सिस्टैंच डेजर्टिकोला से एक मन्नोग्लुकन के रासायनिक गुण

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1. सामग्री

दो अलग-अलग निर्माताओं के घोड़ों के लिए ओरल पेस्ट का इस्तेमाल क्रमशः 10 मिलीग्राम/जी (ए) या 20 मिलीग्राम/जी (बी) आइवरमेक्टिन युक्त किया गया था। Ivermectin के लिए मात्रात्मक परख की गई थी और सामग्री घोषित एकाग्रता का 104.4-107.7 प्रतिशत थी।

2. विघटन परीक्षण

परीक्षण पीएचडी यूरो के साथ किया गया था। पैडल उपकरण (फार्मा टेस्ट, हाइनबर्ग, जर्मनी), 75 आरपीएम या 50 आरपीएम के आंदोलन पर, 37 -0.5 सी. सोडियम लॉरिल सल्फेट (बीडीएच केमिकल्स, पूल, इंग्लैंड) 0.5 प्रतिशत (डब्ल्यू) / v) जलीय घोल का उपयोग विघटन माध्यम (900 मिली) के रूप में किया गया था। पेस्ट (ए या 2 जी बी का 4 ग्राम) को कैनुला (ए) के साथ एक सिरिंज के साथ बर्तन में रखा गया था या नमूना को विघटन माध्यम (बी) की सतह पर गिरा दिया गया था। समय अंतराल (15, 30, 45, 60 मिनट और 2 घंटे) के बाद, विघटन माध्यम का एक नमूना (2 मिली) निकाल लिया गया, एक ग्लास फिल्टर के माध्यम से फ़िल्टर किया गया, और विश्लेषण किया गया।

3. एचपीएलसी विश्लेषण

Ivermectin का निर्धारण Ph. Eur में वर्णित संशोधित HPLC पद्धति से किया गया था। विश्लेषण किए गए समाधान मेथनॉल (1:10) से पतला थे। एचपीएलसी प्रणाली में एक ऑक्टाडेसिल कॉलम (250 -4 मिमी; 5 मिमी; लिक्रोस्फेर आरपी -18; मर्क), एक इंटीग्रेटर डी -12500 ए, एक डिटेक्टर यूवी-विज़ एल {{7} शामिल था। }, पंप एल-6200ए (मर्क-हिताची, डार्मस्टाड, जर्मनी)। एसीटोनिट्राइल का मिश्रण: मेथनॉल: पानी (64:24:16) का उपयोग मोबाइल चरण के रूप में 1.9 मिली/मिनट की प्रवाह दर के साथ किया गया था। इंजेक्ट किए गए नमूने की मात्रा 20 मिली थी और 254 एनएम पर पता लगाया गया था।

4. घुलनशीलता अध्ययन

पदार्थ की पहुंच को कसकर बंद कांच के फ्लास्क में एक उपयुक्त विलायक (तालिका 1) के साथ 37 0.1 सी. पर 20 घंटे के लिए हिलाया गया था। निलंबन को फ़िल्टर किया गया था और मेथनॉल में कमजोर पड़ने के बाद छानना, एचपीएलसी द्वारा विश्लेषण किया गया था। .

5. अम्लीय घोल में स्थिरता

एचसीएल {0}} में आईवरमेक्टिन के समाधान 20 सी और 37 सी पर कसकर बंद कांच की शीशियों में संग्रहित किया गया था। समाधान के क्रोमैटोग्राम टी 0 पर और 1, 2 और 6 घंटे के बाद दर्ज किए गए थे। आइवरमेक्टिन के क्षेत्र (अवधारण समय 10.5 मिनट) और अतिरिक्त चोटियों की गणना की गई।

संदर्भ

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जियांग मेई वू, पेंगफेई तू 13 फरवरी, 2004 को प्राप्त हुआ, 4 अप्रैल 2004 को स्वीकार किया गया, प्रो। डॉ। पेंगफेई तू, पारंपरिक चीनी चिकित्सा के लिए आधुनिक अनुसंधान केंद्र, फार्मास्युटिकल साइंसेज स्कूल, पेकिंग यूनिवर्सिटी हेल्थ साइंस सेंटर, नंबर 38, ज़ुयुआन रोड , हैडियन जिला, बीजिंग 100083, चीन Pengfeitu@bjmu.edu.cn फार्माज़ी 59: 815-816 (2004)

से एक नया मैन्नोग्लुकनसिस्टांचे डेजर्टिकोलाचीन से विशेषता है। यौगिक माइटोजेन-प्रेरित टी और बी लिम्फोसाइट प्रसार के हल्के उत्तेजना के लिए जिम्मेदार है।

सिस्टांचे डेजर्टिकोलावाईसी मा एक होलोपैरासाइट है जो द्विबीजपत्री पौधे हेलोक्सिलॉन एमोडेंड्रोन बंज की जड़ों पर उगता है जो चीन के उत्तर-पश्चिम में व्यापक रूप से वितरित किया जाता है। चूंकि यह प्राच्य चिकित्सा में एक महत्वपूर्ण टॉनिक है, इसलिए कई सक्रिय घटकों और औषधीय गतिविधियों का दावा किया गया है (करसावा एट अल। 1986; योशिजावा एट अल। 1990)। ये गुण के कुछ पॉलीसेकेराइड घटकों से जुड़े हो सकते हैंसिस्टांचेजिनकी अभी तक जांच नहीं हुई है। मिटोजेनिक पेक्टिक पॉलीसेकेराइड और तटस्थ पॉलीसेकेराइड को अलग किया गया है और इसकी विशेषता हैसिस्टांचे डेजर्टिकोलामंगोलिया से (रडना एट अल। 1996; अन्ना एट अल। 1997; बोजेना एट अल। 1999)। यहां हम एक नए मैन्नोग्लुकन के रासायनिक गुणों की रिपोर्ट करते हैंसिस्टांचे डेजर्टिकोलाचीन से, जो माइटोजेन-प्रेरित टी और बी लिम्फोसाइट प्रसार के हल्के उत्तेजना के लिए जिम्मेदार है। के तनों के बादसिस्टांचे डेजर्टिकोलाYC Ma को 95 प्रतिशत इथेनॉल के साथ निकाला गया था, अवशेषों को निकालने के लिए ठंडे आसुत जल का उपयोग किया गया था। ठंडे पानी के अर्क को EtOH के साथ अवक्षेपित किया गया था, कच्चे पॉलीसेकेराइड CCDP प्राप्त करते हुए, प्रोटीन को हटा दिया गया और डायलाइज़ किया गया। कच्चे पॉलीसेकेराइड को एक डीईएई कॉलम और एक सेफैडेक्स जी -150 कॉलम पर प्रोटीन-मुक्त पॉलीसेकेराइड (सीडीपी -6) को वहन करने के लिए विभाजित किया गया था, जिसमें ग्लूकोज (89.2 प्रतिशत) और मैनोस (1 {{58}) शामिल थे। }.4 प्रतिशत), और जिनमें से औसत श्रीमान 6.8 -104 होने का अनुमान लगाया गया था। पॉलीसेकेराइड सीडीपी -6 ने दिखाया [एक 20 डी 42 (सी 1, एच2ओ)। शर्करा का पूर्ण विन्यास टीएमएस (- )-2-ब्यूटाइल ग्लाइकोसाइड के जीसी द्वारा निर्धारित किया गया था। सीडीपी -6 को मिथाइलेटेड (नीड्स एट अल। 1993), हाइड्रोलाइज्ड, एल्डिटोल एसीटेट में परिवर्तित किया गया, और जीसी और जीसी-एमएस (तालिका) द्वारा विश्लेषण किया गया। मिथाइलेशन विश्लेषण से मोलर अनुपात डेटा के साथ इस परिणाम ने सुझाव दिया कि सीडीपी -6 में मुख्य रूप से 1, 6- जुड़ा हुआ Glcp और एक बैकबोन 1, 6- है, जो O {{{{{{{{} 24}} मैनोज का। आंशिक हाइड्रोलिसिस से दो पॉलिमर (CDP-6-1, CDP-6-2) के मिथाइलेशन विश्लेषण ने पुष्टि की कि CDP-6 में 1,6-जुड़े ग्लूकोसाइल अवशेष और एक रीढ़ की हड्डी होती है। 1,6-लिंक किए गए मैनोसिल अवशेष, जो ओ -3 मैनोस के टर्मिनल से युक्त शाखाओं द्वारा प्रतिस्थापित किए जाते हैं, 1,6- जुड़े ग्लूकोसाइल अवशेष, और 1,3,{{38} } जुड़े हुए मैनोसिल अवशेष। दाढ़ अनुपात और साहित्य (बोजेना एट अल। 1999; बेकन एट अल। 1996) के अनुसार, सीडीपी के 13 सी एनएमआर स्पेक्ट्रम -6 ने ए-डी-जीएलसीपी (सी {{45) के विसंगतिपूर्ण कार्बन के कारण संकेत दिखाए। }} 98.4 पीपीएम पर), बीडी-मैप (सी-1 104.3-104.9 पीपीएम पर) और विज्ञापन-मैप (सी-1 100.0 पीपीएम)। D2O में CDP -6-2 के 1 H NMR स्पेक्ट्रम ने विज्ञापन-Glcp (H -1 4.94–4.95 ppm पर) और a- d-Map (H -1 के अनुरूप प्रोटॉन सिग्नल दिखाए। 4.96-5.00 पीपीएम)। D2O में CDP -6-2 के 13C NMR स्पेक्ट्रम ने aD-Glcp (C -1 98.6 ppm पर) और एड-मैप (C -1 98.4ppm पर) के अनुरूप प्रोटॉन सिग्नल दिखाए। माना जाता है कि मैन्नोग्लुकेन्स में 1,4-लिंक्ड ग्लूकोपाइरानन और 1,4-लिंक्ड मैनोपाइरानन बैकबोन (रद्जाबी नसाब एट अल। 1984; तानाबे एट अल। 2000) है। CDP-6 में इसकी a-1,6-लिंक्ड Glcp और b-1,6-लिंक्ड मैप बैकबोन द्वारा कुछ अलग संरचनात्मक विशेषताएं हैं, और इसे mannoglucan शाखाओं द्वारा प्रतिस्थापित किया गया है। (अंजीर।)। के उपयोग की जांच करने के लिएसिस्टांचे डेजर्टिकोलालोक चिकित्सा में, टी और बी सेल सिस्टम पर सीडीपी-6 के प्रभाव का मूल्यांकन किया गया था। यह माइटोजेन-प्रेरित टी और बी लिम्फोसाइट प्रसार को हल्के ढंग से उत्तेजित करने के लिए पाया गया था।

प्रयोगात्मक

1. सामान्य प्रक्रियाएं

ऑप्टिकल घुमाव को W22-1S स्वचालित ध्रुवतामापी से मापा गया। IR स्पेक्ट्रा को पर्किन-एल्मर 599B स्पेक्ट्रोमीटर पर निर्धारित किया गया था। GC विश्लेषण एक FID डिटेक्टर से लैस Agilent HP6890N उपकरण पर किया गया था। GC-MS को Finnigan Trace GC-MS इंस्ट्रूमेंट पर किया गया था। एकरूपता और सीडीपी के श्रीमान -6 का अनुमान मानक डेक्सट्रांस के रेफरेंस वॉल्यूम के अंशांकन वक्र से लगाया गया था, जिसे पर किया गया था

शोडेक्स केएस के साथ एक एगिलेंट 1100 श्रृंखला उपकरण-805 कॉलम.1 एच एनएमआर और 13सी एनएमआर स्पेक्ट्रा एक इनोवा-500 उपकरण के साथ रिकॉर्ड किए गए थे। ब्रैडफोर्ड (आंद्रे एट अल। 1975) की विधि द्वारा प्रोटीन सामग्री का विश्लेषण किया गया था। मोनोसेकेराइड का विश्लेषण उनके एल्डिटोल एसीटेट के रूप में किया गया था जब वे हाइड्रोलाइज्ड (2 एम टीएफए, 2 एच, 110 सी), कम और एसीटेट हो गए थे। BuOH-EtOAc-isopropyl अल्कोहल-HOAC––H2Opyridine (3.5: 10: 6: 3.5: 3: 3) में 5 प्रतिशत सोडियम डाइहाइड्रोजन फॉस्फेट युक्त सिलिका जेल प्लेट पर TLC का उपयोग करके हाइड्रोलाइज़ेट्स का विश्लेषण किया गया था और ऑरसिनॉल के साथ छिड़काव करके शर्करा का पता लगाया गया था। -H2SO4। परिणामी एल्डिटोल एसीटेट का विश्लेषण जीएलसी द्वारा एक एचपी -5 केशिका स्तंभ (30 मीटर 0.32 मिमी) का उपयोग करके किया गया था। सीडीपी -6 को सियुकानू विधि द्वारा मिथाइललेट किया गया था, इसके बाद हाइड्रोलिसिस किया गया था, और जीसी-एमएस द्वारा आंशिक रूप से मिथाइलेटेड एल्डिटोल एसीटेट के रूप में विश्लेषण किया गया था। आंशिक हाइड्रोलिसिस के बाद, उत्पादों को दो पॉलिमर, CDP-6-1 और CDP-6-2 प्राप्त करते हुए, डायलाइज़ किया गया और अलग किया गया।

2. संयंत्र सामग्री

संयंत्र अगस्त 2001 में चीन में इनर मंगोलिया प्रांत से एकत्र किया गया था और हू-बियाओ चेन, प्राकृतिक चिकित्सा विभाग, फार्मास्युटिकल साइंसेज स्कूल, पेकिंग यूनिवर्सिटी हेल्थ साइंस सेंटर द्वारा पहचाना गया था। इस संयंत्र का एक वाउचर नमूना [ई-1-(9)] स्कूल ऑफ फार्मास्युटिकल साइंसेज, पेकिंग विश्वविद्यालय में जमा किया गया था। 3. पॉलीसेकेराइड सीडीपी का निष्कर्षण, अलगाव और शुद्धिकरण -6 का तनासिस्टांचे डेजर्टिकोलाYC Ma (1500 g) को रिफ्लक्स के तहत 95 प्रतिशत इथेनॉल (6 L) के साथ निकाला गया। सूखे इथेनॉल-अघुलनशील अवशेषों को प्रति 12 घंटे ठंडे आसुत जल के साथ तीन बार मैकरेट किया गया था। ठंडे पानी के अर्क को छान लिया गया और छानना सेंट्रीफ्यूज किया गया। EtOH के चार संस्करणों के साथ वर्षा के बाद (4 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए हलचल और खड़े), अवक्षेप उत्पाद (35.5 ग्राम) प्राप्त किया गया था। अवक्षेप में मौजूद प्रोटीन को सैवेज विधि द्वारा निकाला गया। आसुत जल में घुलने के बाद, अवशेष (25.5 ग्राम) को डायलाइज़ किया गया और लियोफिलाइज़ किया गया (उपज: 10.6 ग्राम)। कच्चे पॉलीसेकेराइड (8 ग्राम) को आसुत जल (100 एमएल, 8 प्रतिशत डब्ल्यू/वी) में भंग कर दिया गया था और एक डीईएई कॉलम ({16}} सेमी, 0-2 एम NaCl की ढाल, प्रति 1.5 एल) का उपयोग करके अलग किया गया था। एक पानी से सना हुआ अंश (600 मिलीग्राम) प्राप्त किया गया था। एक नमूना (250 मिलीग्राम) कॉलम जेल-पारगम्य क्रोमैटोग्राफी द्वारा एक सेफैडेक्स जी - 150 कॉलम (4 - 80 सेमी, 1600 एमएल, 5 एमएल प्रति अंश) पर शुद्ध किया गया था। सीडीपी -6 (1500-1600 एमएल) के अंशों को जमा, डायलिज्ड और फ्रीज-ड्राय किया गया। Sephadex G-25 (60 1 cm) से नमक रहित होने के बाद। सीडीपी -6 (110 मिलीग्राम) एचपीएसजीसी द्वारा एकल शिखर के रूप में प्राप्त और निर्धारित किया गया था।

स्वीकृति:लेखक डॉ. बाओमी शाओ और प्रो. श्याओमिंग गाओ, स्कूल ऑफ बेसिक मेडिकल साइंसेज, पेकिंग यूनिवर्सिटी हेल्थ साइंस सेंटर को सीडीपी की इम्युनोमोड्यूलेटिंग गतिविधि को मापने के लिए धन्यवाद देते हैं-6।