपिला (चित्र। 4डी और ई)। ट्रांसजेनिक चूहों ने ट्यूबलर एपिथेलियल हाइपरप्लासिया (एरोहेड) प्रदर्शित किया जिसमें सिस्टिक और गैर-सिस्टिक नलिकाएं और लगातार अतिवृद्धि (छवि 4 जी और एच) दोनों शामिल थे, लेकिन गंभीरता अलग-अलग चूहों के बीच भिन्न थी। इंटरस्टीशियल फाइब्रोसिस (एफ), पेरिवास्कुलर लिम्फोइड घुसपैठ, और प्रोटीनयुक्त कास्ट (पी) अक्सर देखे गए थे (छवि 4 डी और ई)।

बढ़ी हुई Pkd1 . के स्थानीयकरण साइट को अधिक सटीक रूप से परिभाषित करने के लिए(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)गुर्दे में अभिव्यक्ति, हमने पहले इस्तेमाल किए गए एक्सॉन 36-45 जांच (16) का उपयोग करके स्वस्थानी संकरण में किया। संकरण संकेत विशेष रूप से उपकला कोशिकाओं के लिए सिस्ट और हाइपरप्लास्टिक नलिकाओं के साथ-साथ ग्लोमेरुलर सिस्ट को स्थानीयकृत किया गया था। इसके अलावा, कुछ संकेत गैर-सिस्टिक या थोड़ा पतला नलिकाओं के उपकला पर देखा गया था, संभावित रूप से भविष्य के सिस्टिक परिवर्तनों (छवि 4i और जे) से गुजरने के लिए पूर्वनिर्धारित नलिकाओं की पहचान करना।

जन्म के समय ट्रांसजेनिक चूहों (n =8), प्रसवोत्तर दिन 10 (P10) (n =3), P20 (n =5), P35 (n { {7}}), और P45(n=3) समान आयु वर्ग के नकारात्मक साथियों की तुलना में (n 2 से 4)। दिलचस्प बात यह है कि सभी नवजात ट्रांसजेनिक चूहों ने नकारात्मक लिटरमेट्स (छवि 4k और एल) को नियंत्रित करने के लिए ट्यूबलर और ग्लोमेरुलर फैलाव को प्रदर्शित किया, यह दर्शाता है कि गर्भाशय में गुर्दे की विसंगतियां एसबीएम चूहों और एडीपीकेडी में देखी गई हैं। (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)रोगी। प्रगतिशील उम्र के साथ ट्यूबलर और ग्लोमेरुलर फैलाव आकार और संख्या में वृद्धि हुई है। P35 तक, ट्रांसजेनिक चूहों ने अधिक गंभीर हाइपरप्लासिया और ग्लोमेरुलोस्केलेरोसिस के प्रमाण प्रदर्शित किए। SBPkd1TAG चूहों में परिवर्तित गुर्दे के शारीरिक कार्य। सभी ट्रांसजेनिक चूहों के गुर्दे के शारीरिक कार्यों में पीकेडी के समान विशेषताएं प्रदर्शित होती हैं(पॉलीसिस्टिक किडनी रोग), जबकि नॉनट्रांसजेनिक लैटरमेट्स ने कभी भी रोग विकसित नहीं किया। जन्म के कुछ महीनों के भीतर, प्रभावित जानवरों में पुरानी गुर्दे की कमी हो गई। सीरम और मूत्र के स्तर, रक्त यूरिया नाइट्रोजन (बीयूएन) और क्रिएटिनिन, मूत्र ऑस्मोलैलिटी, मूत्र प्रोटीन और आयन उत्सर्जन (तालिका 1) के मापन द्वारा इन जानवरों की गुर्दे के कार्यात्मक मापदंडों की निगरानी की गई थी। नियंत्रण की तुलना में तीन पंक्तियों के सभी चूहों ने ध्यान केंद्रित करने वाले दोषों को प्रदर्शित किया, ADPKD में एक सामान्य खोज, और इसके परिणामस्वरूप मूत्र में BUN, क्रिएटिनिन, प्रोटीन और लोहे की सांद्रता में कमी देखी गई। प्रत्येक पंक्ति से ट्रांसजेनिक SBPkd1TAG संस्थापकों और संतानों (n 6) की SDS-PAGE (चित्र 5) द्वारा मूत्र के नमूनों पर प्रोटीनमेह के लिए गुणात्मक रूप से निगरानी की गई थी। 2 महीने से अधिक उम्र के चूहों ने गैर-चयनात्मक प्रोटीनुरिया प्रदर्शित किया जो उम्र के साथ बढ़ता गया। इसके अलावा, सीरम बुन और सीरम क्रिएटिनिन के स्तर में वृद्धि हुई, जिससे गुर्दे की कमी (तालिका 2) का खुलासा हुआ। क्योंकि क्रोनिक रीनल अपर्याप्तता आमतौर पर हेमटोलोगिक मापदंडों में परिवर्तन की ओर ले जाती है, इनकी जांच 3 से 14 महीने की उम्र (तालिका 2) के SBPkd1TAG ट्रांसजेनिक चूहों में की गई थी। ये ट्रांसजेनिक चूहे एनीमिक थे, जैसा कि लाल रक्त कोशिका की संख्या में काफी कमी आई थी, हीमोग्लोबिन और हेमटोक्रिट सामान्य स्तर से आधे तक पहुंच गए थे। अन्य लाल रक्त कोशिका पैरामीटर, जैसे रेटिकुलोसाइट्स का प्रतिशत, अप्रभावित थे, जैसा कि गुर्दे की खराबी से प्रेरित होने पर अपेक्षित था। ये जानवर लगातार 5.9  2.8 महीने की उम्र (एन 42) में ट्रांसजेनिक लाइन 39 के लिए और बाद की उम्र में, 14.6 3.1 महीने (एन 20) और 11 में गुर्दे की विफलता से मर गए। .7 6.5 महीने (एन 7), क्रमशः 3 और 41 पंक्तियों के लिए।

अंजीर। 1. एक murine Pkd का योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व और विस्तृत प्रतिबंध मानचित्र विश्लेषण1-BAC।

Pkd1 . के जीनोमिक डीएनए पाचन पैटर्न(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)-BAC की तुलना Pkd1 . से की गई(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)129Sv और C57Bl/6J इनब्रेड माउस स्ट्रेन में ठिकाना। अधिकांश murine Pkd1 जीन को शामिल करने वाली सात जांचों का उत्पादन किया गया:

(ए) एक्सॉन 1, (बी) एक्सॉन 2-3, (सी) एक्सॉन 7-15, (डी) एक्सॉन 15-20, (ई) एक्सॉन 25-34, (एफ) एक्सॉन 36-45, और (g) एक्सॉन 45-46, जीनोमिक Pkd1 पर a से g लेबल किया गया(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)प्रतिनिधित्व और व्यक्तिगत धमाकों पर।

Pkd1-BAC और murine Pkd1 से जीनोमिक डीएनए के प्रतिबंध डाइजेस्ट (BAMHI, EcoRI, HindIII, और KpnI) के बाद दक्षिणी धब्बा विश्लेषण(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)लोकी ने सभी सात जांचों के साथ समान पैटर्न दिखाया। एम, हिंद III मार्कर; 129, 129/एसवी; सी57, सी57बीएल/6जे।

बहस

यहां, हम एक murine Pkd1-BAC के अलगाव और लक्षण वर्णन की रिपोर्ट करते हैं। यह Pkd1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)जीन को टैग किया गया था और नियामक तत्वों को विशेष रूप से गुर्दे को लक्षित अभिव्यक्ति के लिए दो क्रमिक समरूप पुनर्संयोजन घटनाओं द्वारा प्रतिस्थापित किया गया था। इस उपन्यास SBPkd1TAG जीन के साथ उत्पादित ट्रांसजेनिक चूहों ने Pkd1 अभिव्यक्ति में 2- से 15- गुना वृद्धि दिखाई और PKD के विशिष्ट रूप से विकसित प्रारंभिक वृक्क रूपात्मक परिवर्तनों को पुन: उत्पन्न किया। मध्यम आयु में गुर्दे की कमी स्पष्ट होती है, और चूहे गुर्दे की विफलता से समय से पहले मर जाते हैं। हमारे परिणामों से यह भी संकेत मिलता है कि इस फेनोटाइप के लिए जिम्मेदार Pkd1 ओवरएक्प्रेशन तंत्र की मध्यस्थता विवो में c-myc के सक्रियण द्वारा की जाती है। यह अध्ययन दर्शाता है कि गुर्दे में murine Pkd1 कार्य का लाभ PKD वृक्क फेनोटाइप का उत्पादन करने के लिए पर्याप्त है। चूंकि murine Pkd1 जीन की नकल नहीं है क्योंकि यह मनुष्यों (27) में है, हमने सीधे एक BAC क्लोन को पहचाना और अलग किया है जिसमें संपूर्ण Pkd1 जीन शामिल है। 129/Sv murine Pkd1-BAC का पूर्ण लक्षण वर्णन, दो अन्य इनब्रेड माउस उपभेदों के साथ अप्रत्यक्ष तुलना, Pkd1 ठिकाने की अखंडता की पुष्टि करता है। Pkd 1- BAC इंसर्ट में Pkd1 जीन से 37 से 39 kb अपस्ट्रीम और डाउनस्ट्रीम सीक्वेंस होते हैं। हमारे विश्लेषण से पता चला है कि इस बीएसी में Pkd1 जीन एक प्रामाणिक मुराइन जंगली-प्रकार का ठिकाना था जो आगे के अध्ययन के लिए काम कर सकता था। हालांकि इस बात के पुख्ता सबूत हैं कि ADPKD . में पुटी का निर्माण होता है (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)सामान्य PKD1 की दैहिक निष्क्रियता के बाद हेटेरोज़ायोसिटी के नुकसान के परिणामस्वरूप हो सकता है(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)एलील (3, 21, 32), सिस्टिक ट्यूबलर एपिथेलियम (22, 29) में निरंतर या बढ़े हुए पॉलीसिस्टिन -1 अभिव्यक्ति के लिए भी विचारोत्तेजक साक्ष्य हैं। बाद का अवलोकन इस सवाल को उठाता है कि क्या Pkd1 प्रति se का ओवरएक्प्रेशन सिस्टोजेनेसिस का पर्याप्त समीपस्थ कारण है। मानव PKD1 को प्रभावित करने वाले ट्रांसजेनिक चूहों में(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1), TSC2, RAB 26, NTHL1 और SLC9A3R2 जीन, केवल चूहों की एक अल्पसंख्यक विकसित अल्सर और किसी में भी ट्रांसजीन की 30 प्रतियों के बावजूद वयस्कता में पता लगाने योग्य ट्रांसजीन अभिव्यक्ति नहीं थी। उन ट्रांसजेनिक चूहों में, सिस्टोजेनेसिस में Pkd1 ओवरएक्प्रेशन के लिए एक स्पष्ट भूमिका स्थापित करना मुश्किल था। हमारा मॉडल अलग है, क्योंकि अकेले Pkd1 की दो से नौ जंगली-प्रकार की प्रतियां, बिना सन्निहित जीन के, ट्रांसजेनिक चूहों में एकीकृत थीं। चूंकि Pkd1 जीन के विभिन्न अंगों या ऊतकों में आवश्यक कार्य होते हैं, जैसा कि Pkd1 जीन के अपस्फीति के साथ कई चूहों के लिए वर्णित है, Pkd1 के प्रणालीगत ओवरएक्प्रेशन से अतिरिक्त भ्रमित प्रभाव हो सकते हैं। नतीजतन, हमने Pkd1 को विशेष रूप से गुर्दे को लक्षित करने वाले दृष्टिकोण का उपयोग करके फ़ंक्शन के Pkd1 लाभ की भूमिका को संबोधित किया है। सजातीय पुनर्संयोजन द्वारा, हमने पहले Pkd1 अपस्ट्रीम नियामक क्षेत्र को "SB" वृक्क प्रतिबंधित नियामक तत्वों के साथ प्रतिस्थापित किया है, जिससे वयस्कता में Pkd1 के लिए सामान्य रूप से देखी जाने वाली जीन अभिव्यक्ति में कमी के साथ-साथ संभावित माध्यमिक प्रतिक्रिया लूप विनियमन (36, 38) को रोका जा सकता है। दूसरा, हमने murine Pkd1 ट्रांसजीन (Pkd1TAG) को एक्सॉन 10 में एक साइलेंट पॉइंट म्यूटेशन के साथ चिह्नित किया है, लेकिन यह सुनिश्चित करने के लिए एक एपिटोप टैग नहीं डाला है कि संरक्षित संरचना और अखंडता के साथ पूरी तरह कार्यात्मक "जंगली-प्रकार" प्रोटीन का उत्पादन किया जाएगा। इस संशोधित बीएसी से, एक SBPkd1TAG टुकड़ा Tsc2 जीन और BAC वेक्टर से दूर शुद्ध किया गया था ताकि Tsc2 जीन द्वारा हस्तक्षेप को रोका जा सके, जो एक सिस्टिक फेनोटाइप (8, 20, 28) को भी प्रेरित कर सकता है, साथ ही निरोधात्मक प्रभाव से बचने के लिए प्रोकैरियोटिक अनुक्रम (5)।

चार अलग-अलग SBPkd1TAG ट्रांसजेनिक संस्थापक चूहों और तीन स्वतंत्र लाइनों का उत्पादन विशिष्ट गुर्दे Pkd1 . के साथ किया गया था(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)-बढ़ी हुई अभिव्यक्ति। विशेष रूप से हड़ताली इन ट्रांसजेनिक चूहों में फेनोटाइप का पूर्ण प्रवेश है। SBPkd1TAG संस्थापक और माउस लाइनों ने ADPKD . के साथ समान रूप से कई फिजियोपैथोलॉजिक विशेषताएं साझा कीं (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग). इनमें कॉर्टेक्स, मेडुला और ग्लोमेरुली में सिस्ट का विकास एपिथेलियल हाइपरप्लासिया, इंटरस्टिशियल फाइब्रोसिस और फोकल इंटरस्टिशियल सूजन के साथ शामिल है।

क्योंकि पीकेडी(पॉलीसिस्टिक किडनी रोग)फेनोटाइप सभी अलग-अलग ट्रांसजेनिक संस्थापक चूहों में लगातार देखा गया था और माउस जीनोम में ट्रांसजीन एकीकरण एक यादृच्छिक घटना है, फेनोटाइप क्रोमोसोमल स्थिति प्रभाव से नहीं बल्कि केवल Pkd1 अभिव्यक्ति में वृद्धि से परिणाम हो सकता है। दरअसल, सभी लाइनों में Pkd1 ट्रांसजीन की अभिव्यक्ति को वृक्क प्रतिबंधित होने के लिए प्रदर्शित किया गया था, जैसा कि पहले "एसबी" तत्वों (36, 38) द्वारा विनियमित अन्य ट्रांसजेन के लिए देखा गया था। इसके अलावा, यह बढ़ी हुई Pkd1 अभिव्यक्ति ट्रांसजीन के कारण हुई थी न कि अप्रत्यक्ष अंतर्जात Pkd1 सक्रियण के कारण। इसलिए, हमारे परिणाम स्पष्ट प्रमाण प्रदान करते हैं कि एक जंगली-प्रकार के कार्यात्मक Pkd1 के कार्य का लाभ कई गुर्दे के अल्सर पैदा कर सकता है। महत्वपूर्ण रूप से, ये SBPkd1TAG चूहे मानव PKD1 जीन के माउस ऑर्थोलॉग के एकमात्र ओवरएक्प्रेशन द्वारा उत्पन्न पहला माउस मॉडल बनाते हैं।

SBPkd1TAG चूहे प्रदर्शित करते हैं कि Pkd1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)overexpression वृक्क सिस्टोजेनेसिस का एक प्राथमिक रोगजनक तंत्र है। महत्वपूर्ण रूप से, गुर्दे में उच्चतम ट्रांसजीन अभिव्यक्ति का स्तर फेनोटाइप की प्रगति और गंभीरता के साथ सहसंबद्ध दिखाई दिया। हमने यह भी पाया कि SBPkd1TAG फेनोटाइप के विकास में Pkd1 overexpression विवो में c-myc के सक्रियण का संकेत देने की संभावना है। निश्चित रूप से, यह सक्रियण पॉलीसिस्टिन -1 सी-टर्मिनल पूंछ के माध्यम से भी प्रत्यक्ष हो सकता है जो प्रोटियोलिटिक दरार और परमाणु अनुवाद (7) से गुजर रहा है। चूंकि वयस्क चूहों में सी-माइसी की बढ़ी हुई गुर्दे की अभिव्यक्ति को पीकेडी को प्रेरित करने के लिए दिखाया गया था, यह सी-माइसी को पीकेडी 1 सिग्नलिंग मार्ग के प्रमुख डाउनस्ट्रीम प्रभावक के रूप में समर्थन करने के लिए अत्यधिक सुसंगत होगा। यह परिणाम सभी मानव ADPKD . के गुर्दे में बढ़ी हुई c-myc अभिव्यक्ति के हमारे पिछले निष्कर्षों से भी संबंधित है (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)विश्लेषित (22)। कुल मिलाकर, इन परिणामों से संकेत मिलता है कि c-myc Pkd1 . का प्रमुख मध्यस्थ है(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)सिस्टोजेनेसिस Pkd1 गेन-ऑफ-फंक्शन मॉडल से हमारे परिणाम, murine Pkd1 अगुणता और कार्य के नुकसान के साथ, संकेत देते हैं कि किसी भी Pkd1 विकृति से सिस्टोजेनेसिस (2, 19, 23–26, 31, 40) हो सकता है।

गंभीर Pkd1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)Pkd1 . द्वारा प्रेरित चूहों में असंतुलन(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)एब्लेशन या ट्रांसजेनिक ओवरएक्प्रेशन के कारण गुर्दे के सिस्ट की शुरुआत और तेजी से प्रगति हुई और नलिकाओं का एक उच्च अनुपात प्रभावित हुआ। इसके विपरीत, एक मामूली Pkd1 असंतुलन जैसे कि अगुणता के कारण अधिक फोकल सिस्ट के साथ PKD की धीमी प्रगति हुई। विपरीत पॉलीसिस्टिन -1 डिसरेगुलेशन के माध्यम से एक समान फेनोटाइप के स्पष्ट विरोधाभासी विकास को सामान्य परिणाम द्वारा समझाया जा सकता है, अर्थात् एक सापेक्ष प्रोटीन एकाग्रता असंतुलन जो एक सक्रिय पॉलीसिस्टिन मल्टीप्रोटीन कॉम्प्लेक्स के गठन या कार्य को बदल सकता है। एक साथ लिया गया, हमारे परिणाम और अन्य जांचकर्ताओं का तर्क है कि ADPKD . में पुटी गठन का तंत्र (ऑटोसोमल डोमिनेंटपॉलीसिस्टिक किडनी रोग)तीन रोगजनक तंत्रों से उत्पन्न होने की संभावना है: कार्य का लाभ, कार्य की हानि, और जीन खुराक प्रभाव। उपन्यास SBPkd1TAG चूहों में वृक्क सिस्टोजेनेसिस का एक शक्तिशाली मॉडल है जो PKD के पैथोफिज़ियोलॉजी में प्रमुख अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकता है(पॉलीसिस्टिक किडनी रोग), पीकेडी1(पॉलीसिस्टिक गुर्दा रोग 1)सिग्नल ट्रांसडक्शन पाथवे, और इंटरेक्टिंग पार्टनर्स। इस मॉडल के अध्ययन से Pkd1 मल्टीमेरिक कॉम्प्लेक्स के भीतर सामान्य प्रोटीन संतुलन बहाल करने के लिए नई चिकित्सीय रणनीतियों का विकास हो सकता है।

प्रतिक्रिया दें संदर्भ

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