मेलेनोसोम बायोजेनेसिस, स्थानांतरण और गिरावट भाग 2 को विनियमित करके उपन्यास पेप्टाइड मिश्रण का श्वेत प्रभाव

पेप्टाइड मिश्रण मेलेनोसोम जैवजनन/परिवहन संबंधी कारकों की अभिव्यक्ति को रोकता है

पेप्टाइड मिश्रण द्वारा दिखाए गए अपचयन क्रिया के तंत्र की जांच करने के लिए, मेलेनोजेनेसिस-संबंधित कारकों के अभिव्यक्ति स्तर और मेलानोसोम परिवहन-संबंधी कारकों का विश्लेषण किया गया।

इसके साथ ही,धनियाइसमें कोलेजन उत्पादन को बढ़ावा देने का कार्य भी है, जो त्वचा की लोच और चमक को बढ़ा सकता है और क्षतिग्रस्त त्वचा कोशिकाओं की मरम्मत में मदद कर सकता है।सिस्टंचफेनिलेथेनॉल ग्लाइकोसाइड्स का टाइरोसिनेज गतिविधि पर एक महत्वपूर्ण डाउन-रेगुलेटिंग प्रभाव होता है, और टायरोसिनेज पर प्रभाव प्रतिस्पर्धी और प्रतिवर्ती निषेध के रूप में दिखाया जाता है, जो सिस्टैंच में व्हाइटनिंग अवयवों के विकास और उपयोग के लिए एक वैज्ञानिक आधार प्रदान कर सकता है। इसलिए,धनियात्वचा को गोरा करने में अहम भूमिका निभाता है। यह मलिनकिरण और नीरसता को कम करने के लिए मेलेनिन उत्पादन को रोक सकता है; और कोलेजन उत्पादन को बढ़ावा देनात्वचा लोच और चमक में सुधार. सिस्टैंच के इन प्रभावों की व्यापक मान्यता के कारण, कईत्वचा को गोरा करने वाले उत्पादउपभोक्ता मांग को पूरा करने के लिए सिस्टैंच जैसे हर्बल अवयवों को डालना शुरू कर दिया है, इस प्रकार सिस्टैंच के वाणिज्यिक मूल्य में वृद्धि हुई हैत्वचा को सफ़ेदी प्रदान करने वालाउत्पादों। संक्षेप में, में सिस्टंच की भूमिकात्वचा को सफ़ेदी प्रदान करने वालाअत्यंत महत्वपूर्ण है। इसके एंटीऑक्सीडेंट प्रभाव और कोलेजन-उत्पादक प्रभाव मलिनकिरण और नीरसता को कम कर सकते हैं, त्वचा की लोच और चमक में सुधार कर सकते हैं, और इस प्रकार एक सफ़ेद प्रभाव प्राप्त कर सकते हैं। इसके अलावा, CISTANCHE का व्यापक अनुप्रयोगत्वचा को सफ़ेदी प्रदान करने वालाउत्पाद प्रदर्शित करते हैं कि वाणिज्यिक मूल्य में इसकी भूमिका को कम करके नहीं आंका जा सकता है।

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जैसा कि चित्र 2A में दिखाया गया है, B16F10 कोशिकाओं में पेप्टाइड मिश्रण द्वारा MITF और इसके डाउनस्ट्रीम जीन, TYR, TYPR1 और TYRP2 के ट्रांसक्रिप्शन स्तर को कम किया गया था। इसके अलावा, B16F10 कोशिकाओं (चित्र। 2B) में पेप्टाइड मिश्रण द्वारा MITF और टायरोसिनेस के -MSH- प्रेरित प्रोटीन स्तर में काफी कमी आई थी।

इन परिणामों से पता चलता है कि पेप्टाइड मिश्रण का मेलानोजेनेसिस निषेध प्रभाव मेलानोजेनेसिस-संबंधित कारकों की अभिव्यक्ति को रोककर हुआ।

यह प्रकाशित किया गया है कि MITF एक प्रतिलेखन कारक के रूप में भी कार्य करता है जो मोटर प्रोटीन को सक्रिय करता है जिसकी मेलेनोसोम परिवहन [28,29] में भूमिका होती है। यह पहचानने के लिए कि क्या पेप्टाइड मिश्रण, जिसका MITF अभिव्यक्ति पर निरोधात्मक प्रभाव है, मोटर प्रोटीन की अभिव्यक्ति में कमी आई है, हमने mRNA और प्रोटीन स्तरों का विश्लेषण किया। जैसा कि अंजीर में दिखाया गया है। 2C, B16F10 कोशिकाओं में पेप्टाइड मिश्रण द्वारा RAB27A, MLPH और MYO5A जीन के प्रतिलेखन स्तर में काफी कमी आई थी। इसके अलावा, बी16एफ10 कोशिकाओं (छवि 2डी) में पेप्टाइड मिश्रण द्वारा रब27ए और मेलानोफिलिन के -एमएसएच-प्रेरित प्रोटीन स्तर को कम किया गया था।

इन परिणामों से पता चलता है कि पेप्टाइड मिश्रण द्वारा MITF अभिव्यक्ति के निषेध के परिणामस्वरूप मेलेनोसोम परिवहन का निषेध हो सकता है।

पेप्टाइड मिश्रण MITF गतिविधि को CREB और ERK फॉस्फोराइलेशन के नियमन के माध्यम से रोकता है

MITF अभिव्यक्ति पर पेप्टाइड मिश्रण के क्रिया तंत्र की जांच करने के लिए, हमने MITF के ट्रांसक्रिप्शनल और पोस्ट-ट्रांसलेशनल नियामक कारकों के फॉस्फोराइलेशन स्तर का विश्लेषण किया।

जैसा कि अंजीर में दिखाया गया है। 3A, फॉस्फोराइलेटेड CREB, MITF अभिव्यक्ति को सक्रिय करने वाला एक प्रतिलेखन कारक, पेप्टाइड मिश्रण द्वारा खुराक पर निर्भर रूप से कम किया गया था। पहले, यह पहचाना गया है कि MITF की गतिविधि इसके पोस्ट-ट्रांसलेशनल संशोधनों पर निर्भर करती है और प्रोटियासम-मध्यस्थ MITF प्रोटीन क्षरण को फॉस्फोराइलेटेड ERK1 / 2 [30] द्वारा प्रेरित किया जा सकता है। पेप्टाइड मिश्रण ने B16F10 कोशिकाओं (अंजीर। 3B) में a-MSH-उत्तेजित स्थिति के तहत p-ERK1/2 स्तर में काफी वृद्धि की।

ये परिणाम बताते हैं कि पेप्टाइड मिश्रण द्वारा CREB और ERK1 / 2 फॉस्फोराइलेशन के नियमन के माध्यम से MITF की अभिव्यक्ति और गतिविधि को कम किया जा सकता है।

पेप्टाइड मिश्रण HaCaT केराटिनोसाइट्स के मेलेनोसोम तेज को दबा देता है

मेलानोसोम्स को मेलानोसाइट्स के डेन्ड्राइट युक्तियों से केराटिनोसाइट्स के फागोसाइटोसिस के माध्यम से केराटिनोसाइट्स में स्थानांतरित करने के लिए जाना जाता है। यह पहचानने के लिए कि क्या पेप्टाइड मिश्रण केराटिनोसाइट्स में मेलेनोसोम स्थानांतरण को बाधित कर सकता है, HaCaT केराटिनोसाइट्स को पेप्टाइड मिश्रण के साथ 10, 50, 100 और 200 M की सांद्रता पर इलाज किया गया और आगे B16F10 कोशिकाओं से पृथक मेलेनोसोम के साथ इलाज किया गया। पेप्टाइड मिश्रण (छवि 4 ए) द्वारा कोशिकाओं को हस्तांतरित मेलानोसोम की संख्या खुराक पर निर्भर रूप से कम हो गई थी। Fontana-Masson धुंधला के माध्यम से छवि विश्लेषण से पता चला है कि पेप्टाइड मिश्रण-उपचारित समूह में एक खुराक पर निर्भर तरीके (चित्र। 4B) में भूरे रंग के मेलेनोसोम का वितरण काफी कम हो गया है।

इसके अलावा, F2RL1 (PAR -2) जीन की अभिव्यक्ति, एक रिसेप्टर जो केराटिनोसाइट्स के फागोसाइटोसिस को नियंत्रित करता है, ट्रिप्सिन-उत्तेजित स्थिति (चित्र। 4C) के तहत पेप्टाइड मिश्रण द्वारा काफी कम हो गया था।

इन परिणामों से पता चलता है कि पेप्टाइड मिश्रण पेप्टाइड मिश्रण द्वारा केराटिनोसाइट्स में PAR -2 अभिव्यक्ति के निषेध के माध्यम से फैगोसाइटोसिस को कम कर सकता है।

पेप्टाइड मिश्रण HaCaT केराटिनोसाइट्स में मेलेनोसोम गिरावट को प्रेरित करता है

केराटिनोसाइट्स में स्थानांतरित मेलानोसोम्स को धीरे-धीरे केराटिनोसाइट्स के कॉर्निफिकेशन द्वारा समाप्त किया जाता है या इंट्रासेल्युलर ऑटोफैगी सिस्टम द्वारा अपमानित किया जाता है। यह पहचानने के लिए कि क्या पेप्टाइड मिश्रण मेलेनोसोम क्षरण को बढ़ावा दे सकता है, हमने पेप्टाइड मिश्रण को मेलेनोसोम में एचसीएटी केराटिनोसाइट्स युक्त माना। जब शेष मेलेनोसोम की मात्रा की निगरानी की गई, तो पेप्टाइड मिश्रण (चित्र। 5 ए) के साथ इलाज किए गए सेल लाइसेट से खुराक पर निर्भर कमी देखी गई। Fontana-Masson धुंधला के माध्यम से छवि विश्लेषण से पता चला है कि पेप्टाइड मिश्रण-उपचारित समूह में खुराक-निर्भर तरीके (चित्र। 5B) में भूरे रंग के दाग मेलेनोसोम का वितरण काफी कम हो गया है।

इसके अलावा, जब केराटिनोसाइट्स में ऑटोफैगिक गतिविधि से संबंधित प्रोटीन के स्तर की निगरानी की गई, तो बीक्लिन -1 और एलसी 3- II के प्रोटीन स्तर ऑटोपागोसोम गठन के बारे में पेप्टाइड मिश्रण उपचार द्वारा बढ़ाए गए, जबकि पी62 के प्रोटीन स्तर में कमी आई पेप्टाइड मिश्रण उपचार (चित्र 5C) द्वारा ऑटोफैगोलिसोसम द्वारा कम किया गया था।

इन परिणामों से पता चलता है कि पेप्टाइड मिश्रण ने केराटिनोसाइट्स में मेलेनोसोम के क्षरण को बढ़ावा देने के लिए ऑटोफैजिक गतिविधि को प्रेरित किया।

पेप्टाइड मिश्रण ने त्वचा के समकक्ष मॉडल में एंटी-पिगमेंटेशन प्रभाव दिखाया

मेलानोडर्म का उपयोग करके यह पता लगाने के लिए एक प्रयोग किया गया कि क्या पेप्टाइड मिश्रण त्वचा के एंटी-पिगमेंटेशन का परिणाम हो सकता है। पेप्टाइड मिश्रण के 2,000 पीपीएम युक्त लाइपोसोम के सामयिक उपचार के बाद 2 सप्ताह के लिए 50 और 100 माइक्रोग्राम की खुराक पर आयोजित किया गया, प्रकाश माइक्रोस्कोपी का प्रदर्शन किया गया। डार्क मेलानोसोम्स के गठन को पूरी तरह से मेलानोसाइट निकायों और नियंत्रण ऊतक के डेन्ड्राइट युक्तियों में प्रेरित किया गया था, जबकि समग्र कोशिका निकाय कम संख्या में डेंड्राइट्स के साथ उज्ज्वल थे क्योंकि मेलेनिन उत्पादन पेप्टाइड मिश्रण (छवि 6 ए) के साथ इलाज किए गए ऊतक में बाधित था। ). इसके अलावा, दृश्य अवलोकन (छवि 6 बी) का समर्थन करते हुए, मेलेनिन सामग्री को पेप्टाइड मिश्रण द्वारा खुराक पर निर्भर रूप से कम किया गया था।

इसके अलावा, पूरे एपिडर्मिस में मेलेनिन वितरण का निरीक्षण करने के लिए ऊतक विज्ञान का प्रदर्शन किया गया था। परिणाम के अनुसार, नियंत्रण ऊतक ने बेसल परत के मेलानोसाइट्स में मेलानोजेनेसिस की उल्लेखनीय वृद्धि दिखाई, और केराटिनोसाइट्स में भूरे रंग के धब्बे वाले मेलेनिन को पास केराटिनोसाइट्स में स्थानांतरण के कारण देखा गया। ऊपरी श्रृंगित परतों में मेलेनिन का काफी स्तर भी देखा गया था। दूसरी ओर, पेप्टाइड मिश्रण के साथ इलाज किए गए ऊतकों में मेलानोसाइट्स की मेलेनिन सामग्री कम थी, और नियंत्रण समूह (छवि 6C) की तुलना में केराटिनोसाइट्स और कॉर्निफाइड परतों में मेलेनिन सामग्री में उल्लेखनीय कमी देखी गई थी।

इन परिणामों ने त्वचा के समकक्षों पर पेप्टाइड मिश्रण के एक महत्वपूर्ण एंटी-पिगमेंटेशन प्रभाव की पुष्टि की।

बहस

व्हाइटनिंग सामग्री के विकास को मुख्य रूप से मेलेनोजेनेसिस से संबंधित कारकों [31-35] के नियमन के माध्यम से मेलानोसाइट्स में मेलानोजेनेसिस को रोकने के लिए लक्षित किया गया है। हाल ही में, अपचयन के अन्य लक्ष्यों, मेलेनोसोम प्रवासन, स्थानांतरण और गिरावट सहित, का अध्ययन किया गया है और कई एजेंटों की पहचान की गई है [36-42]। क्योंकि रंजकता एक क्रिया है जिसमें कई तंत्र शामिल होते हैं, यह चिकित्सीय एजेंटों के संयोजन का उपयोग करने के लिए कुशल हो सकता है जिनके प्रत्येक लक्ष्य के लिए विनियामक प्रभाव होते हैं।

इस अध्ययन ने एक पेप्टाइड मिश्रण की सफेदी गतिविधि की जांच की जिसमें समान दाढ़ अनुपात वाले चार अलग-अलग पेप्टाइड थे। मेलेनोसोम बायोजेनेसिस, ट्रांसफर और डिग्रेडेशन के खिलाफ पेप्टाइड मिश्रण के सुझाए गए क्रिया तंत्र को चित्र 7 में चित्रित किया गया है। मेलानोसाइट्स में, पेप्टाइड मिश्रण सीआरईबी फास्फारिलीकरण को रोकता है जिसके परिणामस्वरूप MITF अभिव्यक्ति कम हो जाती है और MITF फास्फोरिलीकरण और प्रोटीसोमल गिरावट में ERK1/2 परिणामों के फास्फोरिलीकरण को प्रेरित करता है। . नतीजतन, टायरोसिनेस, TYRP1, TYRP2, Rab27A, मेलानोफिलिन और MYO5A सहित मेलेनोसोम बायोजेनेसिस और ट्रांसपोर्ट-संबंधित प्रोटीन की अभिव्यक्ति कम हो जाती है। केराटिनोसाइट्स में, पेप्टाइड मिश्रण PAR -2 की अभिव्यक्ति को कम करता है जो एक्टिन फिलामेंट पुनर्गठन के साथ सहसंबद्ध केराटिनोसाइट फैगोसाइटिक क्षमता की मध्यस्थता करता है। इसके अलावा, पेप्टाइड मिश्रण ऑटोफैजिक फ्लक्स को सक्रिय करता है, और स्थानांतरित मेलानोसोम्स को ऑटोफैगोलिसोसम में नीचा दिखाया जाता है।

पेप्टाइड्स की उनकी उच्च जैव-अनुकूलता और प्रोटीन-नकल गतिविधि [43] के कारण सौंदर्य प्रसाधनों के लिए सक्रिय अवयवों के रूप में बड़े पैमाने पर जांच की गई है। लेकिन उनमें कुछ नुकसान भी हैं कि वे त्वचा में मौजूद प्रोटीज द्वारा आसानी से ख़राब हो सकते हैं और अपनी हाइड्रोफिलिसिटी [44] के कारण लिपिड से बनी एपिडर्मिस में आसानी से प्रवेश नहीं कर सकते हैं। पेप्टाइड स्थिरता को बढ़ाने के लिए किए गए अध्ययनों ने पूर्वानुमानित दरार स्थलों पर अमीनो एसिड को प्रतिस्थापित करने, एन टर्मिनल के एसिटिलेशन और सी टर्मिनल [45] के संशोधन के तरीकों का सुझाव दिया है। इसके अलावा, पेप्टाइड्स के ट्रांसडर्मल पैठ में सुधार के लिए कई अध्ययन हैं: अल्कोहल, एज़ोन, हेक्सानोएट्स और असंतृप्त फैटी एसिड जैसे प्रवेश प्रेरकों के उपयोग से जुड़े तरीके; विशिष्ट पेप्टाइड अनुक्रमों के उपयोग से जुड़े तरीके जो पारगमन की सुविधा प्रदान करते हैं; लिपोफिलिक डेरिवेटिव के संयोजन के तरीके; और लिपोसोम्स, ट्रांसफ़र्सोम्स, निओसोम्स और एथोसोम्स [46-48] जैसे पेप्टाइड्स को एनकैप्सुलेट करने के तरीके। इस संबंध में, हमने सामयिक उपचार द्वारा त्वचा के समतुल्य मॉडल में इसके सफेदी प्रभाव का परीक्षण करने के लिए पेप्टाइड मिश्रण को घेरते हुए लिपोसोम तैयार किया, और एपिडर्मल परतों में मेलेनिन सामग्री की एक महत्वपूर्ण कमी परीक्षण लिपोसोम उपचार समूह (चित्र। 6C) में दिखाई गई।

अंत में, इस अध्ययन के पेप्टाइड मिश्रण ने विभिन्न क्रियाओं के माध्यम से एक श्वेत प्रभाव प्रदर्शित किया, जिसमें मेलेनिन संश्लेषण और प्रवासन के साथ-साथ केराटिनोसाइट्स के मेलेनोसोम अपटेक को रोकना और मेलेनोसोम गिरावट को बढ़ावा देना शामिल है। इस अध्ययन के पेप्टाइड मिश्रण को एक नई सफेदी सामग्री के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है और लिपोसोम जो पेप्टाइड्स की स्थिरता और त्वचा में प्रवेश की सुविधा प्रदान करता है, का उपयोग प्रभावी सफेदी उत्पादों को विकसित करने के लिए किया जा सकता है।

आभार

यह अध्ययन व्यापार, उद्योग और ऊर्जा मंत्रालय (परियोजना संख्या: S2641452) द्वारा वर्ल्ड क्लास 300 R&D प्रोजेक्ट के सहयोग से आयोजित किया गया था।

हितों का टकराव

लेखक किसी प्रकार के हित संघर्ष की घोषणा नहीं करते।

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