Alox15 को हटाने से किडनी की खराबी में सुधार होता है और किडनी में PGD2 बढ़ने से फाइब्रोसिस को रोकता है
Mar 12, 2022
सिस्टैंच से किडनी/गुर्दे के संक्रमण में सुधार होगा
परिचय
पॉलीअनसेचुरेटेड फैटी एसिड (PUFA) और उनके मेटाबोलाइट्स कई अंगों में सूजन और इसके समाधान से जुड़े होते हैं [1]। ऑक्सीलिपिन, जो पीयूएफए के ऑक्सीकरण द्वारा निर्मित होते हैं, पीयूएफए की जैविक गतिविधि के लिए लिपिड मध्यस्थों के रूप में महत्वपूर्ण है [1, 2]। ऑक्सीलिपिन के जैवसंश्लेषण की मध्यस्थता कई एंजाइमों द्वारा की जाती है, जैसे कि लिपोक्सिजिनेज (LOX), साइक्लोऑक्सीजिनेज (COX), और साइटोक्रोम P450 (CYP) [3]। ये एंजाइम कई लिपिड मेटाबोलाइट्स का उत्पादन करते हैं, जैसे कि प्रोस्टाग्लैंडीन, ल्यूकोट्रिएन और लिपोक्सिन, जो सभी सूजन के नियमन में भारी रूप से शामिल होते हैं [1, 4]। उदाहरण के लिए, ALOX15, LOX का एक प्रमुख उपप्रकार है, इसके मेटाबोलाइट्स [5] के माध्यम से प्रिनफ्लेमेटरी और एंटी-इंफ्लेमेटरी गुणों का एक दोहरा पहलू है: ALOX15 गैर-पैथोलॉजिकल परिस्थितियों में ईोसिनोफिल्स, ब्रोन्कोएलेवोलर एपिथेलियल कोशिकाओं और वायुकोशीय मैक्रोफेज में अत्यधिक व्यक्त किया जाता है [5, 6 ], और अस्थमा [7], फेफड़ों की चोट [8], और दिल की विफलता [9] की गंभीरता को बढ़ावा देता है, जबकि यह गठिया [10] और इस्केमिक मस्तिष्क [11] में सूजन का प्रतिकार करता है। इसके अतिरिक्त, लिपिड मध्यस्थ और उनके एंजाइम अंग फाइब्रोसिस के साथ-साथ सूजन को भी प्रभावित करते हैं। विशिष्ट लिपिड मध्यस्थ फेफड़े [12], यकृत [13] और हृदय [14] फाइब्रोसिस के रोगजनन में शामिल होते हैं। इसी तरह, उपर्युक्त ALOX15 भी फाइब्रोसिस के रोगजनन से जुड़ा हुआ है जैसे कि त्वचीय फाइब्रोसिस [15]।
आम पुरानी बीमारियों में से एक पुरानी है गुर्दे की बीमारी(सीकेडी), जो संयुक्त रूप से सभी चरणों में सामान्य आबादी के लगभग 8-16 प्रतिशत को प्रभावित करता है [16]। हालांकि सीकेडी रोगजनन जटिल है और अंतर्निहित बीमारी के आधार पर भिन्न होता है,गुर्दाऊतक आम तौर पर निष्क्रिय हो जाता है, जिससे अंत-चरण होता हैवृक्कीय विफलतापुरानी सूजन और बाद में फाइब्रोसिस [17] के कारण। जैसा कि उल्लेख किया गया है, पीयूएफए से प्राप्त लिपिड मध्यस्थ दृढ़ता से सूजन और इसके परिणामस्वरूप फाइब्रोसिस से जुड़े होते हैं। उदाहरण के लिए, लिपोक्सिन और रेसोल्विन गुर्दे की फाइब्रोसिस [18, 19] को रोकते हैं, लेकिन इन प्रभावों की अभी तक सीकेडी मॉडल में जांच नहीं की गई है।गुर्दा कार्य।इसके अलावा, सीकेडी . में व्यापक लिपिडोमिक प्रोफाइलगुर्दाऊतक अभी भी असूचित हैं। इस प्रकार, सीकेडी रोगजनन में लिपिड चयापचय एंजाइमों और उनके उत्पादों की भूमिका को खराब समझा गया हैइस अध्ययन का उद्देश्य फैटी एसिड मेटाबोलाइजिंग एंजाइम और उनके उत्पादों की भागीदारी को स्पष्ट करना हैगुर्दे5/6 नेफ्रक्टोमाइज्ड (एनएक्स) सीकेडी मॉडल चूहों की हानि। इस अध्ययन से पता चला है कि CKD . में Alox15 के ट्रांसक्रिप्शन और प्रोटीन अभिव्यक्ति दोनों स्तरों में वृद्धि हुई थीगुर्दे, और Alox15 - / - चूहों ने बेहतर प्रदर्शन कियागुर्दासीकेडी मॉडल में शिथिलता और फाइब्रोसिस। इसके अलावा, PGD2, जो CKD . में बढ़ा हुआ लिपिड मेटाबोलाइट हैगुर्देAlox15 - / - चूहों की, समीपस्थ ट्यूबलर संवर्धित कोशिकाओं में उपकला-मेसेनकाइमल संक्रमण (EMT) को बाधित किया। इसलिए, Alox15 निषेध और / या PGD2 प्रशासन CKD और फाइब्रोसिस का एक उपन्यास चिकित्सीय लक्ष्य हो सकता है।
कीवर्ड:गुर्दे की पुरानी बीमारी; लिपोक्सीजेनेस; ALOX15; मध्यस्थ लिपिडोमिक्स; पॉलीअनसेचुरेटेड फैटी एसिड; गुर्दे
सिस्टैंच से किडनी/गुर्दे की कार्यक्षमता में सुधार होगा
सामग्री और तरीके
पशु और प्रयोगइस अध्ययन में 8-सप्ताह के पुरुष C57BL/6 J चूहों (CLEA जापान) का इस्तेमाल किया गया था, जिन्हें सभी प्रयोग किए जाने से पहले 1 सप्ताह के लिए अनुकूलित किया गया था। इसके अलावा, Alox15 - / - चूहों को C57BL/6 J बैकग्राउंड (जैक्सन लेबोरेटरी) में उत्पन्न किया गया था, और 5/6 Nx मॉडल को पिछले अध्ययन [20] के अनुसार स्थापित किया गया था। हमने के मूल्यांकन के लिए रक्त के नमूने एकत्र किएगुर्दे समारोहतथागुर्दा5/6 एनएक्स के बाद 8 सप्ताह में इम्युनोब्लॉटिंग और पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन के लिए ऊतक के नमूने, और 5/6 एनएक्स के बाद 40 सप्ताह में हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण के लिए। सभी प्रयोग TMDU के पशु अनुसंधान के दिशा-निर्देशों के अनुरूप हैं, और TMDU की पशु देखभाल और उपयोग समिति ने हमारे अध्ययन प्रोटोकॉल (अनुमोदन संख्या: A2019-117C4) को मंजूरी दी।
एलसी-एमएस/एमएस-आधारित मध्यस्थ लिपिडोमिक्सहमने पहले [21, 22] बताए अनुसार एलसी-एमएस/एमएस विश्लेषण किया। प्रक्रिया का विवरण अनुपूरक विधियों में वर्णित है,अन्य प्रायोगिक तरीकेहमने अनुपूरक विधियों में अन्य प्रायोगिक विधियों का वर्णन किया है।
परिणाम
5/6 Nx किडनी में Alox15 का mRNA स्तर बढ़ गया हैसीकेडी . में ऑक्सीलिपिन एंजाइमों के मात्रात्मक परिवर्तनगुर्दाC57BL / 6 चूहों को शम ऑपरेशन या 5/6 Nx के रूप में पहले [20] में लागू करके जांच की गई थी। गुर्दे में व्यक्त प्रमुख ऑक्सीलिपिन एंजाइमों की अभिव्यक्ति का विश्लेषण करने के लिए (Alox15, Alox5, Ptgs1 (COX1), Ptgs2 (COX2), Cyp4a12 और Cyp2c44) [23, 24], हमने निकालागुर्दानमूने। एंजाइमों में, Alox15 5/6 Nx . मेंगुर्देशम . की तुलना में काफी ऊंचा एमआरएनए स्तर (पी=0.0004) थागुर्दे(चित्र एक)। इसके विपरीत, इस CKD मॉडल में अन्य प्रमुख एंजाइमों के mRNA स्तर में महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं हुआ।
वृक्क समीपस्थ ट्यूबलर कोशिकाओं में Alox15 के प्रोटीन स्तर में वृद्धि हुई थी5/6 एनएक्स . मेंगुर्दे, ALOX15 प्रोटीन के स्तर में भी वृद्धि हुई थी (P=0.0078), जैसा कि ट्रांसक्रिप्शनल स्तर (छवि 2a) में वृद्धि से अपेक्षित था। यह निर्धारित करने के लिए कि CKD . में किस प्रकार की कोशिका ने Alox15 प्रोटीन स्तर में वृद्धि की थीगुर्दा,हमने स्वस्थानी संकरण द्वारा Alox15 mRNA के स्थानीयकरण की जांच की। mRNA के स्वस्थानी संकरण में पता चला कि Alox15 का उच्च अभिव्यक्ति स्तर पर स्थानीयकृत थागुर्दे5/6 एनएक्स मॉडल में ट्यूबलर कोशिकाएं, लेकिन ग्लोमेरुली (छवि 2 बी) में नहीं। हिस्टोलॉजिकल विशेषताओं ने सुझाव दिया कि समीपस्थ नलिकाओं में Alox15 mRNA दृढ़ता से व्यक्त किया गया था।
5/6 Nx मॉडल . में Alox15 -/− चूहे गुर्दे की क्षति और फाइब्रोसिस के प्रतिरोधी थे5/6 एनएक्स सीकेडी . मेंगुर्दे, ALOX15 के ट्रांसक्रिप्शनल और प्रोटीन अभिव्यक्ति का स्तर ऊंचा हो गया था। इसलिए, हमने जांच की कि क्या और कैसे ALOX15 सीकेडी में भूमिका निभाता हैगुर्दाशिथिलता और गुर्दे की फाइब्रोसिस। इस प्रयोजन के लिए, 5/6 Nx CKD मॉडल पर Alox15 -/− चूहों को लागू किया गया था। दिलचस्प बात यह है कि Alox15 -/− 5/6 Nx चूहों में सीरम Cre और रक्त यूरिया नाइट्रोजन (BUN) का स्तर कम था।
जंगली-प्रकार (डब्ल्यूटी) चूहों (छवि 3 ए) की तुलना में, यह दर्शाता है कि एलॉक्स 15 की कमी ने सीकेडी रोगजनन में एक सुरक्षात्मक प्रभाव दिखाया। तदनुसार, एनजीएएल (एगुर्दे की क्षतिमार्कर) प्रोटीन की अभिव्यक्ति को WT चूहों (छवि 3 बी) की तुलना में Alox15 - / - चूहों में दबा दिया गया था। इसके अलावा, Alox15−/− माउसगुर्देने Col1a1, Fn और Acta2 (SMA) mRNA स्तर (छवि 3c) को कम दिखाया, और फ़ाइब्रोनेक्टिन और SMA प्रोटीन अभिव्यक्ति (छवि 3 डी) में कमी भी दिखाई। इसके अलावा, Alox15−/− माउसगुर्देमेसन के ट्राइक्रोम धुंधला (चित्र 3e) में दिखाए गए स्पष्ट रूप से दबाए गए अंतरालीय फाइब्रोटिक परिवर्तनों को प्रदर्शित किया। इसलिए, Alox15 विलोपन में सुधार करता हैगुर्दासीकेडी पशु मॉडल में शिथिलता और फाइब्रोसिस।
मध्यस्थ लिपिडोमिक्स ने Alox15 - / - CKD किडनी में परिवर्तित PUFA चयापचय का खुलासा कियाजैसा कि इस पत्र के परिचय खंड में उल्लेख किया गया है, Alox15 के जैविक प्रभाव Alox15 द्वारा उत्पन्न लिपिड मध्यस्थों से संबंधित हैं। CKD में Alox15 द्वारा उत्पादित लिपिड मेटाबोलाइट्स की रूपरेखा को स्पष्ट करने के लिएगुर्दा,हमने जांच की और दिखावा और 5/6 Nx . की तुलना कीगुर्दाWT चूहों और Alox15 - / - CKD चूहों (पूरक तालिका 1) के बीच लिपिड मध्यस्थ प्रोफाइल का निर्धारण करने के लिए LC-MS / MS-आधारित मध्यस्थ लिपिडोमिक्स द्वारा नमूने। तालिका 1 में लिपिड मेटाबोलाइट्स दिखाए गए हैं जो 5/6 Nx स्थिति के तहत Alox15 plus / plus और Alox15 - / - चूहों के बीच काफी भिन्न थे। इसके अलावा, हमने लिपिड मध्यस्थों के उनके सबस्ट्रेट्स और उनके मेटाबोलाइजिंग एंजाइम (छवि 4) द्वारा वर्गीकरण के साथ मार्ग मानचित्र बनाए। Alox 15- व्युत्पन्न PUFA मेटाबोलाइट्स की एक श्रृंखला जैसे 14-HDoHE, 17-HDoHE, और 15-HEPA [5, 25-27] सीकेडी मॉडल में काफी वृद्धि हुई थी जो सहसंबद्ध थे। अच्छी तरह से ALOX15 अभिव्यक्ति के बढ़े हुए स्तर के लिएगुर्दे (P=0.0018, 0.0008,<0.0001, respectively),="" and="" their="" elevations="" under="" ckd="" conditions="" were="" completely="" suppressed="" in="" alox15−/−="" mice="" (fig. 5).="" besides="" 14-hdohe,="" 17-hdohe,="" and="" 15-hepa,="" the="" levels="" of="" 18-hepa,="" 10-hdohe,="" 11-hdohe,="" 13-hdohe,="" 16-hdohe,="" and="" dgla="" were="" also="" significantly="" decreased="" in="" alox15−/−="" ckd="">गुर्देWT CKD किडनी की तुलना में, जबकि Alox15 - / - CKD किडनी (चित्र 6) में केवल PGD2 में काफी वृद्धि हुई थी।
PGD2 ने संवर्धित किडनी कोशिकाओं में EMT को दबा दियालिपिड मेटाबोलाइट्स के प्रभाव जो Alox15 plus / plus और Alox15 - / - चूहों के बीच 5/6 Nx स्थिति में काफी भिन्न थे, इन लिपिड को NRK -52 E कोशिकाओं को प्रशासित करके जांचा गया था जो प्रो-फाइब्रोटिक साइटोकाइन TGF द्वारा सक्रिय थे। - 1. हमने संस्कृति में इन लिपिडों के प्रभावों को निर्धारित करने के लिए TGF - 1 के जवाब में Cola1a और Acta2 (SMA) की mRNA अभिव्यक्ति का आकलन किया (चित्र 7a)। उनमें से, PGD2 ने TGF- 1 के जवाब में NRK-52E कोशिकाओं पर एक शक्तिशाली एंटीफिब्रोटिक प्रभाव प्रदान किया। COL1A1 और SMA अभिव्यक्ति पर PGD2 का दमनात्मक प्रभाव क्रमशः 7.12 μM और 6.48 μM के EC50 के साथ खुराक पर निर्भर था (चित्र 7b)। इसके अतिरिक्त, हमने एचके -2 कोशिकाओं में वही प्रयोग किए, जो सामान्य वयस्क मानव से अमर समीपस्थ नलिका उपकला कोशिकाएं हैं।गुर्दे,और PGD2 (छवि 7c) के साथ उपचार के जवाब में, एक समान परिणाम, अर्थात् COL1A1 और एक खुराक पर निर्भर तरीके से SMA निषेध पाया गया। इसलिए, Alox15 -/- CKD . में PGD2 का बढ़ा हुआ स्तरगुर्देसीकेडी में एंटीफिब्रोटिक प्रभाव में योगदान कर सकते हैं।
सिस्टैन्च से किडनी/गुर्दे के दर्द में सुधार होगा
15-PGDH, एक प्रमुख PGD2-मेटाबोलाइज़िंग एंजाइम, Alox15 -/- CKD किडनी में कम हो गया थामें PGD2 में वृद्धि के तंत्र को स्पष्ट करने के लिएगुर्देAlox15 - / - CKD मॉडल चूहों में, हमने PGD2 सिंथेज़ के mRNA स्तर को मापा। PGD2 सिंथेज़ (PGDS) में दो आइसोफोर्म होते हैं: लिपोकेलिन PGDS (L-PGDS) और हेमटोपोइएटिक PGDS (H-PGDS) [28]। एल-पीजीडीएस और एच-पीजीडीएस दोनों स्तरों में 5/6 एनएक्स स्थितियों के तहत काफी वृद्धि हुई थी, जब उनकी तुलना में नकली परिस्थितियों में की गई थी।गुर्देWT चूहों की (चित्र। 8a, दोनों P<0.0001) indicating="" that="" increased="" pgd2="" in="" ckd="" is="" due="" to="" increased="" pgd2="" synthases.="" conversely,="" the="" increase="" in="" l-pgds="" and="" h-pgds="" under="" 5/6="" nx="" conditions="" was="" significantly="" inhibited="" in="" alox15−/−="" mice="" (fig. 8a)="" indicating="" that="" the="" increase="" in="" pgd2="" in="" alox15−/−="" ckd="" model="" mice="" was="" not="" due="" to="" increased="" production="" by="" pgds.="" then,="" we="" examined="" mrna="" levels="" of="" cox-1="" and="" cox-2="" as="" more="" upstream="" synthases="" of="" the="" prostaglandin-producing="" pathway.="" we="" also="" measured="" mrna="" levels="" of="" 15-pgdh="" and="">1C18, जिन्हें प्रमुख PGD2-मेटाबोलाइज़िंग एंजाइम [29, 30] के रूप में जाना जाता है। जबकि COX-1, COX-2, और AKR1C18 का mRNA स्तर अपरिवर्तित था, CKD में 15-PGDH का mRNA स्तर काफी कम हो गया था।गुर्देAlox15 - / - चूहों की तुलना में जब WT चूहों (चित्र। 8b, P =0.0325) के साथ तुलना की जाती है, जो संभावित रूप से CKD में PGD2 में वृद्धि की ओर ले जाते हैं।गुर्देAlox15 - / - चूहों का।
बहस
इस अध्ययन से पता चला है कि सीकेडी . मेंगुर्दानमूने, Alox15 के प्रतिलेखन और प्रोटीन दोनों स्तरों में वृद्धि हुई थी, औरगुर्दाAlox15 - / - चूहों में शिथिलता और फाइब्रोसिस को ठीक किया गया। इसके अलावा, LC-MS/MS-आधारित मध्यस्थ लिपिडोमिक्स ने खुलासा किया कि Alox15 -/− CKD माउसगुर्देWT चूहों की तुलना में PGD 2 के स्तर में काफी वृद्धि हुई थी। PGD2 ने NRK-52E और HK-2 कोशिकाओं के EMT को बाधित किया; इसलिए, PGD2 वृद्धि Alox15 - / - चूहों के प्रतिरोध में योगदान कर सकती हैगुर्दे की चोटऔर फाइब्रोसिस। बीच के रिश्तेगुरदे की बीमारीऔर मानव सीरम या प्लाज्मा पर लिपिडोमिक्स का उपयोग करने वाले लिपिड प्रोफाइल की व्यापक जांच की गई है [31-33], लेकिन पर नहींगुर्दाऊतक। इसी तरह, हालांकि सीकेडी पशु मॉडल का उपयोग करने वाले लिपिडोमिक्स पर रिपोर्ट कुछ [34-36] हैं, इन सभी अध्ययनों ने सीकेडी पशु मॉडल से प्लाज्मा नमूनों पर लिपिडोमिक्स का प्रदर्शन किया; हालांकि, कोई व्यापक लिपिडोमिक्स नहीं हैगुर्दासीकेडी मॉडल के ऊतक अभी तक बताए गए हैं। कार्यात्मक मेटाबोलाइट्स की पहचान करने में ऊतक पर प्रत्यक्ष लिपिडोमिक्स, साथ ही प्लाज्मा नमूने भी प्रभावी होते हैं। इसके अलावा, ऊतकों में मेटाबोलाइट परिवर्तन, साथ ही रक्त के नमूने, अंग द्वारा काफी भिन्न होते हैं [20]। वर्तमान अध्ययन में, हमने पीयूएफए-व्युत्पन्न लिपिड मध्यस्थों के प्रोफाइल का अच्छी तरह से विश्लेषण किया हैगुर्दासीकेडी पशु मॉडल के ऊतक।
यह अध्ययन ALOX15 पर केंद्रित है, जो PUFA को मेटाबोलाइज करने वाले प्रमुख एंजाइमों में से एक है। इस अध्ययन में, CKD . में ALOX15 के प्रोटीन और mRNA अभिव्यक्ति स्तर दोनों को स्पष्ट रूप से बढ़ाया गया थागुर्दे. हमने CKD . में ALOX15 अभिव्यक्ति के लिए जिम्मेदार सेल प्रकारों को संबोधित कियागुर्दे,और स्वस्थानी संकरण द्वारा, हमें ALOX15 mRNA की बढ़ी हुई अभिव्यक्ति मिलीगुर्दे5/6 एनएक्स मॉडल में ट्यूबलर कोशिकाएं।
ALOX15 पुरानी बीमारियों में शामिल है, जैसे एथेरोस्क्लेरोसिस, और पशु रोग मॉडल में इसके विलोपन से इन बीमारियों में सुधार होता है [5]। के साथ ALOX15 के जुड़ाव के संबंध मेंगुरदे की बीमारी, स्ट्रेप्टोजोटोकिन-प्रेरित डायबिटिक नेफ्रोपैथी मॉडल [37] द्वारा ग्लोमेरुलर चोट के तहत Alox15 - / - चूहों में प्रोटीनूरिया कम हो जाता है। हालांकि, यह मधुमेह मेलिटस माउस मॉडल में कोई गिरावट नहीं दिखाता हैगुर्दा कार्य; इस प्रकार, तंत्र कैसे ALOX15 बिगड़ा हुआ के साथ जुड़ा हुआ हैगुर्दा कार्यसीकेडी मॉडल में अस्पष्ट बनी हुई है। वर्तमान अध्ययन में, 5/6 Nx माउस मॉडल का उपयोग करते हुए, हमने पाया कि ALOX15 विलोपन में सुधार हुआ हैगुर्दाशिथिलता औरगुर्देसीकेडी मॉडल में फाइब्रोसिस। आज तक, मोनोसाइट्स में केवल IL-4 और IL-13 को नियामक कारक माना जाता है जो सीधे ALOX15 [5] की अभिव्यक्ति को बढ़ाते हैं। हालाँकि, यह स्पष्ट नहीं है कि ALOX15 को क्या बढ़ाता हैगुर्देट्यूबलर कोशिकाएं। सीकेडी [38, 39] में विभिन्न प्रकार के साइटोकिन्स और यूरीमिक विषाक्त पदार्थों को प्लाज्मा और गुर्दे में वृद्धि के लिए जाना जाता है। इनमें ALOX15 के नए रेगुलेटर हो सकते हैं। CKD में ALOX15 के प्रमुख नियामक कारकों को स्पष्ट करने के लिए आगे के अध्ययन की आवश्यकता है। हमारे अध्ययन में विशिष्ट हस्तक्षेप करने वाले ऑक्सीलिपिन की पहचान करने के लिए जो 5/6 Nx मॉडल में Alox15 विलोपन को इसके रीनोप्रोटेक्टिव प्रभाव से जोड़ता है, हमने पाया कि PGD2 प्रतिरोध में शामिल हो सकता हैगुर्दे की क्षतिALOX15 विलोपन के कारण। एक सामान्य समझ के रूप में, PGD2, COX-1 और . उत्पन्न करने के लिए
CCOX-2 एराकिडोनिक एसिड से PGG2 का उत्पादन करता है, जिसे बाद में PGH2 में बदल दिया जाता है। जब PGH2 को PGD2 सिंथेज़ (PGDS) द्वारा मेटाबोलाइज़ किया जाता है, PGD2 का उत्पादन होता है [28]। PGDS के दो आनुवंशिक रूप से भिन्न आइसोफोर्म हैं, अर्थात् लिपोकैलिनटाइप PGDS (L-PGDS) और हेमटोपोइएटिक-प्रकार PGDS (H-PGDS) [28]। हालाँकि PGD2 को Alox15 - / - CKD माउस . में बढ़ाया गया थागुर्दे, Alox15 - / - CKD माउस में न तो L-PGDS और न ही H-PGDS को बढ़ाया गया थागुर्दे, WT CKD माउस में PGDS में बड़ी वृद्धि के बावजूदगुर्दे(चित्र। 8ए)। इसके अलावा, हमने यह भी खुलासा किया कि Alox15 - / - CKD माउस किडनी (चित्र। 8b) में न तो COX -1 और न ही COX -2 को बढ़ाया गया था। इन परिणामों से पता चलता है कि Alox15 में PGD 2 में वृद्धि - / - CKD माउस किडनी सिंथेस में वृद्धि के कारण नहीं थी, बल्कि सब्सट्रेट की बढ़ती उपलब्धता या गिरावट के अवरोध के कारण थी, और वास्तव में, हमने {{ में कमी का खुलासा किया है। 7}}PGDH, Alox15 में प्रमुख PGD2 मेटाबोलाइजिंग एंजाइम [29] में से एक है -/- CKD माउस किडनी (चित्र 8b)। इस कारण को स्पष्ट करने के लिए आगे की जांच की आवश्यकता है कि क्यों Alox15 को हटाने से 15-PGDH में कमी आती है।
जैसा कि ऊपर उल्लेख किया गया है, PGD2 के प्रतिरोध में शामिल हो सकता हैगुर्दे की चोटALOX15 नुकसान के कारण। इस अध्ययन में, PGD2 ने समीपस्थ ट्यूबलर कोशिकाओं का प्रतिनिधित्व करते हुए NRK-52E और HK-2 कोशिकाओं में TGF- 1 द्वारा EMT को बाधित किया। PGD2 दो अलग-अलग G प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर्स, अर्थात् DP1 और DP2 को बांधता है, जिनके कार्य अलग-अलग हैं [28]। हालाँकि, हमारे इन विट्रो प्रयोगों में, PGD2 4 से 32 μM तक की सांद्रता में प्रभावी था, जो अपेक्षाकृत अधिक है, यह देखते हुए कि DP1 और DP2 के Ki मान क्रमशः 1.7 nM और 2.4 nM हैं [28]। यह परिणाम इंगित करता है कि PGD2 जी प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर्स के माध्यम से नहीं बल्कि अन्य मार्गों जैसे कि PPAR के माध्यम से एंटीफिब्रोटिक प्रभाव डाल सकता है, जिसके माध्यम से 15- d-PGJ2, एक डाउनस्ट्रीम PGD2 मेटाबोलाइट, इसके प्रभावों को बढ़ाने के लिए जाना जाता है [28]। इस अध्ययन में, जो लिपिड चयापचय एंजाइम और उनके मेटाबोलाइट्स पर केंद्रित है, ALOX15 निषेध और / या PGD2 प्रशासन CKD के लिए एक आशाजनक चिकित्सीय लक्ष्य हो सकता है। दुर्भाग्य से, कोई ALOX15 विशिष्ट अवरोधक विकसित नहीं किया गया है जिसका उपयोग नैदानिक अभ्यास में किया जा सकता है [40, 41]। विभिन्न मेटाबोलाइट्स को प्रभावित करने वाले फैटी एसिड मेटाबोलाइजिंग एंजाइमों के निषेध के बजाय डाउनस्ट्रीम फंक्शनल मेटाबोलाइट्स जैसे पीजीडी 2 का चिकित्सीय लक्ष्यीकरण एक आदर्श आदर्श सीकेडी थेरेपी हो सकता है।
सिस्टैंच से किडनी/गुर्दे के डायलिसिस में सुधार होगा
