माइक्रोबियल किण्वन और बायोएक्टिविटीज की जांच समग्र बैक्टीरिया किण्वन की प्रक्रिया को।

अध्याय 2 संवेदी मूल्यांकन उपभेदों के इष्टतम अनुपात को निर्धारित करता है।

 

इस अध्ययन में, सेब का उपयोग कच्चे माल के रूप में किया गया था, और एस्परगिलस ओरिजा, खमीर, स्ट्रेप्टोकोकस थर्मोफिलस, लैक्टोबैसिलस एसिडोफिलस और लैक्टोबैसिलस बुल्गरिकस को अलग -अलग अनुपातों में जोड़ा गया था, और एंजाइम प्राप्त करने के लिए मिश्रित और किण्वित किया गया था। एंजाइमों को संवेदी मूल्यांकन किया गया था, और चार उपभेदों का इष्टतम अनुपात स्कोर के अनुसार निर्धारित किया गया था, ताकि उच्च गुणवत्ता वाले सेब एंजाइमों को प्राप्त किया जा सके।

बैक्टीरिया किण्वन की तुलना में बहुत अधिक एंटी-ऑक्सीकरण शक्ति के साथ नई जड़ी बूटियों cistanche

 

 

2.1 सामग्री और विधियाँ

 

2.1.1 प्रायोगिक सामग्री

इस प्रयोगशाला में संग्रहीत एस्परगिलस ओरेज़े, खमीर, स्ट्रेप्टोकोकस थर्मोफिलस, और लैक्टोबैसिलस बुल्गारिकस; सेब, और प्रथम श्रेणी के लाल फ़ूजी को बाजार से खरीदा गया।

 

2.1.2 संस्कृति माध्यम

(1) एस्परगिलस ओरिजा संस्कृति माध्यम
आलू का माध्यम (पीडीए): 20% आलू 1 एल, ग्लूकोज 20 जी, केएच 2 पीओ 4 3 जी, एमजीएसओ 4 · 7H2O 1.5G, विटानिब B1 ट्रेस 8mg, agar 20g, प्राकृतिक PH, 25min के लिए 115 डिग्री पर आटोक्लेव। (२) खमीर संस्कृति मध्यम १० डिग्री बी माल्ट एक्सट्रैक्ट अगर मीडियम: १० बर्लिन में किण्वित बीयर (हॉप्स के बिना) के कच्चे माल को पतला करना, ५ जी/एल अगर को जोड़ें, भंग और डिस्पेंस, और ऑटोक्लेव १२१ डिग्री पर १५ मिनट के लिए।

(3) थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस संस्कृति माध्यम
खमीर एक्सट्रैक्ट 1%, ग्लूकोज 1.5%, बीफ एक्सट्रैक्ट 0। 3%, पेप्टोन 0। 5%, काको 3 1।

(४) बल्गेरियाई लैक्टोबैसिलस संस्कृति माध्यम
खमीर एक्सट्रैक्ट 1%, ग्लूकोज 1.5%, बीफ एक्सट्रैक्ट 0। 3%, पेप्टोन 0। 5%, काको 3 1।

 

2.1.3 मुख्य उपकरण

प्रयोग में उपयोग किए जाने वाले मुख्य उपकरण और उनके मॉडल तालिका 2.1 में दिखाए गए हैं।

 

Tab.2.1 मुख्य उपकरणों का नाम, मॉडल और निर्माता

 

सात लोगों को मूल्यांकन टीम के प्रतिनिधियों के रूप में चुना गया था। एक ही वातावरण और स्थितियों के तहत, उन्होंने एंजाइम का संवेदी मूल्यांकन किया, जिसमें रंग, गंध और एंजाइम का स्वाद शामिल है। स्कोर को चार स्तरों में विभाजित किया गया था: {{{0}}}} अंक (8 0 सहित), 70-80 अंक (7 {27}} सहित) पर बहुत अच्छा 6 0 अंक। कुल स्कोर 100 अंक है, जो तीन श्रेणियों के स्कोर को जोड़कर प्राप्त किया जाता है। विशिष्ट अनुपात हैं: 30%के लिए रंग खाते, 25%के लिए गंध, और 45%[51] के लिए स्वाद खाते। (7) एंजाइमों के संवेदी मूल्यांकन पर एस्परगिलस ओरेजा टीका के विभिन्न अनुपातों का प्रभाव। सामान्य तौर पर, दही में थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस और बल्गेरियाई लैक्टोबैसिलस की टीकाकरण मात्रा 2%-3%है। जब उपभेदों का अनुपात 1: 1 या 2: 1 होता है, तो किण्वित दूध की गुणवत्ता और स्वाद सबसे अच्छा होता है। आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला अनुपात 1: 1 [52] है। प्रयोग ने खमीर, थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस और बल्गेरियाई लैक्टोबैसिलस की टीकाकरण मात्रा को 3.0%के रूप में चुना। अन्य प्रक्रिया की स्थितियों को बदलने के बिना, एस्परगिलस ओरिजा की टीकाकरण राशि क्रमशः 0.5%, 1.0%, 1.5%, 2.0%, 2.5%और 3.0%में बदल गई। किण्वन के 30 दिनों के बाद, किण्वन तरल जिसमें लुगदी और सभी एंजाइम होते हैं, का नमूना लिया गया और एंजाइम सुपरनैटेंट प्राप्त करने के लिए फ़िल्टर किया गया। एंजाइम सुपरनैटेंट को संवेदी मूल्यांकन के लिए प्रयोगात्मक नमूना के रूप में लिया गया था।

 

। अन्य प्रक्रिया की स्थितियों को बदलने के बिना, खमीर की टीकाकरण राशि को 0। किण्वन के 30 दिनों के बाद, किण्वन तरल जिसमें लुगदी और सभी एंजाइम होते हैं, का नमूना लिया गया और एंजाइम सुपरनैटेंट प्राप्त करने के लिए फ़िल्टर किया गया। एंजाइम सुपरनैटेंट को संवेदी मूल्यांकन के लिए प्रयोगात्मक नमूना के रूप में लिया गया था।

। अन्य प्रक्रिया की स्थितियों को बदलने के बिना, थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस की टीकाकरण राशि को 0। किण्वन के 3 0 दिनों के बाद, नमूनों को लुगदी और सभी एंजाइमों वाले किण्वन तरल प्राप्त करने के लिए नमूने लिए गए थे, और एंजाइम सुपरनैटेंट को फ़िल्टर किया गया था। एंजाइम सुपरनैटेंट को संवेदी मूल्यांकन के लिए प्रयोगात्मक नमूना के रूप में लिया गया था। (1 0}) एंजाइमों के संवेदी मूल्यांकन पर लैक्टोबिलस बुल्गरिकस इनोक्यूलेशन के विभिन्न अनुपातों का प्रभाव एस्परगिलस ओरीज़े की टीकाकरण राशि 2 थी। स्ट्रेप्टोकोकस 1.5%था। अन्य प्रक्रिया की स्थितियों को बदलने के बिना, लैक्टोबैसिलस बुल्गारिकस की टीकाकरण राशि क्रमशः 0.5%, 1.0%, 1.5%, 2.0%, 2.5%और 3.0%में बदल गई। किण्वन के 30 दिनों के बाद, किण्वन तरल जिसमें लुगदी और सभी एंजाइम होते हैं, का नमूना लिया गया और एंजाइम सुपरनैटेंट प्राप्त करने के लिए फ़िल्टर किया गया। एंजाइम सुपरनैटेंट को संवेदी मूल्यांकन के लिए प्रयोगात्मक नमूना के रूप में लिया गया था।

(११) जीवाणु तनाव अनुपात का ऑर्थोगोनल डिजाइन
एकल कारक प्रयोग के आधार पर, चार कारकों का चयन किया गया था: एस्परगिलस ओरेजा इनोक्यूलेशन राशि (ए), खमीर टीकाकरण राशि (बी), थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस इनोक्यूलेशन मात्रा (सी) और बल्गेरियाई लैक्टोबैसिलस इनोक्यूलेशन राशि (डी)। प्रत्येक कारक को ऑर्थोगोनल प्रयोग के लिए 3 स्तरों पर चुना गया था।

 

Fig.2.1 प्लेट या तिरछा पर बैक्टीरिया की वृद्धि आकारिकी का आरेख

 

Tab.2.2 एक महीने के बाद एकल तनाव किण्वन का संवेदी मूल्यांकन।

तालिका 2.2 में प्रयोगात्मक परिणामों से, हम देख सकते हैं कि एंजाइम तरल की गुणवत्ता में सुधार के लिए अलग -अलग उपभेद अच्छे हैं, लेकिन उनके प्रभाव अलग हैं। यदि हम चार उपभेदों को मिलाते हैं और किण्वित करते हैं, तो क्या यह उच्च गुणवत्ता वाले एंजाइमों को प्राप्त करने के लिए अधिक अनुकूल होगा? इसलिए हमने निम्नलिखित शोध किया।

 

2.2.3 Effect of different Aspergillus oryzae inoculation amounts on enzyme sensory evaluation

 

खमीर, थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस और बल्गेरियाई लैक्टोबैसिलस की टीकाकरण मात्रा सभी 3 थे। 0%। अन्य प्रक्रिया की स्थितियों को बदलने के बिना, एस्परगिलस ओरिजा की टीकाकरण राशि को बदल दिया गया था। किण्वन के 30 दिनों के बाद, एंजाइम सतह पर तैरनेवाला का संवेदी मूल्यांकन स्कोर चित्र 2.2 में दिखाया गया है।

 

 

Fig.2.2 संवेदी मूल्यांकन पर Aspergillus oryzae inoculation राशि के वक्र का प्रभाव।

 

जैसा कि अंजीर में दिखाया गया है। 2.2, जब खमीर की टीकाकरण राशि, थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस और बल्गेरियाई लैक्टोबैसिलस 3 है। 0%, जब एस्परगिलस ओरेज़े की टीकाकरण राशि 0 है। टीकाकरण राशि। जब इनोक्यूलेशन राशि 2 है। 0%~ 3। 0%, संवेदी मूल्यांकन स्कोर एक नीचे की प्रवृत्ति दिखाता है। इसलिए, प्रयोग से पता चलता है कि जब एस्परगिलस ओरेज़े की टीकाकरण मात्रा 2 है। 0%, संवेदी मूल्यांकन स्कोर उच्चतम है, और एंजाइम का रंग, स्वाद और गंध सबसे अधिक है।

 

2.2.4 एंजाइमों के संवेदी मूल्यांकन पर विभिन्न खमीर टीकाकरण मात्रा का प्रभाव

 

Aspergillus Oryzae की टीकाकरण राशि 2 थी। 0%, और स्ट्रेप्टोकोकस थर्मोफिलस और लैक्टोबैसिलस बुल्गरिकस की टीकाकरण मात्रा 3 थी। 0%। अन्य प्रक्रिया की स्थितियों को बदलने के बिना, खमीर की टीकाकरण मात्रा को बदल दिया गया था। किण्वन के 30 दिनों के बाद एंजाइम सुपरनैटेंट के संवेदी मूल्यांकन स्कोर को चित्र 2.3 में दिखाया गया है।

 

 

Fig.2.3 संवेदी मूल्यांकन पर खमीर टीकाकरण राशि के वक्र का प्रभाव।

जैसा कि अंजीर में दिखाया गया है। 2.3, जब एस्परगिलस ओरीज़े की टीकाकरण राशि 2 है। 0%, और स्ट्रेप्टोकोकस थर्मोफिलस और लैक्टोबैसिलस बुल्गरिकस की टीकाकरण राशि 3 है। 0%, जब यीस्ट की इनोक्यूलेशन राशि {{6} 5%और 1 के बीच होती है। एंजाइम संवेदी मूल्यांकन स्कोर इनोक्यूलेशन राशि की वृद्धि के साथ बढ़ता है, और जब टीकाकरण राशि 1 के बीच होती है। 0% और 2। 0%, संवेदी मूल्यांकन स्कोर एक नीचे की प्रवृत्ति दिखाता है। टीकाकरण राशि 2 तक पहुंचने के बाद। 0%, एक छोटा रिबाउंड है, और फिर यह कम हो जाता है। इसलिए, प्रयोग से पता चलता है कि जब खमीर की टीकाकरण राशि 1 होती है। 0%, संवेदी मूल्यांकन स्कोर उच्चतम होता है, और एंजाइम में रंग, स्वाद और गंध का उच्चतम व्यापक मूल्यांकन होता है।

 

 

 

2.2.5 विभिन्न थर्मोफिलिक का प्रभाव

 

एंजाइम के संवेदी मूल्यांकन पर स्ट्रेप्टोकोकस इनोक्यूलेशन राशि एस्परगिलस ओरीज़े की टीकाकरण राशि 2 है। 0%, खमीर की टीकाकरण राशि 1 है। अन्य प्रक्रिया की स्थिति को बदलने के बिना, थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस की टीकाकरण मात्रा को बदल दिया जाता है। किण्वन के 30 दिनों के बाद एंजाइम सुपरनैटेंट का संवेदी मूल्यांकन स्कोर चित्र 2.4 में दिखाया गया है।

Fig.2.4 संवेदी मूल्यांकन पर स्ट्रेप्टोकोकस थर्मोफिलस टीकाकरण राशि के वक्र का प्रभाव।

जैसा कि चित्र 2.4 में दिखाया गया है, जब Aspergillus oryzae की टीकाकरण राशि 2 है। 0%, खमीर की टीकाकरण राशि 1 है। 0%, और लैक्टोबैसिलस बुल्गरिकस की टीकाकरण राशि 3 है। एंजाइम संवेदी मूल्यांकन स्कोर जितना अधिक होता है, जब टीकाकरण राशि 1.5% और 3 के बीच होती है। 0%, संवेदी मूल्यांकन स्कोर इनोक्यूलेशन राशि की वृद्धि के साथ धीमी गति से नीचे की ओर प्रवृत्ति दिखाता है। इसलिए, प्रयोग ने निष्कर्ष निकाला कि जब थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस की टीकाकरण मात्रा 1.5%थी, तो संवेदी मूल्यांकन स्कोर उच्चतम था, और एंजाइम के रंग, स्वाद और गंध का व्यापक मूल्यांकन उच्चतम था।

 

Fig.2.5 संवेदी मूल्यांकन पर लैक्टोबैसिलस बुल्गरिकस इनोक्यूलेशन राशि के वक्र का प्रभाव।

जैसा कि Fig.2.5 में दिखाया गया है, जब Aspergillus oryzae की इनोक्यूलेशन राशि 2 है। 0%, खमीर की टीकाकरण राशि 1 है। 0%, और थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस की टीकाकरण राशि 1.5%है, जब {{8} के बीच की मात्रा होती है। एंजाइम का संवेदी मूल्यांकन स्कोर जितना अधिक होता है, जब टीकाकरण राशि 1 के बीच होती है। 0% और 3। 0%, संवेदी मूल्यांकन स्कोर टीकाकरण राशि की वृद्धि के साथ धीमी गति से नीचे की प्रवृत्ति दिखाता है। इसलिए, प्रयोग से पता चलता है कि जब लैक्टोबैसिलस बुल्गरिकस की टीकाकरण राशि 1 होती है। 0%, संवेदी मूल्यांकन स्कोर उच्चतम है, और एंजाइम के रंग, स्वाद और गंध का व्यापक मूल्यांकन उच्चतम है।

2.2.7 तनाव अनुपात का ऑर्थोगोनल डिजाइन

मिश्रित तनाव किण्वन द्वारा माइक्रोबियल एंजाइमों के उत्पादन के लिए इष्टतम तनाव सूत्र को अंततः निर्धारित करने के लिए, एस्परगिलस ओरेज़े (ए), खमीर टीकाकरण राशि (बी), थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस इनोक्यूलेशन मात्रा (सी) और बल्गेरियाई लेक्टोबैकिलस इनोकुलेशन मात्रा (डी) के टीकाकरण राशि को निर्धारित किया गया था। एकल कारक प्रयोग के अनुसार तीन उचित स्तर की स्थिति पाई गई, और एक ऑर्थोगोनल प्रायोगिक तालिका डिजाइन की गई थी। अन्य पर्यावरणीय स्थितियों को अपरिवर्तित रखा गया था, और उपरोक्त संवेदी मूल्यांकन के व्यापक स्कोर का उपयोग अंत में माइक्रोबियल एंजाइमों के इष्टतम तनाव सूत्र को निर्धारित करने के लिए अच्छे या बुरे संकेतक के रूप में किया गया था। ऑर्थोगोनल प्रयोग के लिए डिज़ाइन किया गया कारक स्तर तालिका तालिका 2.3 में दिखाया गया है।

 

 

 

जैसा कि तालिका 2.4 में दिखाया गया है, एंजाइमों के संवेदी मूल्यांकन को प्रभावित करने वाला मुख्य कारक एस्परगिलस ओरेज़े की टीकाकरण मात्रा है, इसके बाद स्ट्रेप्टोकोकस थर्मोफिलस, फिर लैक्टोबैसिलस बुल्गरिकस, और अंत में खमीर। जब Aspergillus oryzae की टीकाकरण राशि 1.5%होती है, तो खमीर की टीकाकरण राशि 1 होती है। 0%, स्ट्रेप्टोकोकस थर्मोफिलस की टीकाकरण राशि 1 होती है। मिश्रित किण्वन द्वारा उत्पादित उच्चतम है।

 

2.2.8 सत्यापन परीक्षण

ऑर्थोगोनल परीक्षण के विश्लेषण परिणामों के अनुसार, सत्यापन परीक्षण किया गया था। Aspergillus oryzae की टीकाकरण राशि 1.5%थी, खमीर की टीकाकरण राशि 1 थी। 0%, स्ट्रेप्टोकोकस थर्मोफिलस की टीकाकरण राशि 1 थी। 0%, और लैक्टोकिलस बल्गरिक की टीकाकरण राशि 1 थी। अन्य प्रक्रिया की स्थिति अपरिवर्तित रही। प्राप्त एंजाइम तरल का संवेदी मूल्यांकन स्कोर 92.3 था, जो उपरोक्त परीक्षण में किसी भी समूह से बेहतर था। इसलिए, उपरोक्त संयोजन का उपयोग किण्वन एजेंट के सबसे अच्छे अनुपात के रूप में किया जाता है।

बैक्टीरिया किण्वन की तुलना में बहुत अधिक एंटी-ऑक्सीकरण शक्ति के साथ नई जड़ी बूटियों cistanche

 

2.3 इस अध्याय का सारांश

यह अध्याय मिश्रित किण्वन द्वारा माइक्रोबियल एंजाइमों के उत्पादन के लिए संयुक्त उपभेदों के इष्टतम अनुपात का अध्ययन करता है। संवेदी मूल्यांकन स्कोर को एक संकेतक के रूप में लेते हुए, वह अनुपात जो उच्चतम संवेदी मूल्यांकन स्कोर प्राप्त कर सकता है, का चयन किया जाता है।
सबसे पहले, एक एकल तनाव टीकाकरण प्रयोग किया गया था। Apple एंजाइम को एक महीने के लिए स्वाभाविक रूप से किण्वित किया गया था, इसे उच्च तापमान और उच्च दबाव द्वारा निष्फल किया गया था, और फिर एस्परगिलस ओरिजा, खमीर, थर्मोफिलिक स्ट्रेप्टोकोकस और बल्गेरियाई लैक्टोबैसिलस के साथ टीका लगाया गया था। प्रयोगात्मक परिणामों से पता चला कि एंजाइम का संवेदी मूल्यांकन रिक्त नियंत्रण समूह की तुलना में अधिक था जब इन चार उपभेदों को अकेले टीका लगाया गया था। दूसरे, एक एकल कारक प्रयोग के माध्यम से, उपभेदों में से एक की टीकाकरण मात्रा को अन्य प्रक्रिया की स्थिति को बदले बिना बदल दिया गया था, और एकल कारक स्थितियों के तहत विभिन्न टीकाकरण मात्रा और संवेदी मूल्यांकन के साथ चार उपभेदों के बीच संबंध प्राप्त किया गया था। अंत में, एकल कारक प्रयोग के परिणामों के आधार पर, एक ऑर्थोगोनल प्रयोग को इष्टतम तनाव अनुपात प्राप्त करने के लिए डिज़ाइन किया गया था, अर्थात, जब एस्परगिलस ओरीज़े की टीकाकरण राशि 1.5%थी, तो खमीर की टीकाकरण राशि 1 थी। लैक्टोबैसिलस बुल्गरिकस 1 था। 0%, एंजाइम का संवेदी मूल्यांकन स्कोर सबसे अधिक था, जिसमें अधिकतम 92.3 अंक थे।