कस्पासे के निषेध के माध्यम से संयोजन चिकित्सा के उपन्यास प्रभाव-1/ल्यूपस नेफ्रैटिस में गैसडर्मिन डी प्रेरित-पायरोप्टोसिस

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हेंग काओ, जुन्यू लियांग, जिंग लियू, ये हे, यिनी के, यिडुओ सन, सॉन्ग जियांग और जिन लिन

सार

उद्देश्य: माइकोफेनोलेट मोफेटिल, टैक्रोलिमस और स्टेरॉयड के साथ संयोजन चिकित्सा पूर्ण छूट प्राप्त करने में प्रभावी हैंएक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस(एलएन)। मोनोथेरापी की तुलना में कॉम्बिनेशन थैरेपी विशिष्ट रूप से डाउनरेगुलेटेड कस्पासे-1 है, जो गैसडर्मिन डी (GSDMD) को साफ कर सकता है और हाल ही में इसकी पहचान की गई थीपायरोप्टोसिसजल्लाद इसलिए, हमने जांच की कि क्या संयोजन चिकित्सा ने कस्पासे के दमन को सक्षम किया है-1/GSDMD-मध्यस्थतापायरोप्टोसिसएलएन में (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस).

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तरीके: जीएसडीएमडी की अभिव्यक्ति और सक्रियता का पता एलएन के साथ मानव और माउस के गुर्दे के नमूनों में लगाया गया था।एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस) इम्यूनोहिस्टोकेमिकल धुंधला और इम्युनोब्लॉटिंग का उपयोग करना। MRLlpr चूहों से पृथक प्राथमिक पोडोसाइट्स को LPS प्लस ATP के साथ इनक्यूबेट किया गया और मोनोथेरेपी या संयोजन चिकित्सा के साथ दिखाया गया। कस्पासे का निषेध-1/GSDMD- प्रेरितपायरोप्टोसिससंयोजन चिकित्सा द्वारा MRLlpr चूहों और मानव नमूनों में मूल्यांकन किया गया था। FAM caspase-1 किट और फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करके मेरी जांच की गई। के बीच संबंधपायरोप्टोसिसपरिधीय रक्त में और प्रणालीगत ल्यूपस एरिथेमेटोसस रोग गतिविधि सूचकांक (एसएलईडीएल) का विश्लेषण किया गया था।

परिणाम: एलएन से गुर्दे के ऊतक के नमूने (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस) रोगियों और चूहों ने जीएसडीएमडी की अभिव्यक्ति के स्तर और दरार में बहुत वृद्धि की। सुसंस्कृत पोडोसाइट्स में, संयोजन उपचार ने NLRP3 और caspase-1 की सक्रियता को काफी हद तक दबा दिया और GSDMD N-टर्मिनल स्तरों को कम कर दिया। संयोजन चिकित्सा ने कैस्पेज़ के निषेध के माध्यम से रोग की प्रगति को दबा दिया -1/जीएसडीएमडी-मध्यस्थतापायरोप्टोसिसमनुष्यों और एमआरएल/एलपीआर चूहों दोनों में। परिधीय रक्त में Caspase-1/PI धनात्मक कोशिका क्रमांक SLE-DAl के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध थे। एलएन (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस) पूर्ण छूट और आंशिक छूट वाले रोगियों ने बेसलाइन की तुलना में कैस्पेज़ -1/PI सकारात्मक सेल संख्या को उल्लेखनीय रूप से कम कर दिया था। एसी-एफएलटीडी-सीएमके, एक जीएसडीएमडी-व्युत्पन्न अवरोधक, एलएन के विकास को रोकता है (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस).

निष्कर्ष: संयोजन चिकित्सा ने कस्पासे को दबा दिया-1/GSDMD-मध्यस्थतापायरोप्टोसिसइन विट्रो और विवो में और रोग की प्रगति को कम किया।

कीवर्ड:एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस, पायरोप्टोसिस, कस्पासे-1, गैसडर्मिन डी, चिकित्सा

के लिए उपचार चिकित्सापायरोप्टोसिस

परिचय

एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस(एलएन) गुर्दा की सूजन है जो ऑटोइम्यून रोग सिस्टमिक ल्यूपस एरिथेमेटोसस (एसएलई) के परिणामस्वरूप उत्पन्न होती है। एलएन (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस) एसएलई से पीड़ित रोगियों में एक प्रमुख अभिव्यक्ति है। लगभग 60 प्रतिशत रोगी इस स्थिति को विकसित करते हैं, लगभग 20 प्रतिशत गुर्दे की बीमारी (ईएसआरडी) (1) के अंतिम चरण में प्रगति करते हैं। माइकोफेनोलेट मोफेटिल (एमएमएफ), कैल्सीनुरिन इनहिबिटर (सीएनआई), और स्टेरॉयड के साथ संयोजन चिकित्सा पूरक प्रभाव पैदा करती है और विषाक्तता को भी कम करती है (2)। एलएन के लिए प्रारंभिक उपचार के रूप में इस चिकित्सा की सिफारिश की जाती है (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस) और अंतःशिरा साइक्लोफॉस्फेमाइड (IVCY) और स्टेरॉयड (3-5) की तुलना में बेहतर प्रभावकारिता और अधिक पूर्ण छूट पैदा करता है।

संयोजन चिकित्सा के आणविक और सेलुलर तंत्र की जांच के लिए, एलएन . के एक murine मॉडल में व्यापक ट्रांसक्रिपटामिक विश्लेषण नियोजित किया गया था (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस). एमआरएल/एलपीआर चूहों को अकेले एमएमएफ, टैक्रोलिमस, या प्रेडनिसोन मोनोथेरेपी, या ट्रिपल-ड्रग संयोजन के रूप में दिया गया था। LN . के साथ चूहों के गुर्दे में जीन की अभिव्यक्ति की रूपरेखा (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस)उन संभावित तंत्रों का पता चला है जो मोनोथेरापी की तुलना में संयोजन चिकित्सा के योगात्मक और सहक्रियात्मक प्रभावों के लिए जिम्मेदार हो सकते हैं। संयोजन चिकित्सा द्वारा विशिष्ट रूप से संशोधित 45 डाउनरेगुलेटेड जीनों में से एक कैस्पेज़ है-1 (6)। यह इन्फ्लामेसोम द्वारा सक्रिय होता है, जो एक एकीकृत कस्पासे आत्मीयता डोमेन के साथ एनएलआरपी3, प्रो-कस्पेज़ -1, और एपोप्टोसिस-जुड़े स्पेक-जैसे प्रोटीन (एएससी) से युक्त मल्टीप्रोटीन ओलिगोमर्स हैं। NLRP3/ASC/caspase-1 इन्फ्लामेसोम को एलएन के रोगजनन में एक प्रमुख योगदानकर्ता के रूप में मान्यता दी गई है। (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस). NLRP3 इन्फ्लामेसोम कैस्पेज़ को सक्रिय करके ऑटोइन्फ्लेमेटरी विकारों को चलाता है -1, प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स जैसे आईएल -1 की पीढ़ी की शुरुआत करता है, जिसे एलएन (7-9) में पॉडोसाइट डिसफंक्शन को ट्रिगर करने के लिए जाना जाता है।

सक्रिय कस्पासे-1 अपने एन-और सी-टर्मिनल डोमेन के लिंकेज के भीतर गैसडर्मिन डी (जीएसडीएमडी) को साफ करता है। फिर, एन-टर्मिनल डोमेन कोशिका झिल्ली में छिद्र निर्माण की सुविधा प्रदान करता है, कोशिका को उत्तेजित करता हैपायरोप्टोसिसऔर साइटोकाइन आईएल-1 और आईएल-18 उत्पादन(10)। उभरते अध्ययनों से पता चला है कि जीएसडीएमडी-मध्यस्थतापायरोप्टोसिसऑटोइम्यून एन्सेफेलोमाइलाइटिस (11), मल्टीपल स्केलेरोसिस (12), अल्कोहलिक हेपेटाइटिस (13), और सूजन आंत्र रोग (14) सहित रोगों की प्रगति में भाग लेता है। इसके अलावा, कैसपेज़ के आनुवंशिक या औषधीय निषेध -1 / जीएसडीएमडी ने मधुमेह गुर्दे की बीमारी के murine मॉडल में गुर्दे को चोट से बचाने के लिए प्रदर्शित किया गया है (15, 16) और तीव्र गुर्दे की चोट (17-19) के बाद भी। हालांकि,पायरोप्टोसिसएलएन . में (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस)अभी भी खराब तरीके से परिभाषित किया गया है (20)। हमने अनुमान लगाया कि संयोजन चिकित्सा ने एलएन . में लाभकारी प्रभाव प्रदान किया है (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस)) रोककरपायरोप्टोसिसकस्पासे द्वारा प्रेरित-1/GSDMD.

वर्तमान अध्ययन में, गुर्दे के ऊतकों में कस्पासे-1 और जीएसडीएमडी की सक्रियता की जांच की गई और साथ ही कास्पेज़ पर संयोजन चिकित्सा के प्रभावों की भी जांच की गई-1/जीएसडीएमडी-आश्रितपायरोप्टोसिसएमआरएल/एलपीआर चूहों और एलएन . के रोगियों में निषेध (एक प्रकार का वृक्ष नेफ्रैटिस) के संभावित सहसंबंधपायरोप्टोसिसSLE रोग गतिविधि सूचकांक (SLEDAI) के साथ और उपचार प्रतिक्रियाओं का भी मूल्यांकन किया गया।

के लिए उपचारपायरोप्टोसिस

सामग्री और तरीके

अध्ययन आबादी

अध्ययन दल में एलएन के साथ बायोप्सी द्वारा निदान किए गए रोगी शामिल थे (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) नामांकन से पहले 6 महीने से कम या उसके बराबर। रोगी की आयु सीमा 18-65 वर्ष थी और सभी एसएलई (2l, 22) और इंटरनेशनल सोसाइटी ऑफ नेफ्रोलॉजी / रीनल पैथोलॉजी सोसाइटी (2003) के लिए अमेरिकन कॉलेज ऑफ रूमेटोलॉजी के वर्गीकरण मानदंडों को पूरा करते थे। मरीजों को झेजियांग यूनिवर्सिटी स्कूल ऑफ मेडिसिन और नानजिंग यूनिवर्सिटी स्कूल ऑफ मेडिसिन से भर्ती किया गया था, जिनके पास प्रोटीनुरिया (1.5 ग्राम / डी से अधिक या बराबर) और सीरम क्रिएटिनिन सांद्रता 265.2 यूमोल / एल से कम या बराबर थी। बहिष्करण मानदंड में शामिल हैं: एक मरीज को पहले मेथिलप्रेडनिसोलोन की उच्च खुराक के साथ इलाज किया गया था; जीवविज्ञान (विशिष्ट रोगजनक अणुओं को लक्षित करना) या संयोजन चिकित्सा; स्क्रीनिंग के 12 सप्ताह के भीतर वर्तमान प्लास्मफेरेसिस या अंतःशिरा ग्लोब्युलिन के साथ उपचार; असामान्य यकृत कार्य; वर्तमान सक्रिय संक्रमण; और अध्ययन शुरू होने के 4 सप्ताह के भीतर एक घातक ट्यूमर। एलएन (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगियों को 0.5 g/d की खुराक पर 3 दिनों के लिए मेथिलप्रेडनिसोलोन के साथ पल्स थेरेपी मिली। एक बार मेथिलप्रेडनिसोलोन पल्स थेरेपी पूरी हो जाने के बाद, प्रेडनिसोन (0.6 मिलीग्राम / किग्रा / डी), एमएमएफ (0.5 ग्राम, दो खुराक / डी), और टैक्रोलिमस (2 मिलीग्राम) के साथ संयोजन समूह। दो खुराक / डी) कुल 4 सप्ताह के लिए दिए गए थे। फिर प्रेडनिसोन की खुराक, जो अभी भी एमएमएफ (0.5 ग्राम, दो खुराक/डी) और टैक्रोलिमस (2 मिलीग्राम, दो खुराक/डी) के साथ संयुक्त थी, को हर 2 सप्ताह में 5 मिलीग्राम/डी तक कम कर दिया गया था। एक 10 मिलीग्राम/डी रखरखाव खुराक हासिल की गई थी(4)। पूर्ण छूट (सीआर) को 24- एच मूत्र प्रोटीन एकाग्रता के रूप में लिया गया था 0.4 ग्राम से कम या उसके बराबर, सक्रिय मूत्र तलछट की अनुपस्थिति, सीरम एल्ब्यूमिन एकाग्रता 35 ग्राम / एल से अधिक या उसके बराबर, और सामान्य क्रिएटिनिन (23)। आंशिक छूट (पीआर) को 24-एच मूत्र प्रोटीन सांद्रता में 50 प्रतिशत से अधिक या उसके बराबर 3.5 ग्राम से कम या 3.5 ग्राम के बराबर, 30 ग्राम से अधिक या उसके बराबर सीरम एल्ब्यूमिन एकाग्रता के रूप में लिया गया था। एल, और बेसलाइन से सीरम क्रिएटिनिन एकाग्रता में सामान्य या उससे कम या 25 प्रतिशत के बराबर वृद्धि। हमारे संस्थागत समीक्षा बोर्ड ने अध्ययन (नंबर IIT20200410A) को मंजूरी दी और सभी रोगियों ने नामांकन से पहले लिखित सहमति प्रदान की।

पशु मॉडल

महिला MRL/emoji-FasPr (MRL/LPR) चूहों की आपूर्ति SLAC प्रयोगशाला पशु कंपनी लिमिटेड (शंघाई, चीन) द्वारा की गई थी, सभी चूहों को एक यादृच्छिक संख्या जनरेटर, प्रत्येक समूह में 5 चूहों और प्रत्येक पिंजरे की मदद से बेतरतीब ढंग से विभाजित किया गया था। . उनका 8 सप्ताह की आयु में मौखिक रूप से इलाज किया गया, 0.5 मिलीग्राम/किलोग्राम टैक्रोलिमस (एमसीई एचवाई-13756), 50 मिलीग्राम/किलो एमएमएफ (एमसीई एचवाई-बी0199), और 1 मिलीग्राम/ किलो प्रेडनिसोन (MCE HY-B0214) या वाहन प्रतिदिन कुल 8 सप्ताह के लिए जैसा कि पहले बताया गया है (6)। एसी-एफएलटीडी-सीएमके को एमसीई द्वारा संश्लेषित किया गया था और प्रतिदिन 10 मिलीग्राम / किग्रा आईपी इंजेक्ट किया गया था। निम्नलिखित पता लगाने के लिए जिम्मेदार प्रतिभागियों के लिए सभी उपचारों को अंधा कर दिया गया था। एल्बुवेल एम और क्रिएटिनिन कंपेनियन (एक्सेल, फिल, यूएस) का उपयोग करके मूत्र एल्ब्यूमिन-टू-क्रिएटिनिन अनुपात (यूएसीआर) निर्धारित किया गया था। हिस्टोलॉजिकल और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल धुंधला होने से पहले किडनी के नमूने 4 प्रतिशत पैराफॉर्मलडिहाइड में तय किए गए थे और इम्युनोब्लॉटिंग विश्लेषण के लिए किडनी कॉर्टिस निकाले गए थे। चूहे के उपयोग को हमारी संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (सं.2019-883) द्वारा अनुमोदित किया गया था।

चूहे ग्लोमेरुली अलगाव और पोडोसाइट संस्कृति

ग्लोमेरुली को 12-सप्ताह की महिला C57 और MRL/LPR चूहों के गुर्दे से शुद्ध किया गया था जैसा कि पहले (24) में वर्णित है। संवेदनाहारी चूहों को 37 डिग्री सेल्सियस पहले से गरम चुंबकीय मोतियों के साथ सुगंधित किया गया था। गुर्दे को हटा दिया गया और बर्फ पर 1 मिमी³ में कीमा बनाया गया। फिर वृक्क के ऊतकों को 37 डिग्री पर 1 मिलीग्राम/एमएल कोलेजनेज़ और 100 यू/एमएल DNase I के साथ 30 मिनट के लिए पचाया गया, फिर 100- μm फाल्कन सेल स्ट्रेनर्स（431752, बीडी) के साथ दो बार फ़िल्टर किया गया। 4 डिग्री HBSS घोल (H1025, Solarbio) और 5 मिनट के लिए 200g पर सौम्य सेंट्रीफ्यूजेशन के साथ कई बार धोने के बाद, चुंबकीय स्टैंड (HY-K0200, MCE) का उपयोग करके मोतियों वाले ग्लोमेरुली को एकत्र किया गया और तीन बार HBSS समाधान से धोया गया। जेफरी (25) द्वारा वर्णित विधि के अनुसार पृथक ग्लोमेरुली को टाइप I कोलेजन (C3867, सिग्मा-एल्ड्रिच) लेपित सुसंस्कृत व्यंजन 5 प्रतिशत CO में 37 डिग्री पर सुसंस्कृत किया गया था। इन-विट्रो प्रयोग में पैसेज 2 पोडोसाइट्स का उपयोग किया गया था।पायरोप्टोसिसप्रेरण, साइटोटोक्सिसिटी, और आईएल-1 स्राव का पता लगाना

एमआरएल / एलपीआर चूहों से पोडोसाइट्स को 1 मिलीग्राम / एमएल एलपीएस (टेल-पीबी 5 एलपीएस, इनविवोजेन में) के साथ ऑप्टी-एमईएम में 4 घंटे के लिए हल किया गया था, फिर 5 एमएम एटीपी (tlrlatpl, विवो जीन में) उत्तेजना के बाद। C57 चूहों से पोडोसाइट्स को सामान्य नियंत्रण के रूप में अलग कर दिया गया। मोनोथेरापीज़ टैक्रोलिमस（10μM）, MMF（luM）, और प्रेडनिसोन 10μM）, या संयुक्त चिकित्सा को LPS प्राइमिंग से पहले 1 घंटे के लिए कोशिकाओं के साथ पूर्व-ऊष्मायन किया गया था। उत्तेजना के बाद साइटोटोक्सिसिटी निर्माता के निर्देशों के अनुसार साइटोटोक्सिसिटी डिटेक्शन किट (11644793001, रोश) का उपयोग करके निर्धारित की गई थी। उत्तेजना के बाद सतह पर तैरनेवाला एकत्र किया गया था और निर्माता के निर्देशों के अनुसार IL -1 माउस एलिसा किट (BMS6002, Invitrogen) का उपयोग करके मापा गया था।

एंटीबॉडी और अभिकर्मक

Caspase-1(sc-398715, Santa Cruz Biotech), GSDMDC1 (sc-81868, Santa Cruz Biotech) स्तरों का मूल्यांकन निर्माता के निर्देशों के अनुसार किया गया था।पायरोप्टोसिसपरिधीय रक्त में प्रवाह साइटोमेट्री द्वारा FAM FLICAMCaspase -1 किट (बायो-रेड, यूएसए) का उपयोग करके मापा गया था।

सांख्यिकीय विश्लेषण

ग्राफपैड प्रिज्म (बनाम 8.0) का उपयोग करके सांख्यिकीय विश्लेषण किए गए थे और डेटा को ± एसडी के रूप में दिया गया है। पियर्सन के सहसंबंध का उपयोग करते हुए छात्र के टी-टेस्ट और सहसंबंध विश्लेषण का उपयोग करके दो समूह तुलनाएं की गईं। दो-पूंछ वाला पी<0.05 was="" considered="" statistically="">

के लिए उपचारमें पायरोप्टोसिसल्यूपस नेफ्रैटिस (एलएन)

परिणाम

जीएसडीएमडी-मध्यस्थतापायरोप्टोसिसएलएन से प्रभावित गुर्दे में सक्रिय है (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस)

यह जांचने के लिए कि क्या जीएसडीएमडी ने एलएन के रोगजनन में योगदान दिया है (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस), हमने सबसे पहले एलएन से लिए गए गुर्दे के नमूनों में जीएसडीएमडी के प्रोटीन अभिव्यक्ति स्तर का परीक्षण किया (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगी। इम्यूनोहिस्टोकेमिकल विश्लेषण ने एलएन से लिए गए किडनी बायोप्सी नमूनों में जीएसडीएमडी के अभिव्यक्ति स्तर में उल्लेखनीय वृद्धि का खुलासा किया।एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) टाइप IV, V, I प्लस वैंड IV प्लस V, और स्वस्थ विषयों की तुलना में रोगी। GSDMD को सार्वभौमिक रूप से ग्लोमेरुलर पॉडोसाइट्स, ट्यूबलर कोशिकाओं और एलएन में घुसपैठ की गई इंटरस्टीशियल कोशिकाओं में व्यक्त किया गया था।एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगी। सकारात्मक (लाल तीर) और नकारात्मक धुंधला (काले तीर) वाले क्षेत्र को बड़ा किया गया (चित्र 1क)। तब गुर्दे में जीएसडीएमडी-पॉजिटिव क्षेत्र का प्रतिशत अनुमानित किया गया था (चित्र 1ख)। इसी तरह के परिणाम एमआरएल / एलपीआर चूहों और जंगली प्रकार के नियंत्रणों के गुर्दे में पाए गए। इम्युनोब्लॉटिंग विश्लेषण ने एमआरएल/एलपीआर चूहों (चित्रा 1सी) के गुर्दे के नमूनों में जीएसडीएमडी की अभिव्यक्ति और दरार में काफी वृद्धि की पुष्टि की। ग्लोमेर्युलर पॉडोसाइट्स, ट्यूबलर कोशिकाओं और घुसपैठ वाली इंटरस्टीशियल कोशिकाओं में जीएसडीएमडी को नियंत्रण चूहों (चित्रा 1डी) की तुलना में एमआरएल/एलपीआर चूहों में ऊंचा किया गया था। इन आंकड़ों ने सुझाव दिया कि एलएन से प्रभावित गुर्दे के ऊतकों में जीएसडीएमडी-मध्यस्थता सक्रिय थी (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस).

चित्र 1|जीएसडीएमडी एलएन (ल्यूपस नेफ्रैटिस) से प्रभावित रोगियों और चूहों के गुर्दे में दृढ़ता से ऊंचा और साफ होता है।

(ए) स्वस्थ विषयों और एलएन से लिए गए गुर्दे के नमूनों में जीएसडीएमडी का इम्यूनोकेमिकल धुंधला हो जाना (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगी, सकारात्मक (लाल तीर) और नकारात्मक धुंधला (काले तीर) बढ़े हुए थे।

(बी) जीएसडीएमडी सकारात्मक क्षेत्रों की मात्रा III प्लस वी, IV, IV प्लस वी, वी एलएन (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगी और स्वस्थ विषय।

(सी) तीन जोड़ी नियंत्रण और एमआरएल/एलपीआर चूहों से रीनल कॉर्टेक्स में पूर्ण लंबाई, क्लीवेड एन-टर्मिनल डोमेन और सी-टर्मिनल डोमेन जीएसडीएमडी का इम्युनोब्लॉट विश्लेषण।

(डी) नियंत्रण और एमआरएल/एलपीआर चूहों से लिए गए गुर्दे के नमूनों में जीएसडीएमडी का इम्यूनोकेमिकल धुंधला हो जाना।

*p < {{0}}.05,="" **p=""><0.01. एलएन="">एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस), एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस; एफएल, पूर्ण लंबाई; एनटी, एन-टर्मिनल डोमेन; सीटी, सी-टर्मिनल डोमेन।

संयोजन उपचार GSDMD-मध्यस्थता को दबा देता हैपायरोप्टोसिसविट्रो में प्राथमिक पोडोसाइट्स में सक्रियण

संयोजन चिकित्सा के निरोधात्मक प्रभावों की जांच करने के लिएपायरोप्टोसिस, हमने प्रेरित करने के लिए एलपीएस प्लस एटीपी उत्तेजना पद्धति लागू कीपायरोप्टोसिसएमआरएल/एलपीआर चूहों से पोडोसाइट्स में, सामान्य नियंत्रण के रूप में जंगली प्रकार के C57 चूहों से पोडोसाइट्स लेना। एमआरएलपीआर चूहों से पोडोसाइट्स को एलपीएस के साथ 4 घंटे के लिए प्राइम किया गया था और बाद में एटीपी के साथ 4 घंटे के लिए इलाज किया गया था, जीएसडीएमडी-मध्यस्थता के लिए आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला प्रोत्साहनपायरोप्टोसिससक्रियण(26). सामान्य नियंत्रण की तुलना में, पॉडोसाइट्स ने बाद में कोशिका सूजन और बुदबुदाहट जैसी पाइरोप्टोटिक रूपात्मक विशेषताओं का प्रदर्शन किया। संयोजन चिकित्सा के साथ पूर्व-उपचार ने पाइरोप्टोटिक रूपात्मक विशेषताओं और साइटोटोक्सिसिटी (चित्रा 2ए) में काफी सुधार किया। एलपीएस प्लस एटीपी प्रेरित पोडोसाइट्स साइटोटोक्सिसिटी। तुलनात्मक रूप से, संयुक्त चिकित्सा ने एलपीएस प्लस एटीपी उत्तेजना (आंकड़े 2 बी, सी) से प्रेरित सतह पर तैरनेवाला में साइटोटोक्सिसिटी और आईएल -1 स्राव को काफी कम कर दिया। GSDMD की मध्यस्थता की सक्रियता को और अधिक सत्यापित करने के लिएपायरोप्टोसिस, हमने इम्युनोब्लॉटिंग का उपयोग करके विहित इन्फ्लामेसोम और जीएसडीएमडी सक्रियण का विश्लेषण किया। पाइरोप्टोटिक रूपात्मक परिवर्तनों और साइटोटोक्सिसिटी के अनुरूप, एलपीएस प्लस एटीपी ने एनएलआरपी 3, कास्पेज़ -1 को सक्रिय रूप से सक्रिय किया, और पोडोसाइट्स (चित्रा 2 डी) में जीएसडीएमडी को साफ किया। संयोजन उपचार ने NLRP3 और caspase-1 की सक्रियता को स्पष्ट रूप से दबा दिया और GSDMD N-टर्मिनल के स्तर को कम कर दिया। विशेष रूप से, टैक्रोलिमस, एमएमएफ, या प्रेडनिसोन के साथ मोनोथेरापी ने एलपीएस प्लस एटीपी उत्तेजित सेल साइटोटोक्सिसिटी और एल -1 स्राव को दबा दिया, लेकिन संयोजन चिकित्सा ने कैस्पेज़ -1 और जीएसडीएमडी पर अधिक महत्वपूर्ण निरोधात्मक प्रभाव दिखाया। इन परिणामों ने सबूत प्रदान किए जो इस दृष्टिकोण का समर्थन करते हैं कि संयोजन उपचार ने जीएसडीएमडी-मध्यस्थता में सुधार किया हैपायरोप्टोसिसNLRP3 और caspase-1 की सक्रियता को कम करके।

चित्र 2|संयोजन उपचार इन विट्रो में पोडोसाइट्स में पायरोप्टोसिस को ठीक करता है।

(ए) एलपीएस प्लस एटीपी के साथ ऊष्मायन के बाद सुसंस्कृत प्राथमिक पॉडोसाइट्स में पायरोपोटिक विशेषताओं का प्रदर्शन किया गया और संयोजन उपचार के साथ ढोंग किया गया। तीर ने संकेत दिया कि कोशिकाएं पायरोपोटिक जैसी विशेषताओं का प्रदर्शन करती हैं।

(बी) चुनौती कोशिकाओं से सतह पर तैरनेवाला कोशिका मृत्यु के लिए विश्लेषण किया गया था, जैसा कि एलडीएच स्राव द्वारा मापा जाता है।

(सी) चुनौती वाली कोशिकाओं से सतह पर तैरनेवाला का विश्लेषण आईएल-1बी रिलीज के लिए किया गया था।

(डी) एनएलआरपी3, कस्पासे -1, जीएसडीएमडी-एनटी, और एएससी एक्सप्रेशन के बाद टैक्रोलिमस, एमएमएफ, प्रेडनिसोन, या एनएलआरपी3 इन्फ्लामेसोम सक्रियण के बाद संयोजन उपचार का इम्युनोब्लॉटिंग विश्लेषण।

*पी < {{0}}.05;="" **पी="">< 0.01;="" ***पी=""><0.001; ****="" पी=""><0.0001। एलडीएच,="" लैक्टेट="">

DSMO, डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड, FK506, टैक्रोलिमस; एमएमएफ, माइकोफेनोलेट मोफेटिल; पीएनएस, प्रेडनिसोन; कॉम, संयोजन चिकित्सा; एएससी, एपोप्टोसिस से जुड़े धब्बेदार प्रोटीन।

कॉम्बिनेशन ट्रीटमेंट सप्रेस्ड कैस्पेज़-1/GSDMD-Inducedपायरोप्टोसिसएमआरएल/एलपीआर चूहों में

आठ सप्ताह पुराने एमआरएल/एलपीआर चूहों को एमएमएफ, टैक्रोलिमस और प्रेडनिसोन या वाहन नियंत्रण का संयोजन दिया गया। पिछले अध्ययन (6) के अनुरूप, 8 सप्ताह के उपचार के बाद, वाहन और संयोजन उपचार समूहों के बीच मृत्यु दर या शरीर के वजन में कोई अंतर नहीं पाया गया। वाहन समूह के विपरीत, संयोजन चिकित्सा प्रोटीनमेह, ग्लोमेरुलोस्केलेरोसिस, और गुर्दे की बीचवाला प्रतिरक्षा कोशिकाओं की घुसपैठ को रोकने में बहुत प्रभावी थी (पूरक चित्रा 1)।

इसके बाद, हमने संयोजन चिकित्सा और वाहन नियंत्रण समूहों में कस्पासे-1 और GSDMD अभिव्यक्ति स्तरों की जांच की। इम्यूनोहिस्टोकेमिकल विश्लेषण से पता चला कि ग्लोमेरुलर और रीनल इंटरस्टिशियल कास्पेज़ -1 और जीएसडीएमडी अभिव्यक्ति संयोजन चिकित्सा समूह (चित्रा 3 ए) में स्पष्ट रूप से कम हो गई थी। इम्युनोब्लॉटिंग विश्लेषण में संयोजन उपचार समूह(चित्रा 3बी)के गुर्दा प्रांतस्था में कस्पासे -1 और जीएसडीएमडी की घटी हुई अभिव्यक्ति और दरार भी मिली। इसके अलावा, कस्पासे -1/प्रोपीडियम आयोडाइड (पीआई) डबल-पॉजिटिव कोशिकाओं को फ्लो साइटोमेट्री और ए का उपयोग करके गिना गया था।पायरोप्टोसिसFAM कैस्पेज़-1किट. परिणामों ने एमआरएल/एलपीआर चूहों में कस्पासे -1*/पीआई' परिधीय रक्त कोशिका संख्या में उल्लेखनीय कमी का खुलासा किया, जिसे वाहन के साथ इलाज किए गए एमआरएल/एलपीआर चूहों की तुलना में संयोजन उपचार प्राप्त हुआ। (आंकड़े 3सी,डी)। इसके अलावा, संयोजन उपचार ने सीरम II एकाग्रता (चित्रा 3ई) को भी काफी कम कर दिया। इस प्रकार हमने निष्कर्ष निकाला कि संयोजन उपचार ने कस्पासे को दबा दिया-1/जीएसडीएमडी-प्रेरितपायरोप्टोसिसएलएन के गुर्दे और रक्त कोशिकाओं में (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) चूहे।

चित्र 3|एमआरएल/एलपीआर चूहों में संयोजन उपचार ने कस्पासे -1/जीएसडीएमडी-मध्यस्थता पायरोप्टोसिस को देखा।

(ए) एमआरएल/एलपीआर चूहों के गुर्दे के नमूनों में जीएसडीएमडी और कस्पासे -1 का इम्यूनोकेमिकल धुंधला हो जाना। वाहन नियंत्रण की तुलना में, कास्पेज़ -1 और GSDMD अभिव्यक्ति को संयोजन उपचार समूह में स्पष्ट रूप से बाधित किया गया था।

(बी) एमआरएल/एलपीआर चूहों के रीनल कॉर्टेक्स नमूनों में पूर्ण-लंबाई और क्लीवेड जीएसडीएमडी और कास्पेज़ का इम्युनोब्लॉट विश्लेषण -1; वाहन और संयोजन उपचार समूहों के परिणामों की तुलना।

(सी) एमआरएल/एलपीआर चूहों से परिधीय रक्त में कस्पासे के एफएसीएस-1/पीआई डबल-पॉजिटिव कोशिकाएं जिन्हें संयोजन उपचार दिया गया था या नहीं दिया गया था।

(डी) एमआरएल/एलपीआर चूहों के परिधीय रक्त में कैस्पेज़ की मात्रा -1/पीआई डबल-पॉजिटिव कोशिकाओं को दी गई या नहीं दी गई संयोजन चिकित्सा।

(ई) सीरम आईएल की मात्रा का ठहराव {{0}} एमआरएल / एलपीआर चूहों में बी सांद्रता दिया गया या संयोजन उपचार नहीं दिया गया। #### पी <0.0001। facs,="" प्रतिदीप्ति="" सक्रिय="" सेल="" छँटाई;="" सीटी,="" संयोजन="">

कॉम्बिनेशन थेरेपी सप्रेस्ड कैस्पेज़-1/GSDMD-प्रेरितपायरोप्टोसिसएलएन में (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगी

जनवरी 2020 से जून 2020 के बीच एलएन के 47 मरीज (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) को नामांकित किया गया और 43 ने 24-सप्ताह के संयोजन चिकित्सा को पूरा किया। नामांकित कोहोर्ट की आधारभूत बीमारी और जनसांख्यिकी को पूरक तालिका 1 में सूचीबद्ध किया गया है। कैसपेज़ की मात्रा -1 / प्रोपीडियम आयोडाइड (पीआई डबल-पॉजिटिव कोशिकाओं को एलएन (एलएन) के रोगियों में आयोजित किया गया था।एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) टाइप III, IV, V, III प्लस V, IV प्लस V और स्वस्थ नियंत्रण में a . का उपयोग करकेपायरोप्टोसिसFAM Caspase-1 किट और फ्लो साइटोमेट्री। स्वस्थ नियंत्रणों की तुलना में, परिधीय रक्त में कस्पासे -1/पीआई डबल-पॉजिटिव कोशिकाओं की संख्या में वृद्धि हुई थी (आंकड़े 4ए, बी)। हमने 24-सप्ताह की चिकित्सा के बाद और बेसलाइन पर कस्पासे-1/PI डबल-पॉजिटिव कोशिकाओं की भी जांच की। 24-सप्ताह की प्रेरण चिकित्सा के बाद, सीआर और पीआर की घटनाएं क्रमशः 39.5 प्रतिशत (17/43) और 32.6 प्रतिशत (14/43) थीं। सीआर और पीआर रोगियों के परिधीय रक्त में कस्पासे -1/पीआई डबल-पॉजिटिव सेल नंबर बेसलाइन (चित्रा 4C) की तुलना में उल्लेखनीय रूप से कम हो गए थे। हमने कस्पासे -1 प्रेरित . के बीच संबंध की भी पहचान कीपायरोप्टोसिसऔर स्लेडा; डेटा ने स्पष्ट रूप से दिखाया कि परिधीय रक्त में कास्पेज़ -1/PI सकारात्मक अनुपात SLEDAI (चित्र 4D) के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध था। एसी-एफएलटीडी-सीएमके, एक जीएसडीएमडी-व्युत्पन्न अवरोधक, एलएन के विकास को रोकता है (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस).

चित्र 4|एलएन (ल्यूपस नेफ्रैटिस) रोगियों में संयोजन चिकित्सा ने कैस्पेज़ को क्षीण कर दिया-1-मध्यस्थता पायरोप्टोसिस।

(ए) एलएन के परिधीय रक्त में कस्पासे के FACS-1/PI डबल-पॉजिटिव कोशिकाएं (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगियों को संयोजन चिकित्सा के साथ या बिना इलाज किया गया।

(बी) प्रकार III, IV, V, III प्लस V, और IV प्लस V LN के परिधीय रक्त में कस्पासे -1/PI डबल-पॉजिटिव कोशिकाओं की मात्रा का ठहराव (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगी और स्वस्थ विषय।

(सी) एलएन के परिधीय रक्त में कस्पासे -1/पीआई डबल-पॉजिटिव कोशिकाओं की मात्रा का ठहराव (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) बेसलाइन, सीआर, पीआर, और संयोजन चिकित्सा के बाद गैर-छूट पर रोगी।

(डी) एसएलई-डीएआई के साथ कस्पासे -1/पीआई डबल-पॉजिटिव सेल अनुपात का सहसंबंध विश्लेषण।

**पी < 0.01.="" facs,="" प्रतिदीप्ति="" सक्रिय="" सेल="" छँटाई;="" एलएन="">एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस), एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस; सीआर, पूर्ण छूट; पीआर, आंशिक छूट; SLE-DAI, सिस्टमिक ल्यूपस एरिथेमेटोसस रोग गतिविधि सूचकांक।

हाल के एक अध्ययन में पाया गया कि GSDMDhmice ने वृक्क C3 और IgG जमाव, अधिक गंभीर गुर्दे की चोट, और SLE.17 के एक इमीकिमॉड-प्रेरित मॉडल में मृत्यु दर में वृद्धि की, LN में GSDMD की भूमिका को और स्पष्ट करने के लिए (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस), MRL/LPR चूहों का इलाज Ac-FLTD-CMK21 के साथ 8-सप्ताह की उम्र से शुरू किया गया था, वाहन के साथ नियंत्रण के रूप में। 8-सप्ताह के उपचार के बाद, वाहन और एसी-एफएलटीडी-सीएमके उपचारित समूह के बीच मृत्यु दर या शरीर के वजन में कोई अंतर नहीं पाया गया। वाहन नियंत्रण चूहों की तुलना में, एसी-एफएलटीडी-सीएमके-उपचारित एमआरएल/एलपीआर चूहों में कम मूत्र एल्ब्यूमिन-क्रिएटिनिन अनुपात (चित्रा 5ए), एक कम सीरम क्रिएटिनिन एकाग्रता (चित्रा 5बी), कम ग्लोमेरुलोस्केलेरोसिस (चित्रा 5सी), और सीडी3 था। , CD4, और CD68 धनात्मक सेल घुसपैठ (चित्र 5D)। इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के परिणामों ने जीएसडीएमडी (चित्रा 5डी) की कम अभिव्यक्ति और एलिसा (चित्रा 5ई) द्वारा निर्धारित सीरम आईएल -1 स्राव को दबा दिया। सामूहिक रूप से, डेटा ने सुझाव दिया कि एसी-एफएलटीडी-सीएमके बाधितपायरोप्टोसिसएलएन से प्रभावित गुर्दे में (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस).

चित्र 5|एसी-एफएलटीडी-सीएमके, एक जीएसडीएमडी-व्युत्पन्न अवरोधक, एलएन (ल्यूपस नेफ्राइटिस) के विकास को रोकता है।

(ए) मूत्र एल्ब्यूमिन-टू-क्रिएटिनिन अनुपात की गणना एमआरएल / एलपीआर चूहों में की गई थी या जीएसडीएमडी अवरोधक नहीं दिया गया था।

(बी) एमआरएल/एलपीआर चूहों में सीरम क्रिएटिनिन जीएसडीएमडी अवरोधक दिया या नहीं दिया गया।

(सी) आवधिक एसिड-शिफ (पीएएस) और परिमाणीकरण ग्लोमेरुलोस्केलेरोसिस प्रतिशत के साथ दागे गए गुर्दे के नमूनों की प्रतिनिधि छवियां।

(डी) सीडी3, सीडी4, एफ4/80, और जीएसडीएमडी का इम्यूनोकेमिकल धुंधला हो जाना। (ई) एमआरएल/एलपीआर चूहों में सीरम आईएल -1बी सांद्रता की मात्रा का ठहराव दिया गया है या जीएसडीएमडी अवरोधक नहीं दिया गया है।

डेटा को माध्य ± SEM के रूप में दिखाया गया है। #p < {{0}}.05,="" ##p=""><>

बहस

उच्च सीआर और समग्र प्रतिक्रिया दर, छूट के लिए एक संक्षिप्त समय और कम दुष्प्रभावों के कारण संयोजन चिकित्सा एक आशाजनक रणनीति है। अब तक, संयोजन चिकित्सा के अंतर्निहित आणविक तंत्र ज्ञात नहीं थे। हाल ही में, फू एट अल। (6) ने मोनोथेरापी या संयोजन चिकित्सा के साथ एमआरएल/एलपीआर चूहों का इलाज किया और पूरे गुर्दे पर एक व्यापक ट्रांसक्रिप्टोमिक विश्लेषण किया। दिलचस्प बात यह है कि उन्होंने पाया कि संयोजन चिकित्सा लेकिन विशेष रूप से मोनोथेरापी नहीं और विशिष्ट रूप से दबाए गए कस्पासे -1 अभिव्यक्ति।

NLRP3/ASC/caspase-1 inflammasome को अब LN के रोगजनन में एक प्रमुख योगदानकर्ता के रूप में मान्यता प्राप्त है (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) पोडोसाइट्स में एनएलआरपी3 इन्फ्लामेसोम ल्यूपस-प्रवण चूहों में और एलएन (एलएन) के रोगियों में भी सक्रिय होते हैं।एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) जब एनएलआरपी3 इन्फ्लामासोम्स को कस्पासे -1 अवरोधक, प्रोटीनमेह, वृक्क हिस्टोलॉजिकल घावों, और पॉडोसाइट फुट प्रक्रिया अपक्षय के साथ दबा दिया गया था, तो ल्यूपस-प्रवण चूहों (8) में सुधार पाया गया था। हुआंग एट अल। (27) ने बताया कि एनएलआरपी3 एलएन की ट्यूबलर कोशिकाओं में व्यक्त किया गया था (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) कक्षा IV और यह कि NLRP3 सक्रियण LN के रोगियों के लिए गतिविधि सूचकांक स्कोर के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध था। कैस्पासे -1 ल्यूपस और संवहनी शिथिलता में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाने के लिए सिद्ध हुआ है, और इस प्रकार उपन्यास चिकित्सीय हस्तक्षेप (28) के लिए एक संभावित लक्ष्य है। RIP3 (29), P2X7 रिसेप्टर विरोधी (30), GSK -3 अवरोधक (31) और एक Nrf2 एगोनिस्ट (32) जैसी उभरती हुई प्रायोगिक दवाओं ने LN के विकास को बाधित किया (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) MRL/LPR चूहों में NLRP3/ASC/caspase-1 इन्फ्लामेसोम गतिविधि को संशोधित करके, जो LN में NLRP3/ASC/caspase-1 के महत्व और महत्वपूर्णता पर प्रकाश डालता है। आईएल -18 की बढ़ी हुई सीरम सांद्रता रोग की गंभीरता और एसएलई रोगियों (33) में गुर्दे की चोट / भागीदारी की डिग्री से संबंधित है। हमारे सर्वोत्तम ज्ञान के लिए, ऐसा लगता है कि गैसडर्मिन परिवार के विकास के लिए आवश्यक हो सकता हैपायरोप्टोसिस, लेकिन एसएलई रोगियों में जीएसडीएमडी/जीएसडीएमई की उपस्थिति के प्रमाणों की कमी रही है।

कुल मिलाकर, हमने एलएन से लिए गए किडनी बायोप्सी नमूनों में जीएसडीएमडी की सक्रियता और अभिव्यक्ति की जांच की।एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगियों और एमआरएल / एलपीआर चूहों। GSDMD को ग्लोमेरुलर पॉडोसाइट्स और ट्यूबलर कोशिकाओं और घुसपैठ की गई इंटरस्टीशियल कोशिकाओं में दृढ़ता से प्रेरित और साफ किया गया था। इसके बाद, MRL/LPR चूहों को MMF, टैक्रोलिमस और प्रेडनिसोन या वाहन का संयोजन दिया गया। वाहन नियंत्रण समूह की तुलना में, संयोजन उपचार समूह में कस्पासे-1 और GSDMD की सक्रियता कम हो गई थी। की उपाधिपायरोप्टोसिसपरिधीय रक्त में भी एलएन में बहुत कम था (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) संयोजन चिकित्सा के प्रशासन के बाद रोगी। इसके अतिरिक्त,पायरोप्टोसिसपरिधीय रक्त में सकारात्मक रूप से SLEDAI के साथ सहसंबद्ध था, जिसने सुझाव दिया किपायरोप्टोसिसपरिधीय रक्त में एसएलई गतिविधि के लिए एक महत्वपूर्ण मार्कर के रूप में कार्य कर सकता है। इस प्रकार हमने अनुमान लगाया कि संयोजन चिकित्सा एलएन में लाभकारी प्रभाव प्रदान कर सकती है (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोककरपायरोप्टोसिसकस्पासे द्वारा प्रेरित-1/GSDMD. एसी-एफएलटीडी-सीएमके के साथ एक परिसर में कस्पासे -1 के पिछले क्रिस्टल संरचनात्मक अध्ययनों ने कई एंजाइम-अवरोधक अंतःक्रियाओं का खुलासा किया जो कि कस्पासे द्वारा जीएसडीएमडी मान्यता को रोकते थे -1। हालांकि, हमने पाया कि एसी-एफएलटीडी-सीएमके, जो जीएसडीएमडी-व्युत्पन्न अवरोधक के रूप में कार्य करता है, बाधितपायरोप्टोसिसएलएन में (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस), जो एक अलग तंत्र द्वारा प्रेरित हो सकता है।

हाल ही में, एसएलई (34) के टीएलआर7-प्रेरित मुराइन मॉडल में, जीएसडीएमडी-/-चूहों ने गुर्दे की क्षति और मृत्यु दर में वृद्धि की एक बड़ी डिग्री विकसित की, जिसने शुरू में सुझाव दिया कि जीएसडीएमडी विलोपन का सुरक्षात्मक प्रभाव होगा और इसके साथ जुड़ा होगा प्रणालीगत सूजन और संबंधित बढ़ी हुई मृत्यु दर के साथ स्वप्रतिपिंडों का उत्पादन। जीएसडीएमडी-कमी वाले चूहों में जंगली प्रकार के चूहों की तुलना में गुर्दे के नमूनों और उच्च प्रोटीनुरिया में एक ग्लोमेरुलर प्रतिरक्षा परिसर का अधिक प्रमुख बयान विकसित होता है। GSDMD-/लिम्फोसाइटों में बाह्य कोशिकीय HMGB1 का बढ़ा हुआ स्राव भी पाया गया जो यह बताता है कि परिगलन/पायरोप्टोसिसतब हुआ जब जीएसडीएमडी अनुपस्थित था।

कैस्पासे-1 ट्रिगरपायरोप्टोसिसGSDMD दरार द्वारा। इसके विपरीत, जीएसडीएमडी-कमी या जीएसडीएमडी-निम्न कोशिकाओं में, कस्पासे-1 एपोप्टोसिस को ट्रिगर करता है और फिर जीएसडीएमई-आश्रित द्वितीयक परिगलन औरपायरोप्टोसिस. जब चिकित्सा के बाद जीएसडीएमडी गतिविधि अनुपस्थित होती है, तो जीएसडीएमई कस्पासे को भी बदल सकता है-3-मध्यस्थ एपोप्टोसिस कोपायरोप्टोसिस(35,36)। इसके अलावा, जीएसडीएमडी की कमी वाले मैक्रोफेज में कैस्पेज़ -8 की सक्रियता बहुत बढ़ गई थी। कास्पेज़ का महत्वपूर्ण सक्रियण -8 टीएलआर में भी पाया गया 7- प्रेरित जीएसडीएमडी-कमी वाले एलएन (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) चूहे (34)। इस प्रकार, GSDMD की अनुपस्थिति में, यह संभावना है कि caspase-1 caspase के साथ सहयोग करता है-8 कस्पासे का कारण बनता है-3-GSDME-मध्यस्थता एपोप्टोसिस को स्विच करने के लिएपायरोप्टोसिसएलएन में (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस), एक परिकल्पना जो आगे प्रयोगात्मक जांच की मांग करती है।

वर्तमान अध्ययन में कई सीमाएँ हैं। सबसे पहले, वर्तमान आंकड़ों के आधार पर, हमने सत्यापित किया कि संयोजन चिकित्सा दबा सकती हैपायरोप्टोसिस, लेकिन स्टेरॉयड और एमएमएफ की दोहरी चिकित्सा, स्टेरॉयड और टैक्रोलिमस, या एंटी-सीडी20 एंटीबॉडी जैसे अन्य उपचारों का भी तुलनीय प्रभाव हो सकता है। दूसरा, कस्पासे -1 पर संयोजन चिकित्सा के निषेध प्रभाव के सटीक आणविक तंत्र की अच्छी तरह से खोज नहीं की गई है। अंतिम लेकिन कम से कम, हम एसएलई-डीएआई के साथ परिधीय रक्त में कस्पासे -1 / पीआई डबल-पॉजिटिव कोशिकाओं के संबंध और पूर्वव्यापी एलएन में संयोजन चिकित्सा उपचार से पहले और बाद में परिवर्तन का निरीक्षण करते हैं।एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) रोगी सहवास। रोग गतिविधि और उपचार प्रतिक्रिया के लिए कस्पासे -1/PI डबल-पॉजिटिव कोशिकाओं के नैदानिक ​​​​भविष्य कहनेवाला मूल्य को एक बड़े संभावित समूह में और अधिक जांच की आवश्यकता है।

कुल मिलाकर, हमने पहचाना कि संयोजन चिकित्सा ने कस्पासे को दबाकर इसके लाभकारी प्रभावों को प्रदान किया है-1/GSDMD- प्रेरितपायरोप्टोसिसएलएन में (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस), जिसने शामिल सेलुलर तंत्र में एक उपन्यास अंतर्दृष्टि प्रदान की। वास्तव में, संयोजन चिकित्सा ने विशेष रूप से और विशिष्ट रूप से कस्पासे-1 अभिव्यक्ति को दबा दिया। NLRP3 और caspase के औषधीय या आनुवंशिक निषेध-1 ने गुर्दे के कार्य में सुधार किया और LN में ऑटोइम्यूनिटी को दबा दिया (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) एलएन में कस्पासे की पैथोफिजियोलॉजिकल भूमिका-1 (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) आगे के अध्ययन के योग्य है, और एलएन के रोगियों में जीएसडीएमडी को लक्षित करने वाली चिकित्सा (एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस) का बहुत सावधानी से मूल्यांकन करने की आवश्यकता है।

के लिए उपचार विधिपायरोप्टोसिस

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1. सक्सेना आर, महाजन टी, मोहन सी.एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस: वर्तमान अद्यतन। आर्थराइटिस रेस थेर (2011)13:240.doi: 10.1186/ar3378

2. एन वाई, झांग एच, लियू जेड। इंडिविजुअलाइजिंग थेरेपी इनएक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस. किडनी इंट रेप (2019)4:1366-72.doi: 10.1016/j.ekir.2019.08.005

3. बाओ एच, लियू जेडएच, ज़ी एचएल, हू डब्ल्यूएक्स, झांग एचटी, लीएलएस। कक्षा V प्लस IV का सफल उपचारएक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिसमल्टीटार्गेट थेरेपी के साथ। जे एम सोक नेफ्रोल (2008)19:2001-10.doi: 10.1681/ASN.2007121272

4. लियू जेड, झांग एच, लियू जेड, जिंग सी, फू पी, नी जेड, एट अल। प्रेरण उपचार के लिए मल्टीटार्गेट थेरेपीएक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस: एक यादृच्छिक परीक्षण, एन इंटर्न मेड (2015)162:18-26। डीओआई: 10.7326/एम14-1030

5. झांग एच, लियू जेड, झोउ एम, लियू जेड, चेन जे, जिंग सी, एट अल। रखरखाव उपचार के लिए मल्टीटार्गेट थेरेपीएक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस. जे एम सोक नेफ्रोल (2017)28:3671-8.doi:10.1681/ASN.2017030263

6. फू जे, वांग जेड, ली के, वी सी, लियू जेड, झांग एम, एट अल। ट्रांसक्रिप्टोमिक विश्लेषण संयोजन चिकित्सा में उपन्यास सिनर्जिस्टिक तंत्र को उजागर करता हैएक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस. किडनी इंट (2018)93:416-29.doi: 10.1016/j.kint.2017.8.0.31

7. उम्मारिनो डी।एक प्रकार का वृक्षनेफ्रैटिस: NLRP3 इन्फ्लामेसोम पॉडोसाइट डिसफंक्शन को प्रज्वलित करता है। नेट रेव रुमेटोल (2017)13:451.doi: 10.1038/ऑर्फियम। 2017.9