नैनो-पीएसओ प्रशासन दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के परिणामस्वरूप होने वाली संज्ञानात्मक और तंत्रिका संबंधी कमियों को कम करता है भाग 1

सार: ट्रॉमेटिक ब्रेन इंजरी (टीबीआई), युवा आबादी में न्यूरोलॉजिकल क्षति के सबसे आम कारणों में से एक है। इसे व्यापक रूप से अल्जाइमर रोग (एडी) और पार्किंसंस (पीडी) रोग जैसे न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों के लिए एक जोखिम कारक माना जाता है।

दर्दनाक मस्तिष्क की चोट एक चिंताजनक स्थिति है जो हमारे मस्तिष्क को गंभीर नुकसान पहुंचा सकती है, जिससे हमारी याददाश्त, सोच और निर्णय लेने की क्षमता अलग-अलग स्तर तक प्रभावित हो सकती है। हालाँकि, हालाँकि ये समस्याएँ कुछ समय के लिए हमारे जीवन को प्रभावित कर सकती हैं, फिर भी कई सकारात्मक उपाय हैं जो हमारी याददाश्त को ठीक करने या बेहतर बनाने में हमारी मदद कर सकते हैं।

सबसे पहले, हम संज्ञानात्मक प्रशिक्षण की एक श्रृंखला के माध्यम से अपनी याददाश्त को बेहतर बनाने में मदद कर सकते हैं, जिसमें गेम खेलना, दैनिक कार्यों को पूरा करना और नई चीजें सीखकर अपने दिमाग को उत्तेजित करना शामिल हो सकता है। यह प्रशिक्षण हमें नए तंत्रिका पथ विकसित करने, हमारी सोचने की क्षमता में सुधार करने और हमारी याददाश्त बढ़ाने में मदद कर सकता है।

दूसरा, दैनिक जीवन में, हम अपने आहार और व्यायाम की आदतों को बदलकर स्वस्थ मस्तिष्क बनाए रखने में मदद कर सकते हैं। प्रोटीन, विटामिन और एंटीऑक्सीडेंट से भरपूर कुछ खाद्य पदार्थ, जैसे सब्जियां, फल और नट्स, हमारी संज्ञानात्मक क्षमताओं को बेहतर बनाने और हमारे दिमाग को नुकसान से बचाने में हमारी मदद कर सकते हैं। इसके अलावा, नियमित व्यायाम और अच्छी नींद की गुणवत्ता बनाए रखना भी मस्तिष्क की रिकवरी और स्वास्थ्य देखभाल के लिए फायदेमंद हो सकता है।

अंत में, हम परिवार, दोस्तों और स्वास्थ्य देखभाल पेशेवरों के संपर्क में रहकर अपनी पुनर्प्राप्ति प्रक्रिया का समर्थन और मार्गदर्शन कर सकते हैं। दूसरों के साथ संवाद करने और सहायता और समर्थन प्राप्त करने से हमें आशावादी रवैया बनाए रखने में मदद मिल सकती है, जो हमारे मस्तिष्क की रिकवरी और स्मृति में सुधार के लिए आवश्यक है।

निष्कर्ष में, हालांकि दर्दनाक मस्तिष्क की चोट कुछ चुनौतियाँ ला सकती है, हम इन कठिनाइयों को दूर कर सकते हैं और सकारात्मक कार्यों के माध्यम से अपनी स्मृति और संज्ञानात्मक क्षमताओं में सुधार कर सकते हैं। याद रखें, कड़ी मेहनत और धैर्यपूर्ण प्रयासों से हर कोई सकारात्मक परिणाम प्राप्त कर सकता है। यह देखा जा सकता है कि हमें याददाश्त में सुधार करने की आवश्यकता है, और सिस्टैंच मेमोरी में काफी सुधार कर सकता है क्योंकि सिस्टैंच न्यूरोट्रांसमीटर के संतुलन को भी नियंत्रित कर सकता है, जैसे एसिटाइलकोलाइन और विकास कारकों के स्तर को बढ़ाना, जो स्मृति और सीखने के लिए बहुत महत्वपूर्ण हैं। इसके अलावा, सिस्टैंच रक्त प्रवाह में भी सुधार कर सकता है और ऑक्सीजन वितरण को बढ़ावा दे सकता है, जो यह सुनिश्चित कर सकता है कि मस्तिष्क को पर्याप्त पोषण और ऊर्जा प्राप्त हो, जिससे मस्तिष्क की जीवन शक्ति और सहनशक्ति में सुधार हो।

अपनी याददाश्त बेहतर करने के तरीके जानें पर क्लिक करें

इन रोगों की विशेषता कुछ हद तक रोग-विशिष्ट मिसफोल्डेड प्रोटीन के संचय से होती है और इनमें सामान्य रोग संबंधी विशेषताएं होती हैं, जैसे कि न्यूरोनल मृत्यु, साथ ही सूजन और ऑक्सीडेटिव क्षति।

अनार के बीज के तेल का नैनो फॉर्मूलेशन [नैनो-पीएसओ (ग्रेनागार्ड टीएम)] मस्तिष्क में इसके सक्रिय घटक को लक्षित करता है और उसके बाद एडी और जेनेटिक क्रुट्ज़फेल्टजैकब रोग के चूहों के मॉडल में स्मृति गिरावट और न्यूरोनल मौत को रोकता है।

इस अध्ययन में, हम दिखाते हैं कि टीबीआई अनुप्रयोग से पहले या बाद में चूहों को नैनो-पीएसओ का प्रशासन संज्ञानात्मक और व्यवहारिक गिरावट को रोकता है। इसके अलावा, मस्तिष्क के इम्यूनोहिस्टोकेमिकल धुंधलापन से संकेत मिलता है कि निवारक नैनो-पीएसओ उपचार से न्यूरोनल मृत्यु में काफी कमी आई, ग्लियोसिस कम हुआ और प्रभावित कोशिकाओं में माइटोकॉन्ड्रियल क्षति को रोका गया।

अंत में, हमने वेस्टर्न ब्लॉटिंग का उपयोग करके कॉर्टेक्स में सिर्टुइन1 (एसआईआरटी1) और सिनैप्टोफिसिन (एसवाईपी) के स्तर की जांच की।

नैनोपीएसओ के सेवन से चोट के बाद एसआईआरटी1 और एसवाईपी प्रोटीन का स्तर उच्च हो गया। कुल मिलाकर, हमारे परिणाम दर्शाते हैं कि नैनो-पीएसओ, एक प्राकृतिक मस्तिष्क-लक्षित एंटीऑक्सीडेंट के रूप में, टीबीआई-प्रेरित क्षति के कुछ हिस्से को रोक सकता है।

कीवर्ड: टीबीआई; नैनो-पीएसओ; न्यूरोइन्फ्लेमेशन; ऑक्सीडेटिव तनाव; न्यूरोडीजेनेरेशन

1 परिचय

ट्रॉमैटिक ब्रेन इंजरी (टीबीआई) एक गंभीर सार्वजनिक स्वास्थ्य चिंता है और युवा वयस्कों और बुजुर्ग आबादी में विकलांगता और मृत्यु का एक प्रमुख कारण है। इसे सबसे आम न्यूरोलॉजिकल चोटों में से एक माना जाता है जो रुग्णता और मृत्यु दर का कारण बनता है और हर साल दुनिया भर में 10 मिलियन से अधिक लोगों को प्रभावित करता है [1]। चूंकि सिर की चोटों के लिए हमेशा उचित चिकित्सा देखभाल की आवश्यकता नहीं होती है, इसलिए ये आंकड़े और भी अधिक होने की संभावना है।

टीबीआई के मुख्य कारणों में गिरना, सड़क दुर्घटनाएं, हमले और खेल में चोटें शामिल हैं [2]। टीबीआई पुरुषों में आम है और विशेष रूप से सड़क दुर्घटनाओं और शराब से संबंधित चोटों के बाद किशोरों और युवा वयस्कों में अक्सर होती है।

यह बुजुर्गों में भी आम है क्योंकि उनके गिरने की संभावना बढ़ जाती है [3]। जिन लोगों को टीबीआई है, वे चोट की गंभीरता के आधार पर अल्पकालिक और दीर्घकालिक दोनों तरह से व्यवहारिक, संज्ञानात्मक और भावनात्मक हानि से पीड़ित हो सकते हैं [3] ].

टीबीआई के संपर्क में आने वाले मरीज़ सुरक्षित निकल सकते हैं लेकिन उन्हें ऐसी चोटें भी लग सकती हैं जिनके लिए लंबे समय तक अस्पताल में भर्ती रहना पड़ता है और यहां तक ​​कि मृत्यु भी हो सकती है। टीबीआई के बाद गंभीर चोट के लगभग 40% मामले मृत्यु में समाप्त हो जाएंगे, बचे हुए लोग मिर्गी, मनोभ्रंश और न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों सहित विभिन्न न्यूरोलॉजिकल विकारों से पीड़ित होंगे [3,4]।

मध्यम चोट के कारण गंभीर चोट के समान रूपात्मक परिवर्तन होते हैं, लेकिन वे कम गंभीर होते हैं, और संज्ञानात्मक क्षति गंभीर चोट की तुलना में अधिकतर हल्की होती है [5]। इसके अलावा, इस बात के सुस्थापित प्रमाण हैं कि टीबीआई अल्जाइमर और पार्किंसंस जैसे न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों के विकास के लिए एक महत्वपूर्ण जोखिम कारक है [6-8]।

ऑक्सीडेटिव तनाव टीबीआई की संभावित माध्यमिक चोटों में से एक है, जिसमें एक्साइटोटॉक्सिसिटी, सूजन, एपोप्टोसिस और माइटोकॉन्ड्रियल डिसफंक्शन भी शामिल हैं। माइटोकॉन्ड्रियल डिसफंक्शन अक्सर पार्किंसंस और अल्जाइमर जैसे न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों वाले रोगियों में पाया जाता है [9-12]।

माइटोकॉन्ड्रियल डिसफंक्शन प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) के अनियमित अतिउत्पादन को जन्म दे सकता है, जो टीबीआई माध्यमिक चोट का एक लगातार संकेतक है [13]। मानव शरीर आरओएस उत्पादन में संभावित वृद्धि को संतुलित या बाधित करने के लिए अंतर्जात एंटीऑक्सिडेंट का उत्पादन करता है।

जब टीबीआई आरओएस उत्पादन में वृद्धि की ओर ले जाता है, तो शरीर के प्राकृतिक एंटीऑक्सीडेंट का स्तर अत्यधिक बढ़ जाता है, जिससे अक्सर लिपिड पेरोक्सीडेशन और डीएनए और प्रोटीन को नुकसान होता है [14]। इससे या तो आरओएस की अधिकता हो सकती है या एंटीऑक्सीडेंट का स्तर कम हो सकता है, एक ऐसी स्थिति जिसे ऑक्सीडेटिव तनाव के रूप में जाना जाता है, जिसके विनाशकारी और अक्सर विषाक्त प्रभाव हो सकते हैं, जिससे न्यूरोनल कोशिकाओं की मृत्यु हो सकती है और संभावित रोगजनन हो सकता है [15-19]।

टीबीआई के पास क्षति को कम करने या यहां तक ​​कि रोकथाम के लिए कोई सिद्ध उपचार नहीं है। इस कारण से, आदर्श उपचार प्रोटोकॉल निर्धारित करने के लिए चोट के बाद रोग संबंधी तंत्र की बेहतर समझ प्राप्त करना अत्यंत महत्वपूर्ण है।

नैनो-पीएसओ (ग्रैनगार्ड टीएम), अनार के बीज के तेल का एक नैनो-फॉर्मूलेशन जिसमें उच्च स्तर के प्यूनिकिक एसिड, सबसे मजबूत प्राकृतिक एंटीऑक्सिडेंट शामिल हैं, न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों के कई मॉडलों में स्मृति और कोशिका मृत्यु सहित सुधारात्मक न्यूरोडीजेनेरेशन संकेतों को दिखाया गया था [20-22]।

आनुवंशिक सीजेडी के लिए ट्रांसजेनिक चूहों के मॉडल में, नैनो-पीएसओ के दीर्घकालिक प्रशासन के परिणामस्वरूप रोग की प्रगति में देरी हुई और कोशिका मृत्यु में कमी आई। AD के लिए 5XFAD चूहों के मॉडल में, नैनो-पीएसओ प्रशासन ने स्मृति हानि को रोका और इंट्रासेल्युलर और इंट्रासेल्युलर दोनों में ए-बीटा के संचय को कम किया।

सभी मॉडलों में, नैनो-पीएसओ ने माइटोकॉन्ड्रियल गतिविधि में कमी को रोका, शायद इसके मजबूत और मस्तिष्क-लक्षित एंटीऑक्सीडेंट फ़ंक्शन के कारण। मनुष्यों में, नैनो-पीएसओ को हाल ही में मल्टीपल स्केलेरोसिस रोगियों में स्मृति बढ़ाने के लिए दिखाया गया है [23]।

वर्तमान अध्ययन में, हम दिखाते हैं कि नैनो-पीएसओ का प्रशासन, चूहों में टीबीआई से पहले या बाद में एक आहार अनुपूरक, दृश्य और स्थानिक स्मृति की हानि को कम करता है।

यह टेम्पोरल कॉर्टेक्स और डेंटेट गाइरस में न्यूरोनल हानि को भी कम करता है और घायल चूहों के मस्तिष्क के टेम्पोरल कॉर्टेक्स में प्रतिक्रियाशील एस्ट्रोसाइट तीव्रता को कम करता है। इसके अलावा, यह साइटोक्रोम सी ऑक्सीडेज (COX) के उत्पादन को बहाल करता है, एक माइटोकॉन्ड्रियल एंजाइम जो न्यूरोडीजेनेरेशन के दौरान मस्तिष्क कोशिकाओं में प्रभावित होने की सूचना है [24]।

इसके अलावा, यह श्वसन श्रृंखला में भूमिका निभाता है और तंत्रिका कोशिकाओं सहित कोशिकाओं द्वारा ली जाने वाली 95% तक ऑक्सीजन की कमी के लिए जिम्मेदार है [24]।

2. परिणाम

2.1. टीबीआई से पहले और बाद में चूहों को नैनो-पीएसओ का प्रशासन उनकी संज्ञानात्मक गिरावट को रोकता है

टीबीआई एक्सपोज़र और नैनो-पीएसओ के साथ उपचार के बाद या तो एक निवारक के रूप में या एपोस्ट-टीबीआई उपचार के रूप में (चित्र 1 और प्रयोगों की योजना के तरीके देखें), पुरुष आईसीआर चूहों का मूल्यांकन अलग-अलग समूहों के बीच टीबीआई के दो सप्ताह बाद ऊंचे प्लस भूलभुलैया का उपयोग करके किया गया था।

हमने क्रमशः भूलभुलैया की खुली भुजाओं में बिताए गए समय और प्रत्येक भुजा में प्रवेश द्वारों की कुल संख्या को रिकॉर्ड करके चूहों के चिंता जैसे व्यवहार का मूल्यांकन किया।

परीक्षण किए गए दोनों उपचार दृष्टिकोणों में सभी समूहों के बीच खुले हाथों में बिताए गए समय में कोई अंतर नहीं था, यह दर्शाता है कि चूहों का चिंता जैसा व्यवहार या तो चोट से या नैनो-पीएसओ के साथ उपचार से प्रभावित नहीं था (परिणाम नहीं दिखाए गए)।

स्मृति निर्माण पर नैनोपीएसओ खपत के दोनों उपचार दृष्टिकोणों (टीबीआई से पहले या बाद) के प्रभावों का आकलन करने के लिए, चोट के दो सप्ताह बाद चूहों के विभिन्न समूहों पर उपन्यास ऑब्जेक्ट रिकग्निशन (एनओआर) और वाई-मेज़ेपैराडाइम्स का प्रदर्शन किया गया।

NOR प्रतिमान को लगातार TBI [25] द्वारा ख़राब होने की सूचना दी गई है। जैसा कि अपेक्षित था, टीबीआई चूहों को महत्वपूर्ण दृश्य स्मृति घाटे का सामना करना पड़ा और अन्य सभी समूहों की तुलना में, उन्होंने नॉवेलऑब्जेक्ट के पास कम समय बिताया (पी < 0। 01, पी < 0.001, चित्र 2ए, बी) .

उपचार के दोनों तरीकों में नैनो-पीएसओ द्वारा कमी को पूरा किया गया। इसके बाद, हमने स्थानिक स्मृति का मूल्यांकन करने के लिए वाई-भूलभुलैया परीक्षण किया जैसा कि पहले बताया गया है [26]।

दोनों उपचार दृष्टिकोणों में, टीबीआई चूहों ने अनुपचारित नियंत्रण चूहों की तुलना में स्थानिक स्मृति हानि का अनुभव किया (पी <{0}}.001, चित्र 3ए, बी)। जब चूहों ने नैनो-पीएसओ द्वारा उपचार का सेवन किया, तो दोनों उपचार दृष्टिकोणों में स्थानिक स्मृति हानि में सुधार हुआ (पी <0.001)।

चित्र 3. टीबीआई चूहों में नैनो-पीएसओ प्रशासन ने वाई-मेज़टेस्ट में मूल्यांकन की गई स्थानिक स्मृति में सुधार किया। उपचारित या अनुपचारित टीबीआई चूहों को टीबीआई के बाद दो सप्ताह में वाई भूलभुलैया परीक्षण के अधीन किया गया जैसा कि विधियों में वर्णित है: (ए) चूहों को टीबीआई से पहले नैनो-पीएसओ के साथ इलाज किया गया था; और (बी) नैनो-पीएसओ पोस्ट-टीबीआई से उपचारित चूहे सापेक्ष समय के वरीयता सूचकांक का प्रतिनिधित्व करते हैं जो चूहों ने पुराने हाथ की तुलना में नए हथियार की खोज में बिताया।

वन-वे एनोवा द्वारा सांख्यिकीय विश्लेषण से पता चला कि टीबीआई जानवरों में अन्य सभी समूहों की तुलना में स्थानिक स्मृति में कमी थी। (ए: एफ (3, 36)=16। {15}}1, एन=10; बी: एफ (1, 15)=14.127, पी=0.00 फिशर एलएसडी पोस्ट हॉक, ** पी < 0.01, एन { {18}}).एनएस=महत्वपूर्ण नहीं। मानों को माध्य ± SEM के रूप में प्रस्तुत किया जाता है।

2.2. नैनो-पीएसओ उपचार टीबीआई चूहों में न्यूरोनल मृत्यु को रोकता है

व्यवहार संबंधी प्रयोगों के बाद, जिसमें पाया गया कि नैनो-पीएसओ मस्तिष्क की चोट से होने वाली संज्ञानात्मक क्षति को रोक सकता है, हमने इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री द्वारा सेलुलर स्तरों पर नैनो-पीएसओ की उपस्थिति या अनुपस्थिति में टीबीआई मस्तिष्क क्षति के स्तर पर गौर किया।

चूहों को ख़त्म कर दिया गया और उनके मस्तिष्क को चोट लगने के तीन सप्ताह बाद काटा गया, उस समय और अधिक जैव रासायनिक परिवर्तन पाए गए [25,27]।

टेम्पोरलकोर्टेक्स, हिप्पोकैम्पस के CA3 क्षेत्र और मस्तिष्क के दोनों किनारों पर डेंटेट गाइरस में परिवर्तनों की जांच की गई। मस्तिष्क के दोनों किनारों के परिणामों को प्रत्येक माउस के लिए एक मान में जोड़ा गया था।

आंकड़े 4ए और बी एंटी-न्यूरॉन एंटीबॉडी के साथ मस्तिष्क के इन क्षेत्रों की प्रतिरक्षा क्षमता को दर्शाते हैं, जो परिपक्व न्यूरॉन्स का प्रतीक है। नतीजे बताते हैं कि टीबीआई के बाद न्यूरॉन्स की संख्या में काफी कमी आई थी, लेकिन अगर नैनो-पीएसओ को टीबीआई से पहले या टीबीआई के बाद और चूहों के समाप्त होने तक (तीन सप्ताह बाद) प्रशासित किया गया तो न्यूरॉन्स में ऐसी कमी को रोका गया था।

टीबीआई ने अन्य सभी समूहों की तुलना में कॉर्टेक्स और डेंटेट गाइरस के भीतर न्यूरोनल गिनती में गिरावट को प्रेरित किया (** पी < {0}}.01, *** पी < 0.001), जो तीन सप्ताह में एक महत्वपूर्ण न्यूरोनल हानि का संकेत देता है चोट के बाद (चित्रा 4ए, बी)। दोनों उपचार कॉर्टेक्स और डेंटेट गाइरस में न्यूरोनल गिनती को संरक्षित करते हैं।

हालाँकि, टीबीआई के बाद के उपचार की तुलना में निवारक उपचार ने इन क्षेत्रों में न्यूरोनल हानि को और कम कर दिया (** p < {{0%)। * पी <0.05) (चित्र 4बी)।

2.3. नैनो-पीएसओ का प्रशासन टीबीआई के कारण होने वाली सूजन को कम करता है

टीबीआई एक्सपोज़र के बाद होने वाली न्यूरो-भड़काऊ प्रक्रियाओं का मूल्यांकन जीएफएपी एंटीबॉडी का उपयोग करके प्रतिरक्षा-हिस्टोकेमिकल धुंधला द्वारा प्राप्त किया गया था जो प्रतिक्रियाशील एस्ट्रोसाइट्स को लेबल करता है [28,29]।

धुंधलापन यह जांचने के लिए किया गया था कि क्या चोट लगने के तीन सप्ताह बाद एस्ट्रोसाइट्स टीबीआई के अभिव्यक्ति स्तर में परिवर्तन हुए थे और क्या नैनो-पीएसओ के साथ निवारक या पोस्ट-टीबीआई उपचार ने इन परिवर्तनों को प्रभावित किया था। टेम्पोरल कॉर्टेक्स से प्राप्त मस्तिष्क के टुकड़ों का चोट लगने के तीन सप्ताह बाद अध्ययन किया गया।

जैसा कि चित्र 5 में देखा जा सकता है, टीबीआई एक्सपोज़र ने कॉर्टेक्स में एस्ट्रोसाइट्स में महत्वपूर्ण वृद्धि को प्रेरित किया (पी < {{1%)। क्रमशः (चित्र 5)। जब नैनो-पीएसओ को टीबीआई के बाद एक निवारक या उपचार के रूप में प्रशासित किया गया था, तो इससे कॉर्टेक्स में सक्रिय एस्ट्रोसाइट्स में क्रमशः पी <0.001, पी <0.05 में उल्लेखनीय कमी आई (चित्र 5)।

ये परिणाम प्रदर्शित करते हैं कि टीबीआई के कारण, अनुपचारित टीबीआई की तरह, टीबीआई से पहले नैनो-पीएसओ के साथ इलाज किया गया और टीबीआई के बाद नैनो-पीएसओ के साथ इलाज किया गया, तो न्यूएन (हरा) और डीएपीआई (नीला) [स्केल बार 5 {{15 }} µm के लिए प्रतिरक्षित किया गया। ]; (बी) प्रत्येक प्रयोग के अंतिम बिंदु पर सभी वर्गों (ब्रेग्मा टेम्पोरल कॉर्टेक्स −1.0 6 एनएम और डेंटेट गाइरस −1.34 एनएम) के लिए न्यूरो इम्यूनोस्टेनिंग का मात्रात्मक मूल्यांकन वन-वे एनोवा (कॉर्टेक्स: पीआरई) का उपयोग करके निर्धारित किया गया था। एफ (3, 16)=15.469, पी=0.000 फिशर एलएसडी पोस्ट हॉक, *** पी < 0.0{{46 }}1, एन=5); पीएसओटी (एफ (3, 12) {{20}}.607,पी=0। } फिशर का एलएसडी पोस्ट हॉक, * पी < 0.05 ** पी < 0.01, एन=3-5)), (डीजी: पीआरई (एफ (3, 14)=6.804, पी {{34) }}.000फिशर का एलएसडी पोस्ट हॉक, ** पी < 0.01, एन=4-5); }.000 फिशर एलएसडी पोस्टहॉक, * पी < 0.05, ** पी < 0.01, *** पी < 0.001, एन {{52 }}-4))। एनएस=महत्वपूर्ण नहीं। मानों को ± SEM के रूप में प्रस्तुत किया जाता है।

2.4. नैनो-पीएसओ टीबी1 के बाद COX IV1 गतिविधि को पुनर्स्थापित करता है

यह पहले दिखाया गया था कि AD और CJD जैसे न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों के सहज/आनुवंशिक मॉडल में, COX IV1 की अभिव्यक्ति, कोशिकाओं में ऊर्जा उत्पादन के लिए एक महत्वपूर्ण माइटोकॉन्ड्रियल एंजाइम, काफी कम हो जाती है और COX IV2 द्वारा प्रतिस्थापित की जाती है, जो उच्च स्तर के तहत कार्य कर सकती है। आरओएस [24,30]। हालाँकि, यह एक अस्थायी प्रभाव है जब तक कि आरओएस के ऐसे स्तर के परिणामस्वरूप अंततः एपोप्टोसिस और कोशिका मृत्यु नहीं हो जाती।

नैनो-पीएसओ प्रशासन आरओएस स्तर को कम करता है और COX अभिव्यक्ति को पुनर्स्थापित करता है [30]। इसलिए, इस कार्य में, हमने परीक्षण किया कि क्या यह टीबीआई का भी मामला है, जो सामान्य चूहों के कारण होने वाली बाहरी चोट है।

इस आशय के लिए, जैसा कि ऊपर बताया गया है, हम मस्तिष्क के टुकड़ों को COX IV1 एंटीबॉडी से प्रतिरक्षित करते हैं। चित्र 6 से पता चलता है कि, जैसा कि आनुवांशिक बीमारियों के मामले में था, TBI मस्तिष्क में क्षति के तीन सप्ताह बाद भी COX IV1 के स्तर में कमी का कारण बनता है।

इस मामले में, और जैसा कि [30,31] से पहले दिखाया गया है, नैनो-पीएसओ का प्रशासन नियंत्रण और पूर्व और बाद के टीबीआई चूहों दोनों में COX IV1 स्तर बढ़ाता है। चूंकि COX IV1 के स्तर में वृद्धि कोशिकाओं की ऑक्सीडेटिव स्थिति को दर्शाती है, हम निष्कर्ष निकालते हैं कि नैनो-PSO न केवल TBI-प्रभावित चूहों में, बल्कि नियंत्रण चूहों में भी ROS स्तर को कम कर सकता है।

चित्र 6. नैनो-पीएसओ उपचार ने सभी चूहों में माइटोकॉन्ड्रियल COX IV1 अभिव्यक्ति को बहाल किया: (ए) उपचारित और अनुपचारित नियंत्रणों के साथ-साथ अनुपचारित टीबीआई से मस्तिष्क के टेम्पोरल कॉर्टेक्स के माध्यम से कोरोनल सेक्शन, टीबीआई से पहले नैनो-पीएसओ के साथ इलाज किया गया और नैनो के साथ इलाज किया गया। पीएसओ पोस्ट-टीबीआई को COX IV1 (लाल) और DAPI (नीला) [स्केल बार 50 µm] के लिए प्रतिरक्षित किया गया; (बी) प्रत्येक प्रयोग के अंत बिंदु पर सभी वर्गों (ब्रेग्मा टेम्पोरल कॉर्टेक्स −1.06 एनएम) के लिए COX IV1 इम्यूनोस्टेनिंग का मात्रात्मक मूल्यांकन वन-वे एनोवा (एफ (4, 12)=45 द्वारा निर्धारित किया गया था। .101, पी=0.000 फिशर एलएसडी पोस्टहॉक, ** पी <0.01, *** पी <0.001, एन=3-4)। एनएस=महत्वपूर्ण नहीं। मानों को माध्य ± SEM के रूप में प्रस्तुत किया जाता है।

2.5. नैनो-पीएसओ टीबीआई के बाद एसआईआरटी1 और एसवाईपी स्तर को बढ़ाता है

कॉर्टेक्स में एनएडी-निर्भर डीएसेटाइलसेसिर्टुइन -1 के लिए एक मार्कर, एसआईआरटी 1 के कुल स्तर के इम्यूनोब्लॉट की जांच टीबीआई (चित्र 7) के तीन सप्ताह बाद सभी चूहों के लिए की गई थी। SIRT1 स्तर में कमी पाई गई।

ये परिणाम हमारी प्रयोगशाला [32] के एमिल्ड टीबीआई मॉडल के साथ पिछले अध्ययन के अनुरूप हैं। हालाँकि, इस कमी को नैनो-पीएसओ के साथ रोका गया था जब इसे घटना के तुरंत बाद कई हफ्तों तक प्रशासित किया गया था।

चित्र 7बी नैनो-पीएसओ से उपचारित या अनुपचारित नियंत्रण चूहों के मस्तिष्क समरूपों के साथ-साथ टीबीआई या पोस्ट-टीबीआई-उपचारित चूहों से सिनैप्टिक संरचनाओं के लिए एक मार्कर, सिनैप्टोफिसिन (एसवाईपी) के कुल स्तर का एक इम्युनोब्लॉट दिखाता है।

नतीजे बताते हैं कि, चित्र 4 ए और बी में दिखाए गए न्यूरोनल मौत के साथ-साथ, सिनैप्टिक क्षति भी टीबीआई के कारण हुई थी। हालांकि, इस क्षति को रोका जा सकता है यदि नैनो-पीएसओ जैसे मजबूत और मस्तिष्क-निर्देशित एंटीऑक्सीडेंट को तुरंत कई हफ्तों तक प्रशासित किया जाता है क्षति पहुँचाने के बाद.

यह पहले दिखाया गया है कि अधिकांश प्रभावित न्यूरॉन्स चोट के तुरंत बाद नहीं मरे, बल्कि टीबीआई [33] के कारण होने वाले व्यापक ऑक्सीडेटिव तनाव के कारण कुछ दिनों में मर गए। इसलिए, तत्काल एंटीऑक्सीडेंट उपचार लंबे समय में व्यापक क्षति को रोकने के लिए पर्याप्त कुशल हो सकता है। दौड़ना।

चित्र 7. टीबीआई चूहों के कॉर्टेक्स में एसआईआरटी1/एसवाईपी अभिव्यक्ति पर नैनो-पीएसओ का प्रभाव: (ए) उपचारित और अनुपचारित नियंत्रणों के दाहिने कॉर्टेक्स से ब्रेनहोमोजेनेट्स, साथ ही टीबीआई और नैनोपीएसओ-उपचारित पोस्ट-टीबीआई चूहों को इम्यूनोब्लॉट किया गया। SIRT1 और TUB के साथ क्रमशः (110 केडीए, 50 केडीए) का पता चला। SIRT1 के इम्यूनोरिएक्टिव बैंड का मात्रात्मक विश्लेषण इमेज जांड द्वारा निर्धारित किया गया था और नियंत्रण प्रोटीन TUB के विरुद्ध सामान्यीकृत किया गया था।

नियंत्रण की तुलना में टीबीआई चूहों के कॉर्टेक्स में चोट के बाद एसआईआरटी1 का स्तर 3{3}} दिनों में काफी कम हो गया था। नैनो-पीएसओ उपचार ने इस कमी को रोका ** पी <0.01। वन-वे एनोवा ने चोट के बाद उपचार प्राप्त करने वाले एसआईआरटी1 चूहों की अभिव्यक्ति में महत्वपूर्ण वृद्धि का खुलासा किया। (एफ (3, 20)=1.084, पी=0.002, एन=5 फिशर एलएसडी पोस्ट हॉक)।

(बी) उपचारित और अनुपचारित नियंत्रणों के दाहिने कॉर्टेक्स के साथ-साथ टीबीआई और नैनो-पीएसओ उपचारित पोस्ट-टीबीआई चूहों के मस्तिष्क समरूपता को क्रमशः (37 केडीए, 50 केडीए) पर पाए गए एसवाईपी और टीयूबी के साथ इम्यूनोब्लॉट किया गया था।

एसवाईपी के इम्यूनोरिएक्टिव बैंड का मात्रात्मक विश्लेषण इमेज जे द्वारा निर्धारित किया गया था और नियंत्रण प्रोटीन टीयूबी के खिलाफ सामान्यीकृत किया गया था।

एक-तरफ़ा एनोवा ने उन चूहों में एसवाईपी की अभिव्यक्ति में महत्वपूर्ण वृद्धि का खुलासा किया, जिन्हें टीबीआई समूह (एफ (3,20) ​​= 1.084, पी {{6} की तुलना में टीबीआई के बाद उपचार प्राप्त हुआ था। }.379, फिशर का एलएसडी पोस्ट हॉक * पी <0.5, एन=4-5)। एनएस=महत्वपूर्ण नहीं है। मानों को माध्य ± SEM के रूप में प्रस्तुत किया जाता है।

प्रत्येक ग्राफ़ के नीचे, सभी समूहों के बीच दाएं कॉर्टेक्स में SIRT1/SYP और घरेलू प्रोटीन ट्यूबुलिन (TUB) के स्तर की एक प्रतिनिधि छवि प्रस्तुत की गई है।

For more information:1950477648nn@gmail.com