उच्च P16INK4a, सेलुलर जीर्णता का एक मार्कर, ल्यूपस नेफ्रैटिस में गुर्दे की चोट, हानि और परिणाम के साथ जुड़ा हुआ है
Mar 24, 2022
किडनी/गुर्दे की बीमारी में सुधार करेगा सिस्टांचे
परिचयल्यूपस नेफ्रैटिस (एलएन) प्रणालीगत ल्यूपस एरिथेमेटोसस (एसएलई) की एक गंभीर जटिलता है, जो ग्लोमेरुलर बेसल झिल्ली में प्रतिरक्षा परिसरों या स्वप्रतिपिंडों के जमाव से शुरू होती है, इसके बाद भड़काऊ कोशिकाओं की भर्ती होती है।'गुर्दे की चोटअपरिवर्तनीय फाइब्रोसिस की ओर जाता है, जिसके परिणामस्वरूप गुर्दा समारोह का नुकसान होता है। एलएन का इलाज उच्च खुराक वाले कॉर्टिकोस्टेरॉइड्स और अन्य इम्यूनोसप्रेसिव एजेंटों के साथ किया जाता है। एक तिहाई रोगियों में फिर भी गिरावट देखी गईगुर्दे समारोह, 5 प्रतिशत -10 प्रतिशत के साथ अंतिम चरण विकसित कर रहा हैगुरदे की बीमारी10 वर्षों के भीतर।" रोगसूचक मार्कर जो समय पर उपचार वृद्धि या संशोधन की अनुमति देते हैं, इसलिए उत्सुकता से मांग की जाती है, जैसा कि उपन्यास चिकित्सीय लक्ष्य हैं। सेल्युलर सेनेसेंस, उत्तेजनाओं जैसे टेलोमेयर क्षरण, ऑक्सीडेटिव तनाव और पुरानी सूजन से शुरू होता है, अंततः अपरिवर्तनीय वृद्धि की ओर जाता है pl6Na प्रोटीन (CDKN2A) सहित साइक्लिन-आश्रित किनसे (CDK) अवरोधकों के संचय के माध्यम से गिरफ्तारी: सेल्युलरसेन्स विज्ञान की एक प्रमुख पहचान। सेन्सेंट कोशिकाएं चयापचय रूप से सक्रिय रहती हैं और -गैलेक्टोसिडेस गतिविधि और अधिग्रहण के अपग्रेडेशन सहित कई रूपात्मक और शारीरिक परिवर्तनों से गुजरती हैं। एक प्रिनफ्लेमेटरी, प्रोफाइब्रोटिक सेनेसेंस-एसोसिएटेड सेक्रेटरी फेनोटाइप (एसएएसपी)।" जबकि ऊतक की मरम्मत और रीमॉडेलिंग (जैसे, भ्रूणजनन के दौरान) में आवश्यक है, सेलुलर बुढ़ापा उम्र बढ़ने से संबंधित और पुरानी बीमारी के साथ-साथ कैंसर में भी प्रतिकूल प्रभाव डाल सकता है।' pl6Nk या -galactosidase धनात्मक कोशिकाओं को देखा गया हैगुर्देउम्र बढ़ने और कुछ गुर्दा रोग, और ऊतकीय घावों से जुड़े थे औरगुर्देहानि। MRL/lprlupus-prone चूहों की डिग्री में प्रोटीनूरिया के साथ सहसंबद्ध -galactosidase धनात्मक कोशिकाओं की उपस्थिति; हालांकि, सकारात्मक एलएन में स्पष्ट रूप से सेलुलर सिनेसेंस का प्रदर्शन किया जाना बाकी है। यहां, हम pl6ka की घटना की रिपोर्ट करते हैं। सक्रिय एलएन वाले रोगियों (एन =40) से गुर्दे की बायोप्सी में कोशिकाएं, और इसके साथ संबंधगुर्दे की चोटऔर कार्यात्मक हानि।
कीवर्ड:गुर्दा कार्य; गुर्दे की बीमारियां; गुर्दे की बायोप्सी; गुर्दे की चोट; गुर्दे
सिस्टैंच से किडनी/गुर्दे के डायलिसिस में सुधार होगा
तरीके:मरीजों और गुर्दे की बायोप्सीमरीजों को रुमेटोलॉजी विभाग, क्लिनिक यूनिवर्सिटीज सेंट-ल्यूक (ब्रुसेल्स, बेल्जियम) में भर्ती किया गया था। सभी एसएलई के लिए 1982 के संशोधित एसीआर वर्गीकरण मानदंडों को पूरा करते थे और बायोप्सी-सिद्ध एलएन थे। फॉर्मेलिन-फिक्स्ड पैराफिन-एम्बेडेड (एफएफपीई) गुर्दे की बायोप्सी जनवरी 1996 और नवंबर 2019 के बीच नैदानिक उद्देश्यों के लिए एकत्र की गई अवशिष्ट शारीरिक सामग्री थी। अनुमानित ग्लोमेरुलर निस्पंदन दर (ईजीएफआर) मूल्यों की गणना क्रोनिक किडनी रोग महामारी विज्ञान सहयोग (सीकेडी-ईपीआई) सूत्र का उपयोग करके की गई थी। मानव अध्ययन पर बेल्जियम के नियमों के अनुसार, अवशिष्ट शारीरिक सामग्री के उपयोग के लिए रोगी की सहमति की आवश्यकता नहीं थी।
हिस्टोलॉजी और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्रीISN/RPS 2003 SLE . का वर्गीकरणगुर्देबायोप्सी, अर्ध-मात्रात्मक स्केलेरोसिस स्कोर, और राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (एनएच) गतिविधि सूचकांक (एआई) और क्रॉनिकिटी इंडेक्स (सी) को मेडिकल रिकॉर्ड से पुनर्प्राप्त किया गया था। 5μm FFPE सीरियल सेक्शन पर एंटी-सीडी8 (C8/144B, डको) और एंटी-p16INK4 (E6H4, रोश वेंटाना CINtec हिस्टोलॉजी) और पिक्रोसिरियस रेड （PSR） स्टेनिंग के साथ इम्यूनो प्रशिक्षण किया गया। स्लाइड्स को SCN400 स्कैनर (लीका बायोसिस्टम्स, जर्मनी) या पैनोरमिक कन्फोकल स्लाइड स्कैनर (3DHistech, हंगरी) पर × 20 आवर्धन पर डिजिटल किया गया था। लेखक V2017.2 (Visi Biopharm, डेनमार्क) का उपयोग करके अनुभागों की संपूर्ण सतह का कंप्यूटर-समर्थित परिमाणीकरण किया गया था। दिखाए गए परिणाम pl6K या CD8-ऊतक के प्रति μm² सकारात्मक कोशिकाओं की संख्या हैं। अर्ध-मात्रात्मक पीएसआर स्कोर (पैमाने: 2-6) तीन (अंधा) स्कोरर से औसत (ग्लोमेरुलर प्लस इंटरस्टिशियल फाइब्रोसिस) स्कोर हैं। अधिक विवरण ऑनलाइन पूरक-मानसिक विधियों 1, ऑनलाइन पूरक चित्र 1 में दिए गए हैं।सांख्यिकीय आंकड़ेग्राफपैड प्रिज्म V.9.1 पर सांख्यिकीय विश्लेषण किए गए। 0: मान-व्हिटनी या विलकॉक्सन मिलान-जोड़ी दो-समूह तुलनाओं के लिए हस्ताक्षरित-रैंक परीक्षण, मल्टीग्रुप तुलनाओं के लिए क्रुस्कल-वालिस और स्पीयरमैन के रैंक-ऑर्डर सहसंबंध गुणांक।
परिणाम:p16k4-सक्रिय LN वाले रोगियों से गुर्दे की बायोप्सी में सकारात्मक कोशिकाएंहमने इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री द्वारा p16Nk प्रोटीन का मूल्यांकन कियागुर्देसक्रिय एलएन वाले 40 रोगियों से निदान पर ली गई बायोप्सी, जिसमें इंसिडेंट नेफ्रैटिस (n=31) और रिलैप्स (n=9) शामिल हैं। जनसांख्यिकी, जैविक और नैदानिक डेटा को ऑनलाइन पूरक तालिका 1.p16INkA में संक्षेपित किया गया है। सभी में सकारात्मक कोशिकाओं का पता लगाया गया था, लेकिन नमूनों के बीच काफी परिवर्तनशीलता के साथ: वस्तुतः कोई नहीं से लेकर कभी-कभार बिखरी हुई कोशिकाओं तक, दृढ़ता से सकारात्मक क्षेत्रों (आंकड़ा एलए, ऑनलाइन पूरक आंकड़ा 2 ए-डी)। pl6staining की मात्रा ने एलएन बायोप्सी की विविधता की पुष्टि की (रेंज: 1.76 × 10 ~ -260 × 10 ~, माध्यिका: 14.7 × 10- कोशिकाएं / माइक्रोन-आकृति 1 बी, सी। दाग वाली कोशिकाओं में मेसेंजियल कोशिकाएं शामिल हैं, ग्लोमेरुली में एंडोथेलियल कोशिकाएं या पोडोसाइट्स, बोमन के कैप्सूल में पार्श्विका उपकला कोशिकाएं, समीपस्थ या डिस्टल ट्यूबलर कोशिकाएं, और अंतरालीय कोशिकाएं (आंकड़ा आईडी)। हालांकि pl6-धनात्मक कोशिकाओं (प्रति μm) का घनत्व ग्लोमेरुली की तुलना में काफी अधिक था। अंतराल (आंकड़ा 1सी) में, इन मूल्यों (प्रति नमूना) ने एक महत्वपूर्ण सकारात्मक सहसंबंध दिखाया (आर =0.7591, पी<0.0001)(online supplemental="" figure="" 3).="" importantly,="" pl6ka="" accumulation="" was="" not="" associated="" with="" patient="" age,="" gender,="" or="" ethnicity="" (online="" supplemental="" figure="">
सिस्टैंच से किडनी/गुर्दे के संक्रमण में सुधार होगा
p16"K4 बेसलाइन पर गुर्दे की हानि और उपचार के 5 साल बाद से जुड़ा हुआ हैp16INKEa सकारात्मकता बिगड़ा के साथ महत्वपूर्ण रूप से जुड़ी हुई थीगुर्दे समारोह: ईजीएफआर वाले रोगियों की बायोप्सी<60 at="" the="" time="" of="" sampling="" had="" significantly="" higher="" pl6inf-positive="" cells/μm²,="" and="" conversely,="" samples="" with="" high(="">75 वाँ प्रतिशतक) p16a काफ़ी निचले बेसलाइन eGFR (चित्र 2AB) से संबद्ध थे। eGFR के साथ जुड़ाव ग्लोमेरुलर और इंटरस्टीशियल pl6a (ऑनलाइन सप्लीमेंट्री फिगर 5A, B) दोनों के लिए सही था। दिलचस्प है, जबकि उच्च ग्लोमेरुलर p16 भी काफी अधिक प्रोटीनुरिया (मूत्र प्रोटीन / क्रिएटिनिन अनुपात) से जुड़ा था, जो मुख्य रूप से ग्लैमर को दर्शाता है-नहीं था (ऑनलाइन अनुपूरक चोट, बीचवाला pl6ka मानसिक आंकड़ा 5C, D)। इसके विपरीत इसके साथ जुड़ाव गरीबों के साथ नहीं जुड़ा थागुर्दे समारोह, pl6NK4a प्रणालीगत बीमारी के पैरामीटर जैसे सीरम एंटी-डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए एंटीबॉडी या C3 स्तर, या ISN/RPS वर्गीकरण (ऑनलाइन पूरक आंकड़ा 6A-D) के साथ। एसएलई और एलएन निदान के बीच लंबी अवधि के रोगियों की बायोप्सी में थोड़ा (गैर-महत्वपूर्ण) उच्च pl6k देखा गया था, और घटना नेफ्रैटिस (ऑनलाइन पूरक आंकड़ा 7 ए, बी) की तुलना में रिलेप्स में देखा गया था। महत्वपूर्ण रूप से, केवल एलएन मामलों के विश्लेषण ने pl6 और eGFR (ऑनलाइन पूरक-मानसिक आंकड़ा 7C) के बीच संबंध को सही ठहराया, यह सुझाव देते हुए कि यह पूरी तरह से गुर्दे की बीमारी की अवधि पर निर्भर नहीं है। अंत में, बेसलाइन बायोप्सी में उच्च p16Nkia भी कम ईजीएफआर के साथ 5 साल के उपचार के बाद (लेकिन वर्ष में नहीं) से जुड़ा था, यह सुझाव देता है कि यह खराब दीर्घकालिक का पूर्वानुमान हो सकता हैगुर्देविकास (चित्र 2सी,डी)।
चित्रा 1 p16NK43-सक्रिय एलएन वाले रोगियों से गुर्दे की बायोप्सी में सकारात्मक कोशिकाएं। (ए) पी16, सीडी8 और एलएन किडनी बेसलाइन बायोप्सी से एफएफपीई धारावाहिक वर्गों के पीएसआर धुंधला। अवलोकन (बाएं पैनल), क्लोज़-अप (दाएं) एक ग्लोमेरुलस के भीतर p16 सकारात्मक कोशिकाओं को दिखा रहा है, पेरिग्लोमेरुलर सीडी 8-सकारात्मक कोशिकाएं, और उसी ग्लोमेरुलस के बोमन कैप्सूल में और उसके आसपास कोलेजन जमा। (बी) नमूनों के बीच p16xa-सकारात्मक कोशिकाओं / μm-विविधता की डिग्री दिखा रहा है। सी） p16 की मात्रा का ठहराव< （positive="" cells/um²）="" in="" glomerular="" vs="" interstitial="" areas="" of="" the="" same="" samples.p-value:="" wilcoxon="" matched-pair="" signed-rank="" test.="" (d)="" representative="" image="" from="" a="" sample="" showing="" p16-positive="" cells="" within="" glomeruli="" (#),="" in="" bowman's="" capsules="" (filled="" star),="" proximal="" tubules(filled="" arrow),="" distal="" tubules(arrow)="" and="" dispersed="" in="" the="" interstitium="" (arrowhead).ffpe,="" formalin-fixed="" paraffin-embedded;="" ln,="" lupus="" nephritis;="" psr,="" picrosirius="">
p16NK43 वृक्क CD8* T सेल घुसपैठ और p16Ma फाइब्रोसिस से जुड़ा हैयह दिखाया गया है कि सीडी 8 टी लिम्फोसाइट्स एलएन किडनी में घुसपैठ करने वाली प्रमुख प्रतिरक्षा कोशिका प्रकार हैं और उनकी उपस्थिति से जुड़ी हैगुरदे की बीमारीगंभीरता हमने पाया कि pl6-उच्च बायोप्सी ने काफी अधिक CD8t T सेल घुसपैठ (आंकड़ा 3A) प्रदर्शित किया। वे बढ़े हुए फाइब्रोसिस से भी महत्वपूर्ण रूप से जुड़े थे: कोलेजन
पीएसआर धुंधला के अर्ध-मात्रात्मक स्कोर, और स्क्लेरोसिस और एक न्यूरोपैथोलॉजिस्ट द्वारा प्रदान किए गए एनएच सीआई स्कोर (आंकड़ा 3 बी-डी) द्वारा दर्शाया गया है। NIH AI स्कोर, इसके विपरीत, p16INK4a s समूहों (डेटा नहीं दिखाया गया) के बीच काफी भिन्न नहीं थे। दिलचस्प बात यह है कि ऊतक वर्गों की जांच में, हमने देखा कि कुछ एलएन बायोप्सी में मजबूत pl6k धुंधला (जो कि ग्लोमेरुलर होता है) और क्लस्टर सीडी 8- सकारात्मक कोशिकाओं (सबसे अधिक बार पेरिग्लोमेरुलर) के बीच एक स्थानिक सह-वितरण प्रतीत होता है। आइए, ऑनलाइन पूरक चित्र 2)। इसलिए हम। प्रत्येक ग्लोमेरुलस के चारों ओर 30μm त्रिज्या के भीतर स्थित CD8* T कोशिकाओं की संख्या, इसके बोमन कैप्सूल की मोटाई, और इसके भीतर pl6k-पॉजिटिव कोशिकाओं की संख्या (ऑनलाइन पूरक चित्र 1) की मात्रा निर्धारित की। यह सभी नमूनों में, तीन धारावाहिक खंडों पर दिखाई देने वाले सभी ग्लोमेरुली पर किया गया था। उच्च pl6K4-सकारात्मक कोशिका संचय के साथ ग्लोमेरुली ने काफी अधिक पेरिगो-मैक्यूलर सीडी 8 टी कोशिकाओं (आंकड़ा 3 ई) को प्रदर्शित किया, साथ ही बोमन के कैप्सूल की बढ़ी हुई मोटाई, ग्लोमेरुलर फाइब्रोसिस (आंकड़ा 3 एफ) को दर्शाती है।
बहसरोगियों की एक बड़ी श्रृंखला में यह पहला प्रदर्शन है, कि pl6Na, कोशिकीय जीर्णता की एक प्रमुख पहचान, LN में रोग की गंभीरता से जुड़ा है। pl16 प्रोटीन के लिए IHC व्यापक रूप से पूर्व विवो के लिए आकलन करने के लिए उपयोग किया जाता है, और अन्य की गंभीरता के साथ जुड़ा हुआ हैगुर्देरोग। 'पीएल6-उम्र बढ़ने और प्रेरित नेफ्रोपैथी के माउस मॉडल में सकारात्मक कोशिकाओं का चयनात्मक उन्मूलन इसके अलावा फाइब्रोटिक घावों को दूर करने और सुधार करने के लिए दिखाया गया हैगुर्दे समारोह,' में एक महत्वपूर्ण भूमिका का सुझाव दे रहा हैगुर्देरोगजनन एलएन में सेलुलर सिनेसेंस क्यों हो सकता है अज्ञात है। एलएन किडनी का भड़काऊ, ऑक्सीडेटिव वातावरण कोशिका तनाव का स्रोत हो सकता है। कई प्रिनफ्लेमेटरी कारकों को सेनेसेंस इंडक्शन में फंसाया गया है, 14 इंच इंटरफेरॉन-बी 3 को एसएलई 15 के रोगियों से अस्थि मज्जा मेसेनकाइमल स्टेम सेल के सेन्सेंट फेनोटाइप से जोड़ा गया है।जबकि हमारा अध्ययन pl6-सकारात्मक कोशिकाओं और एलएन गंभीरता की प्रचुरता के बीच एक महत्वपूर्ण संबंध पर प्रकाश डालता है, एलएन में इसकी प्रासंगिकता की पुष्टि करने के लिए, एक बड़े समूह में सेलुलर सिनेसेंस के अतिरिक्त मार्करों का उपयोग आवश्यक होगा। यदि और कैसे कोशिकीय बुढ़ापा रोग की प्रगति में योगदान देता है (या क्या यह केवल ऊतक की चोट को दर्शाता है) की जांच की जानी बाकी है। प्रोफिब्रोटिक, प्रोइनफ्लैम-मेटरी सेक्रेटोम (एसएएसपी) सेन्सेंट कोशिकाओं के विशिष्ट के माध्यम से एक हानिकारक प्रभाव डाला जा सकता है। इस परिकल्पना को ध्यान में रखते हुए, हम एलएन गुर्दे में pl6Nk सकारात्मक कोशिकाओं, फाइब्रोसिस और सीडी 8 * टी सेल घुसपैठ के बीच एक तंग स्थानिक सह-वितरण का वर्णन करते हैं। एक अन्य रोगजनक तंत्र में कार्यात्मक रूप से अक्षम कोशिकाओं का संचय शामिल हो सकता है, उदाहरण के लिए,गुर्देपूर्वज कोशिकाएं (आरपीसी, ग्लोमेरुली के बोमन कैप्सूल में स्थित पार्श्विका उपकला कोशिकाओं का एक उपसमुच्चय)।'" जबकि स्वस्थ आरपीसी ग्लोमेरुलर और ट्यूबलर संरचनाओं को पुन: उत्पन्न करते हैं, उनकी क्षमता के लिए धन्यवाद और अलग-अलग में प्रवेश करने के लिए धन्यवादगुर्देकोशिका उपसमुच्चय," "सीनसेंट आरपीसी ऊतक की मरम्मत में बाधा डाल सकते हैं।" अंत में, जबकि एसएएसपी आंशिक रूप से प्रतिरक्षा प्रणाली (सीडी 8 टी टी लिम्फोसाइटों सहित) को जोड़ने के लिए अनुकूल है '8 सेन्सेंट कोशिकाओं की निकासी के लिए, बाद वाला अवरोधन करके प्रक्रिया को बढ़ा सकता है cyto lyic celk।" यह सुझाव दिया गया है कि सेन्सेंट कोशिकाओं की दृढ़ता (अत्यधिक प्रतिक्रिया के अत्यधिक या अवरोध के कारण) संतुलन को सकारात्मक से नकारात्मक प्रभाव में ले जाती है।" आगे इन विट्रो प्रयोगों की आवश्यकता होगी ताकि विच्छेदन किया जा सके एलएन के रोगजनन में pl6Nk पॉजिटिव कोशिकाओं की भूमिका। थेरेपी के लिए इसके महत्वपूर्ण निहितार्थ हो सकते हैं, सेनोलिटिक दवाओं डैसैटिनिब प्लस क्वेरसेटिन (डीक्यू) का उपयोग करते हुए पहला ओपन-लेबल पायलट अध्ययन, इडियोपैथिक पल्मोनरी फाइब्रोसिस और डायबिटिक किडनी रोग में आशाजनक परिणाम दिखा रहा है।अंत में बिगड़ा हुआ के साथ उच्च आधारभूत pl6INk4 का जुड़ावगुर्दे समारोहउपचार के 5 साल बाद की शुरुआत से पता चलता है कि यह रोग की गंभीरता का एक आशाजनक भविष्यवक्ता हो सकता है। pl6 और उससे जुड़े मार्करों (फाइब्रोसिस और सीडी8 टी सेल घुसपैठ) का आकलन करने के लिए 1-वर्ष अनुवर्ती बायोप्सी के साथ-साथ एक बड़े समूह में, बेसलाइन से इन मार्करों के विकास के रूप में रुचि होगी। lyear अकेले समय बिंदु की तुलना में उपचार की प्रतिक्रिया को बेहतर ढंग से दर्शा सकता है।
