इबेरियन प्रायद्वीप में बेयरबेरी (आर्कटोस्टाफिलोस उवा-उर्सी, एरिकासी) के प्राकृतिक वितरण रेंज में जनसंख्या स्तर पर फेनोलिक यौगिक सामग्री और आनुवंशिक विविधता

संपर्क: ऑड्रे हू Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ईमेल:audrey.hu@wecistanche.com

सार:बेयरबेरी (आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सी) एक औषधीय पौधा है जो पारंपरिक रूप से मूत्र पथ के संक्रमण के उपचार के लिए उपयोग किया जाता है, क्योंकि इसमें उच्च सामग्री होती है।अर्बुतिन(हाइड्रोक्विनोन-डी-ग्लूकोसाइड), जो अब मुख्य रूप से सौंदर्य प्रसाधनों में प्राकृतिक त्वचा-सफेद करने वाले एजेंट के रूप में उपयोग किया जाता है। बेयरबेरी को प्राकृतिक के रूप में भी प्रस्तावित किया गया हैएंटीऑक्सिडेंटपत्तियों में फेनोलिक यौगिकों की उच्च सामग्री के कारण एडिटिव। हमने बेयरबेरी की 42 जंगली आबादी में फेनोलिक यौगिकों पर भिन्नता का अध्ययन किया, जिसका उद्देश्य यह स्पष्ट करना है कि क्या आंतरिक जैविक, जलवायु और / या भौगोलिक कारक इबेरियन प्रायद्वीप में इसके प्राकृतिक वितरण में फेनोलिक सामग्री को प्रभावित करते हैं। एक अक्षांश और ऊंचाई ढाल में आबादी में तीन साल की अवधि (2014-2016) में शरद ऋतु के दौरान भालू के पत्ते एकत्र किए गए थे। मेथनॉलिस के अर्क ने कुल फिनोल सामग्री और विभिन्न फेनोलिक प्रोफाइल के संबंध में भिन्नता की एक विस्तृत श्रृंखला दिखाईअर्बुतिन(इस प्रमुख घटक का स्तर 87 से 232 mg/g dr wt तक भिन्न होता है), लेकिन कैटेचिन और माइरिकेटिन सामग्री भी, जो भौगोलिक और जलवायु कारकों से प्रभावित थे। जीनोम के आकार पर मध्यम स्तर की भिन्नता - प्रवाह साइटोमेट्री द्वारा मूल्यांकन - और दो प्लास्टिड डीएनए क्षेत्रों पर भी आबादी के बीच पाया गया। आबादी का आनुवंशिक और साइटोजेनेटिक भेदभाव कमजोर था लेकिन फाइटोकेमिकल विविधता के साथ महत्वपूर्ण रूप से जुड़ा हुआ था। उच्च के साथ कुलीन बेरबेरी जीनोटाइपएंटीऑक्सिडेंटबाद में क्षमता की पहचान की गई।

कीवर्ड: अर्बुतिन; आनुवंशिक और फाइटोकेमिकल परिवर्तनशीलता; जीनोम का आकार; हैप्लोटाइप्स; प्राकृतिक;एंटीऑक्सीडेंट

सिस्टैंच प्राकृतिक एंटीऑक्सीडेंट हैं

1 परिचय

पौधे विशेष मेटाबोलाइट्स का संश्लेषण समय (यानी, ओटोजेनी, फेनोलॉजी, और प्रेरित रक्षा), और स्थान में भिन्न होता है, क्योंकि यह पर्यावरणीय परिस्थितियों में पौधों के अनुकूलन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, जबकि आनुवंशिक भिन्नता भी रसायन विविधता के लिए जिम्मेदार है [1]। इन यौगिकों के बीच, फिनोल में मोनो- और पॉलिमरिक संरचनाओं की एक विविध सरणी होती है जो शारीरिक भूमिकाओं की एक विस्तृत श्रृंखला को पूरा करती है [2]। विशेष मेटाबोलाइट्स का जैवसंश्लेषण तापमान, वर्षा या सौर विकिरण जैसे पर्यावरणीय कारकों से बहुत प्रभावित होता है, जो अक्सर अक्षांशीय, अनुदैर्ध्य, या ऊंचाई वाले ढाल के अधीन होते हैं। विशेष रूप से, फेनोलिक यौगिकों का संचय यूवी-बी (280–315 एनएम) विकिरण के बढ़े हुए स्तरों के लिए एक सामान्य प्रतिक्रिया है। भूमध्यसागरीय क्षेत्र में गर्मियों के दौरान और उच्च ऊंचाई पर उगने वाले पौधों में विशिष्ट यौगिक भिन्नता की सूचना दी गई है, जहां यूवी-बी की एक उच्च घटना होती है और दालचीनी एसिड और फ्लेवोनोइड्स ने उच्चतम यूवी अवशोषण दर [3] दिखाई है।

अर्बुतिन(हाइड्रोक्विनोन-डी-ग्लूकोसाइड) एक साधारण फिनोल यौगिक है जिसमें कुछ प्रजातियों की पत्तियों में एक प्रतिबंधित घटना होती है जैसे कि अर्बुटस, आर्कटोस्टाफिलोस, पाइरस, या वैक्सीनियम। अर्बुटिन का मुख्य प्राकृतिक स्रोत, बियरबेरी (आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सि एल.) स्प्रेंग।) का उपयोग सदियों से मूत्र पथ के संक्रमण और अन्य गुर्दे की बीमारियों के इलाज के लिए किया जाता रहा है [4], और हर्बल फॉर्मूलेशन आजकल भी तैयार किए जाते हैं [5]। पिछले वर्षों में, के आवेदनों का स्पेक्ट्रमअर्बुतिनव्यापक रूप से, कॉस्मेटिक उद्योग में एक प्राकृतिक त्वचा-सफेद करने वाले एजेंट के रूप में [6] और इसके कारण नैदानिक ​​​​उपचारों मेंएंटीऑक्सिडेंट, एंटीबायोटिक, विरोधी भड़काऊ, और एंटीट्यूमर गुण [7]। नतीजतन, अतिरिक्त प्राकृतिक स्रोतों को खोजने में रुचि बढ़ रही हैअर्बुतिन, साथ ही जैव-तकनीकी प्रक्रियाएं जो रासायनिक संश्लेषण को प्रतिस्थापित कर सकती हैं [8,9]। इस संदर्भ में, धतूरा इनोक्सिया सेल संस्कृतियों का उपयोग करके अर्बुटिन का इन विट्रो उत्पादन पायलट पैमाने पर पहुंच गया है [10]।

निम्न के अलावाअर्बुतिन, अन्य फेनोलिक यौगिक A. uva-ursi सक्रिय गुणों में योगदान करते हैं, जैसे कि फ्लेवोनोइड्स और टैनिन [11,12], जिसमें से कैटेचिन और कोरिलागिन क्रमशः सबसे अधिक प्रासंगिक पत्तियां हैं [13]। खाद्य उद्योग में पादप फिनोल के रूप में प्राकृतिक यौगिक सिंथेटिक की जगह ले रहे हैंएंटीऑक्सिडेंटपरिरक्षक [14]। A. uva-ursi का उपयोग एक योज्य के रूप में किया गया है, विशेष रूप से मांस उत्पादों में [15-19] लेकिन सक्रिय पैकेजिंग [20] में भी। अंत में, चमड़ा उद्योग के लिए टैनिंग एजेंटों के स्रोत के रूप में ए. यूवा-उर्सी की क्षमता हाल ही में प्रस्तावित की गई है [21]।

यूरोपियन मेडिसिन एजेंसी [5] के "बेयरबेरी लीफ" मोनोग्राफ ने का न्यूनतम 7 प्रतिशत प्रस्तावित कियाअर्बुतिनहर्बल तैयारियों के लिए आवश्यकता के रूप में सूखे पत्तों में सामग्री। पिछले दशकों में किए गए अध्ययनों में बताया गया है कि बेरबेरी के पत्तों में अर्बुटिन की मात्रा 0 प्रतिशत से 18 प्रतिशत तक भिन्न होती है, जिसे विश्लेषणात्मक प्रक्रियाओं, प्राकृतिक परिवर्तनशीलता, विकास की स्थिति और कटाई की तारीख [4] द्वारा समझाया गया है। अर्बुटिन सामग्री आमतौर पर उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी [4,12,22-24] द्वारा निर्धारित की जाती है, और पिछले अध्ययनों में उच्च का पता चला हैअर्बुतिनवसंत में एकत्र किए गए लोगों की तुलना में गिरावट में एकत्र किए गए बियरबेरी पौधों में सामग्री [4]। विविध बियरबेरी केमोटाइप का वर्णन किया गया है, जो भौगोलिक वितरण और ए। यूवा-उर्सी की उप-प्रजातियों में अंतर-विशिष्ट भेदभाव से जुड़ा हुआ है। रिपोर्ट की गई सबसे हड़ताली फाइटोकेमिकल विविधता ए। यूवा-उर्सी सबस्प में अर्बुटिन की अनुपस्थिति है। स्टिपिटाटा पैकर और डेनफोर्ड, लेकिन मिथाइल-अर्बुटिन, एलाजिक एसिड, या मायरिकेटिन सामग्री में अंतर को भी संदर्भित किया गया है। बेयरबेरी के पत्तों में क्वेरसेटिन भी मौजूद होता है, जिसमें एग्लीकोन्स और साथ ही उनके 3-O-ग्लाइकोसाइड अधिक सामान्यतः पाए जाने वाले फ्लेवोनोइड्स [4] होते हैं। हालाँकि, इनमें से अधिकांश अध्ययन कई दशक पहले किए गए थे, और आजकल बियरबेरी में अंतर-विशिष्ट भिन्नता को निरंतर माना जाता है। वर्णित 14 उप-प्रजातियां, जिनमें से एक स्पेन से है (ए। उवा-उर्सि सबस्प। क्रैसिफोलियस (ब्रौन-ब्लैंक।) रिवास मार्ट। पूर्व टोरे, अलकाराज़ और एमबी क्रेस्पो), वर्तमान में गैर-स्वीकृत नाम हैं और ए। उवा-उर्सी का पर्याय हैं। 25]। इसलिए औद्योगिक उद्देश्यों के लिए विभिन्न स्थानों से एकत्रित कच्चे माल में वास्तव में मौजूद यौगिकों पर हमारे ज्ञान को बेहतर बनाने के लिए नई जांच की आवश्यकता है क्योंकि ए यूवा-उर्सी के पत्तों के रासायनिक प्रोफाइल में फिनोल, टैनिन, की एक विविध सरणी शामिल करने के लिए वर्णित किया गया है। और फ्लेवोनोइड्स हाल के अध्ययनों में अंतर-विशिष्ट स्तर [23,26,27] पर अंतर की जांच के लिए किए गए।

जनसंख्या स्तर पर आनुवंशिक (साइटोजेनेटिक सहित) विविधता विभिन्न पर्यावरणीय परिस्थितियों के अनुकूलन को बढ़ावा देती है [28]। औषधीय और सुगंधित पौधों में विशेष चयापचयों के उत्पादन पर पॉलीप्लाइडाइजेशन के प्रभावों की हाल ही में समीक्षा की गई [29]। इस संदर्भ में, जीनोम आकार पौधे की परिवर्तनशीलता के आकलन में एक बड़े पैमाने पर इस्तेमाल किया जाने वाला पैरामीटर है, क्योंकि अक्सर अंतर-विशिष्ट भिन्नता का पता लगाया जाता है ([30], और उसमें संदर्भ), कई अन्य जैविक लक्षणों के साथ सहसंबद्ध, और विकासवादी प्रक्रियाओं में एक प्रासंगिक भूमिका निभाता है [31-35] ]. हालांकि, परमाणु डीएनए राशि (यानी जीनोम आकार) और फाइटोकेमिकल विविधता के बीच संबंध को संबोधित करने वाले अध्ययन बहुत दुर्लभ हैं [36,37]। फाइटोकेमिकल और आनुवंशिक विविधता के बीच संबंध का आकलन परमाणु लेकिन विशेष रूप से प्लास्टिडडीएनए मार्कर [38] का उपयोग करके किया गया है, विशेष रूप से औषधीय [39] और खेती की गई [40] पौधों की प्रजातियों में।

बेयरबेरी व्यापक रूप से पूरे सर्कंबोरियल क्षेत्र में वितरित किया जाता है, लेकिन यूरोप में अधिकांश एकत्रित जंगली आबादी पूर्वी देशों, ऑस्ट्रिया, स्विट्जरलैंड, इटली और स्पेन में स्थित है। आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सि स्पेन के पूर्वी मध्य भाग में, पहाड़ों में, में बढ़ता है। समुद्र तल से 550 से 2350 मीटर (एएसएल) की ऊंचाई तक। यह उत्तर में अधिक आम है क्योंकि निचले अक्षांशों पर स्थित आबादी कम होती है और आमतौर पर कम व्यक्ति होते हैं। स्पेन में arbutin सामग्री परिवर्तनशीलता के बारे में मौजूदा अध्ययनों में उत्तर-पूर्वी आबादी में 8 प्रतिशत से लेकर [41] और जर्मनी में किए गए एक अध्ययन [42] में मूल्यांकन किए गए स्पेनिश पौधों की सामग्री में 19 प्रतिशत के मूल्यों को संदर्भित किया गया है। हमारे अध्ययन का उद्देश्य स्पेन में बियरबेरी के प्राकृतिक वितरण में फाइटोकेमिकल भिन्नता की व्याख्या करते हुए जीनोम आकार और आनुवंशिक विविधता सहित कारकों को स्पष्ट करना है। हमारे परिणाम फार्मास्यूटिकल, कॉस्मेटिक और खाद्य उद्योगों के लिए पौधों की सामग्री के चयन में योगदान दे सकते हैं।

त्वचा को गोरा करने वाला भोजन: CISATNCHE

2. परिणाम और चर्चा

2.1. रासायनिक विविधता विश्लेषण

42 स्पेनिश स्थानों में उगने वाले कुल 249 पौधों से बेयरबेरी के पत्तों का नमूना लिया गया, और तीन साल की अवधि में, 2014–2016 (चित्र 1, टेबल एस1) ने अलग-अलग शुष्क वजन (डॉ डब्ल्यूटी) प्रतिशत दिखाया, जिसमें से लेकर 46.7 (LO) से 55.1 प्रतिशत (CP), औसत 50.1 ± 2.7 प्रतिशत (डेटा नहीं दिखाया गया) के साथ। 2014 और 2015 में एकत्र किए गए नमूनों से तैयार किए गए मेथनॉलिस अर्क को कुल फिनोल और अर्बुटिन सामग्री निर्धारण के लिए नियोजित किया गया था। हमने पौधों के बीच महत्वपूर्ण अंतर (पी <0.001) के="" साथ="" दोनों="" मापदंडों="" के="" लिए="" निरंतर="" विविधताओं="" की="" एक="" विस्तृत="" श्रृंखला="" देखी।="" शरद="" ऋतु="" 2014="" में="" नमूने="" लिए="" गए="" 80="" पौधों="" के="" पत्तों="" के="" अर्क="" (चित्र="" 2ए)="" में="" 103.3="" ±="" 4.8="" मिलीग्राम="" जीएई/जी="" डॉ="" डब्ल्यूटी="" (नमूना="" एलआई-4)="" से="" लेकर="" 206.4="" ±="" 6.5="" मिलीग्राम="" जीएई/जी="" डॉ="" डब्ल्यूटी="" (एसआर)="" तक="" की="" कुल="" फेनोलिक="" सामग्री="" दिखाई="" गई।="" -2),="">अर्बुतिनसामग्री में 92.0 ± 3.0 mg/g dr wt (AN-6) से 194.2 ± 5.6 mg/g dr wt (SE-8) में उतार-चढ़ाव आया। 94 पौधों (चित्र 2बी) से 2015 में एकत्रित पत्तियों से तैयार किए गए अर्क के विश्लेषण ने 110.5 ± 3.6 मिलीग्राम GAE/g dr wt (PI-4) से 200.9 ± 9.8 तक व्यापक फाइटोकेमिकल भिन्नता दिखाई। कुल फेनोलिक सामग्री में mg GAE/g dr wt (LO-4), जबकि arbutin सामग्री 87.1 ± 0.4 mg/g dr wt (ET-2) और 211.5 ± 5.9 mg/g dr wt (LI) के बीच थी। -2)। इसके अलावा, संग्रह के वर्ष के बावजूद, कुल फिनोल में महत्वपूर्ण अंतर औरअर्बुतिनअधिकांश आबादी (डेटा नहीं दिखाया गया) के लिए एक ही स्थान पर उगने वाले भालू के पौधों के बीच सामग्री का पता चला था। अरबी के पत्तों के अर्क में कुल फिनोल सामग्री के साथ अरबुटिन का स्तर काफी सहसंबद्ध था क्योंकि हमने {0} के महत्वपूर्ण पियर्सन गुणांक का अनुमान लगाया था। 2014 के लिए .332 (पी=0.003), और 2015 डेटा के लिए 0.289 (पी=0.005)। दोनों वर्षों में नमूने लिए गए 48 पौधों की अर्बुटिन सामग्री में कोई खास अंतर नहीं आया (p=0.380)।

आबादी के भीतर पाई गई परिवर्तनशीलता के बावजूद, और फसल के वर्ष के बावजूद, विचरण के विश्लेषण से पता चला है कि बियरबेरी पत्ती के अर्क की अर्बुटिन सामग्री भी निर्भर करती है (पी <{0}}। 0="" 0="" 1)="" जनसंख्या="" स्थान="" (चित्र="" 3ए,बी),="" जैसा="" कि="" 2015="" (पी=""><0.001, चित्रा="" 3बी)="" में="" विश्लेषण="" किए="" गए="" भालूबेरी="" के="" पत्तों="" की="" कुल="" फिनोल="" सामग्री="" के="" लिए="" हुआ।="" इसके="" विपरीत,="" कुल="" फिनोल="" सामग्री="" में="" महत्वपूर्ण="" अंतर="" नहीं="" देखा="" गया="" था="" (पी="0.080)" 2014="" में="" नमूने="" लिए="" गए="" 10="" आबादी="" के="" बीच,="" जो="" अपेक्षाकृत="" छोटे="" क्षेत्र="" में="" स्थित="" थे,="" लेकिन="" 424="" (बीए)="" से="" ऊंचाई="" की="" एक="" विस्तृत="" श्रृंखला="" में="" वितरित="" किए="" गए="" थे।="" जनसंख्या)="" से="" 1410="" m="" asl="" (pa="" जनसंख्या)।="" ऊंचाई="" में="" यह="" भिन्नता="" जलवायु="" परिस्थितियों="" (तालिका="" s1)="" में="" अंतर="" से="" जुड़ी="" थी,="" क्योंकि="" उच्च="" ऊंचाई="" वाले="" स्थानों="" को="" निम्न="" औसत="" तापमान="" (पियर्सन="" के="" सहसंबंध="" गुणांक,="" r="−0.666," p=""><0.001) और="" उच्च="" वार्षिक="" अवक्षेपण="" की="" विशेषता="" थी।="" r="0.485," p=""><0.001), जिसके="" परिणामस्वरूप="" कम="" वैश्विक="" विकिरण="" स्तर="" (r="-0.390," p=""><0.001) हो="" गया।="" इसके="" अलावा,="" इस="" डेटा="" सेट="" से="" वार्षिक="" वर्षा="" और="" भालूबेरी="" पौधों="" की="" कुल="" फिनोल="" सामग्री="" के="" बीच="" एक="" कम="" लेकिन="" महत्वपूर्ण="" सकारात्मक="" सहसंबंध="" का="" अनुमान="" लगाया="" गया="" है="" (स्पीयरमैन="" का="" गुणांक="" rho="0.256," p="0.022)," जबकि="" 2015="" के="" डेटा="" सेट="" से="" जब="" हमने="" एक="" बड़े="" क्षेत्र="" में="" आबादी="" का="" नमूना="" लिया,="" तो="" हमने="" वार्षिक="" वर्षा="" और="" अर्बुटिन="" सामग्री="" (rho="0.246," p="0.017)" के="" बीच="" एक="" महत्वपूर्ण="" सकारात्मक="" सहसंबंध="" का="" पता="" लगाया।="" यह="" महत्वपूर्ण="" सहसंबंध="" इंगित="" करता="" है="" कि="" उत्तरी="" स्थानों="" में="" और="" अपेक्षाकृत="" अधिक="" ऊंचाई="" पर="" उगने="" वाले="" भालू="" के="" पौधे="" अक्सर="" अधिक="" दिखाई="" देते="">अर्बुतिनसामग्री (rho=0.217, p=0.035 और rho=0.269, p=0.009, क्रमशः)। जैसा कि उल्लेख किया गया है, ये उच्च अर्बुटिन सामग्री बेयरबेरी पत्तियों की उच्च कुल फिनोल सामग्री के लिए महत्वपूर्ण रूप से सहसंबद्ध हैं, जो समान (औसतन 154.4 ± 19.6 मिलीग्राम जीएई / जी डॉ डब्ल्यूटी) के रूप में कार्यरत अन्य पौधों की प्रजातियों के जलीय अर्क में पाए गए थे।एंटीऑक्सिडेंटखाद्य उद्योग में एडिटिव्स [43], जैसे रोज़मेरी (185.0 मिलीग्राम GAE/g dr wt), चाय (149.3 mg GAE/g dr wt), या अमरूद (154.4 mg GAE/g dr wt)। ये परिणाम पिछले संदर्भों के अनुरूप हैं और व्रोना एट अल द्वारा किए गए एक अध्ययन में इसकी पुष्टि की गई थी। [20] 2015 में एकत्र किए गए कुछ स्पेनिश बियरबेरी पत्ती के नमूनों का उपयोग करते हुए, जिसके लिए उच्चएंटीऑक्सिडेंटक्षमता उच्च के साथ जुड़ी हुई थीअर्बुतिनसामग्री। इस उद्देश्य के लिए एलीट बियरबेरी जीनोटाइप की भी पहचान की जा सकती है, जैसे कि एलओ आबादी के व्यक्ति 1, 4, 7, और 8, जो दो वर्षों के अध्ययन में औसतन 183.3 ± 16.4 मिलीग्राम GAE/g dr wt जमा हुए।

फेनोलिक विविधता के पैटर्न को प्रभावित करने वाले जलवायु और भौगोलिक कारकों को और अधिक स्पष्ट करने के लिए, हमने 29 स्थानों में उगने वाले पतझड़ 2016:140 भालू के पौधों में अधिक विस्तृत नमूना संग्रह किया, और हमने पांच फेनोलिक यौगिकों की मात्रा निर्धारित की। (चित्र S1a) जिन्हें एसीटोनिट्राइल/जल प्रवणता (चित्र S1b) में मानकों के साथ सह-क्षालन द्वारा पहचाना गया था। विश्लेषण ने आर्बुटिन, कैफिक एसिड, कैटेचिन, मायरिकेटिन और क्वेरसेटिन ग्लूकोसाइड सामग्री के लिए निरंतर भिन्नता की विस्तृत श्रृंखला दिखाई, पौधों के बीच महत्वपूर्ण अंतर के साथ जो आमतौर पर आबादी के भीतर भी देखे गए थे (डेटा नहीं दिखाया गया)। प्रमुख फेनोलिक घटकों के लिए, हमने पाया कि आर्बुटिन की मात्रा 91.1 ± 5.0 (LB{{10}}) से लेकर 232.4 ± 2.8 मिलीग्राम/जी डॉ डब्ल्यूटी (पीटी{{15) तक थी। }}), जबकि कैटेचिन सामग्री 4.1 ± 0.1 (AF{{20}}) से लेकर 45.5 ± 1.4 mg/g dr wt (LB-5) तक थी। निर्धारित दो अन्य फ्लेवोनोइड्स के संबंध में, कई आबादी के कुछ पौधों में मायरिकेटिन का पता नहीं चला था, जबकि पीओ {{3 0}} में 21.2 ± 1.2 मिलीग्राम/जी डॉ डब्ल्यूटी तक पहुंच गया था, और क्वेरसेटिन ग्लूकोसाइड 3.8 ± 0.1 (सीओ) से भिन्न था। -3) से 22.8 ± 0.8 मिलीग्राम/जी डॉ डब्ल्यूटी (बीटी-3)। कैफिक एसिड की निचली सामग्री बियरबेरी पत्ती के अर्क में निर्धारित की गई थी, जो 1.8 ± 0.0 (IZ-1) से लेकर 7.1 ± 0.3 mgPlants /g dr wt (SI-4) तक भिन्न थी।

व्यक्तियों के बीच भिन्नता के बावजूद, इन पांच यौगिकों (क्रुस्कल-वालिस परीक्षण, पी <{0}}.001, और="" पी="0" के="" लिए="" आबादी="" के="" बीच="" महत्वपूर्ण="" अंतर="" का="" अनुमान="" लगाया="" गया="" था।="" 009="" forcaffeic="" एसिड="" सामग्री)।="" एबी,="" जीयू,="" एलएन,="" और="" एलओ="" प्राकृतिक="" आबादी="" (चित्रा="" 4="" ए)="" के="" पौधों="" में="" औसतन="" उच्च="" अर्बुटिन="" सामग्री="" निर्धारित="" की="" गई="" थी,="" जो="" एलबी="" आबादी="" (186.7="" ±="" 22.3,)="" 193.9="" ±="" 12.1,169.5="" ±="" 10.0,="" और="" 169.2="" ±="" 5.2="" mg/g="" dr="" wt="" सामने="" से="" 111.8="" ±="" 16.0="" mg/g="" dr="" wt,="" क्रमशः)।="" फिर="">अर्बुतिन2015 में भी नमूने लिए गए पौधों की सामग्री वर्षों (p=0.821) के बीच महत्वपूर्ण रूप से भिन्न नहीं थी। जनसंख्या LB ने बदले में उच्च माध्य कैटेचिन स्तर (चित्र 4b) दिखाया, जो आबादी AF और LC (32.8 ± 9.8फ्रंट से 5.7 ± 1.9 और 5.3 ± {{2{{62} में पाई गई इस फ्लेवोनोइड की निम्न माध्य सामग्री से महत्वपूर्ण रूप से भिन्न है। }}}.5 मिलीग्राम/जी डॉ डब्ल्यूटी, क्रमशः)। माध्य मायरिकेटिन और क्वेरसेटिन ग्लूकोसाइड सामग्री को चित्र 4c में दिखाया गया है, जिसमें जनसंख्या AB, CG, LB और PO के बीच महत्वपूर्ण अंतर है, जिसमें उच्च माइरिकेटिन सामग्री (15.1 ± 4. 0, 14.6 ± 5.7, 1 0 है। .7 ± 2.8, और 17.2 ± 3.9 मिलीग्राम / जी डॉ डब्ल्यूटी, क्रमशः), आबादी सीओ और ओडी (क्रमशः 1.2 ± 1.5 और 2.4 ± 3.6 मिलीग्राम / जी डॉ डब्ल्यूटी) से औसत पौधों पर जमा हुए निम्न स्तरों की तुलना में। , और इसका मतलब यह भी है कि क्वार्सेटिन ग्लूकोसाइड सामग्री एए, बीटी, सीपी, आईजेड, और एलबी (15.2 ± 3.7, 15.9 ± 4.6, 11.8 ± 2.3, 15.7 ± 3.4, और 13.1 ± 4.6 मिलीग्राम / जी डॉ डब्ल्यूटी, क्रमशः) में काफी भिन्न है। उस से जनसंख्या CO (4.0 ± 0.1 mg/g dr wt) में। इसके विपरीत, जनसंख्या AB, CE, PT, और SA में 2.1 ± 0.2 mg/g dr wt से औसत caffeic एसिड सामग्री, जनसंख्या AF में 3.5 ± 1.2 mg/g dr wt या 3.4 ± 2.2 mg/g dr wt में जनसंख्या एसआई; इसलिए, इंट्रापॉपुलेशन भिन्नता (औसत सामग्री 2.7 ± 0.8 मिलीग्राम / जी डॉ डब्ल्यूटी) के कारण महत्वपूर्ण अंतर नहीं देखा गया। ये परिणाम व्रोना एट अल द्वारा देखे गए फेनोलिक मेटाबोलाइट्स पर भिन्नता के पूरक हैं। [20], 2015 में सैंपल लिए गए आठ बियरबेरी स्थानों के लिए जिनका विश्लेषण यूपीएलसी®-ईएसआई-क्यू-टीओएफ विथ एमएसई तकनीक का उपयोग करके किया गया था।

2014 और 2015 के बियरबेरी नमूनों के साथ किए गए विश्लेषण में प्राप्त परिणामों के विपरीत,अर्बुतिन2{{10}}16 नमूनों में निर्धारित सामग्री ने विकिरण के साथ कम लेकिन महत्वपूर्ण सकारात्मक सहसंबंध दिखाया (rho=0.256, p=0.002), और अधिकतम औसत तापमान (rho{ {5}}.183, p=0.030), और इसलिए वार्षिक वर्षा मूल्यों (rho=−0.265, p=0.002) के विपरीत सहसंबद्ध थे। ये अंतर ऊंचाई में भिन्नता (rho=−0.192, p=0.023) से भी जुड़े थे, लेकिन इस नकारात्मक सहसंबंध को उल्लिखित निम्न द्वारा समझाया गया था।अर्बुतिनपौंड जनसंख्या से पौधों की सामग्री जो 1720m पर स्थित है। माइरिकेटिन सामग्री के लिए भिन्नता का एक समान पैटर्न देखा गया था क्योंकि इस यौगिक के उच्च स्तर उच्च विकिरण स्तर (rho=0 .226, p=0 के तहत स्थानों में बढ़ने वाले भालू के पौधों से महत्वपूर्ण रूप से जुड़े थे। {{1 {{ 12}}}}07)। कैटेचिन के लिए अर्बुटिन के विपरीत पैटर्न देखा गया था, क्योंकि इस फ्लेवोनोइड और वार्षिक वर्षा (rho=0.398,p <0.0{{23 के="" बीच="" एक="" सकारात्मक="" सहसंबंध="" का="" अनुमान="" लगाया="" गया="" था।="" 0="" {{23)="" }}1),="" और="" नकारात्मक="" सहसंबंध="" तदनुसार="" विकिरण="" के="" साथ="" और="" अधिकतम="" माध्य="" तापमान="" (rho="-0.307," p=""><0.001 और="" rho="−0.470," p=""><0.001,) के="" साथ="" पाए="" गए।="" क्रमश)।="" जलवायु="" कारकों="" में="" इस="" भिन्नता="" ने="" समझाया="" कि="" ऊंचाई="" और="" अक्षांश="" दोनों="" ने="" भालू="" के="" पत्तों="" की="" कैटेचिन="" सामग्री="" को="" प्रभावित="" किया="" (rho="0.410" और="" 0.490,="" क्रमशः,="" p=""><0.001)। 2016="" में="" नमूने="" लिए="" गए="" 29="" स्थानों="" के="" अनुरूप="" फाइटोकेमिकल,="" जलवायु="" और="" भौगोलिक="" डेटा="" के="" साथ="" प्रदर्शन="" किया="" गया="" एक="" प्रमुख="" घटक="" विश्लेषण,="" जिसमें="" दो="" पहले="" घटकों="" ने="" 60="" प्रतिशत="" देखी="" गई="" भिन्नता="" की="" व्याख्या="" की,="" इन="" परिणामों="" की="" पुष्टि="" की="" (चित्र="" 5)।="" हमने="" कैफिक="" एसिड="" या="" बियरबेरी="" पौधों="" की="" क्वेरसेटिन="" ग्लूकोसाइड="" सामग्री="" और="" या="" तो="" जलवायु="" या="" भौगोलिक="" कारकों="" के="" बीच="" किसी="" भी="" महत्वपूर्ण="" सहसंबंध="" का="" पता="" नहीं="" लगाया,="" हालांकि="" हमने="" माइरिकेटिन="" और="" क्वेरसेटिन="" ग्लूकोसाइड="" सामग्री="" (rho="0.184," p="" {{31}="" के="" बीच="" मामूली="" लेकिन="" महत्वपूर्ण="" सहसंबंधों="" का="" अनुमान="" लगाया="" था।="" }.030)="" और="" बेयरबेरी="" पौधों="" की="" माइरिकेटिन="" और="" कैफिक="" एसिड="" सामग्री="" (rho="−0.176," p="0.037)" के="">

में भिन्नता के विपरीत जलवायु पैटर्न देखे गएअर्बुतिनबेअरबेरी पौधों की सामग्री से पता चलता है कि, हालांकि इस मेटाबोलाइट के जैवसंश्लेषण में उच्च विकिरण और तापमान की स्थितियों में वृद्धि होने की संभावना है, शायद पानी की कमी भूमध्य और दक्षिणी क्षेत्रों में ए। यूवा-उर्सि के लिए एक सीमित कारक है। डेल वैले एट अल। [44] स्पेन में सिलीन लिटोरिया (कैरियोफिलेसी) के फ्लेवोनोइड संचय के एक अक्षांशीय पैटर्न की सूचना दी, जहां दक्षिणी आबादी में उच्च फ्लेवोनोइड सामग्री निर्धारित की गई थी, क्योंकि अक्षांश यूवी-बी विकिरण और तापमान के साथ नकारात्मक रूप से सहसंबद्ध था, और सकारात्मक रूप से वर्षा के साथ। इबेरियन प्रायद्वीप के दक्षिण और पूर्व में एक उच्च घटना के साथ वैश्विक विकिरण एक स्पष्ट अक्षांशीय ढाल दिखाता है, और एक महत्वपूर्ण भौगोलिक प्रभाव भी है क्योंकि बादल दृढ़ता उच्च ऊंचाई पर इस विकिरण की घटनाओं को नियंत्रित करती है। स्पेन का एक यूवी-विकिरण मानचित्र [45] यूवी-बी और वैश्विक विकिरण डेटा के बीच उच्च सहसंबंध (आर> 0.9) संदर्भित किया गया। इस संदर्भ के अनुसार, भालू की आबादी जो उच्च माध्य दिखाती हैअर्बुतिनहमारे अध्ययन में सामग्री ज्यादातर 2403-2451 जे / एम 2 के यूवी-बी विकिरण स्तर के तहत क्षेत्रों में स्थित है।

बेयरबेरी में कैटेचिन भिन्नता के लिए हमारे परिणामों ने एक भौगोलिक पैटर्न (चित्र 5) दिखाया और यूरोप के उत्तरी देशों के अन्य पौधों की प्रजातियों में किए गए अध्ययनों से सहमत हैं। विशेष मेटाबोलाइट्स की उच्च सामग्री, जैसे फ्लेवोनोइड्स और एंथोसायनिन, उच्च अक्षांशों पर उगने वाले पौधों में रिपोर्ट की गई थी, शायद दिन के उजाले की अवधि और रात के कम तापमान [46] के कारण। इस प्रकार, फिनलैंड की आबादी [47] में अक्षांश और ऊंचाई के साथ जुनिपरस कम्युनिस सुइयों में घुलनशील फेनोलिक सामग्री में वृद्धि हुई, और थ्री रिब्स एसपीपी के फलों में उच्च अक्षांश पर 10-19 प्रतिशत अधिक फेनोलिक सामग्री भी पाई गई। दो फिनिश स्थानों [48] में किस्मों का विश्लेषण किया गया। इन लेखकों ने विकिरण और तापमान के उच्च स्तर के साथ कम फिनोल सामग्री को संबंधित किया। वैक्सीनियम की दो प्रजातियों (एरिकेसी परिवार से भी) के फलों में फ्लेवोनोइड सामग्री ने एक भौगोलिक ढाल दिखाया, जिसमें उत्तरी अक्षांशों में उच्च मात्रा में ऑफफ्लेवोनोइड्स [49,50] थे।

ऊंचाई की भिन्नता के संबंध में, फ्लेवोनोइड के उच्च स्तर को अन्य एरिकसेई प्रजातियों, कॉलुना वल्गरिस की आबादी में निर्धारित किया गया था, जो उच्च ऊंचाई पर बढ़ रहे थे [51]। अल्टिट्यूडिनल ग्रेडिएंट्स ने अर्निका मोंटाना [52] और क्वार्कस रॉबर [53] की स्पेनिश आबादी के विशेष चयापचय को भी प्रभावित किया। बाद के काम ने कुल पत्ती फेनोलिक्स और ऊंचाई की एकाग्रता के बीच महत्वपूर्ण सकारात्मक संबंध का उल्लेख किया, जो केवल फ्लेवोनोइड्स पर निर्भर करता है, इस प्रकार यह सुझाव देता है कि ये यौगिकों ने कुल फेनोलिक्स के लिए संबंध को प्रभावित किया। ये परिणाम कैटेचिन सामग्री पैटर्न के लिए हमारे अनुमानों से सहमत हैं। अंत में, एक वर्षा प्रवणता एक अफ्रीकी औषधीय झाड़ी (मायरोथैमनस फ्लैबेलिफोलिया) में पॉलीफेनोल्स संरचना में महत्वपूर्ण अंतर से जुड़ी थी, जिसके लिए चयापचय संबंधी अंतर आबादी की आनुवंशिक संरचना के अनुरूप थे [54]।

CISTANCHE एंटी एजिंग कर सकता है

2.2. जीनोम आकार और अनुक्रम डेटा विश्लेषण

बेयरबेरी पौधों के जीनोम आकार 2C मान 2.50 से 3.15 pg (तालिका 1) के बीच थे। आबादी के बीच परमाणु डीएनए राशि में थोड़ा अंतर पाया गया है (क्रुस्कल-वालिस 2=87.639, df=36,p=3.39 × 10−6)। बोनफेरोनी सुधार के साथ डन के परीक्षण में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अंतर सामने आए: AL और SI आबादी (Z=−3.972, p=0.024), LE और SI (Z=−4.196, p {{ 21}}.009), और SEऔर SI (Z=-4.236, p=0.008)। पोंटिल्स (पीओ) की आबादी ए। उवा-उर्सि वर.क्रैसिफोलियस का प्रकार का इलाका है, जिसे बाद में ए। यूवा-उर्सी सबस्प के रूप में जोड़ा गया था। क्रैसिफोलियस, और वर्तमान में टैक्सोनॉमिक रूप से नहीं माना जाता है (परिचय देखें), प्रजातियों की अन्य आबादी में प्राप्त मूल्यों की सीमा के भीतर एक मध्यवर्ती मूल्य (2.88 पीजी) है। यह प्रजातियों और पूरे जीनस में परमाणु डीएनए राशि का पहला व्यापक जनसंख्या अध्ययन है क्योंकि आज की एकमात्र उपलब्ध जानकारी एक ही टैक्सोन [55] की एक बाल्कन आबादी से आती है। वहां रिपोर्ट किया गया 2C मान, 2.49 pg, यहां जांचे गए डेटासेट की भिन्नता की सीमा की निचली सीमा पर रखा गया है। जीनोम आकार के मूल्यों और जनसंख्या ऊंचाई के बीच कोई संबंध नहीं पाया गया। व्यक्तियों की डीएनए मात्रा ने के साथ एक कमजोर सकारात्मक महत्वपूर्ण सहसंबंध दिखायाअर्बुतिनसामग्री जब 158 बियरबेरी पौधों के डेटा की तुलना की गई (rho=0.187, p=0.018), जबकि जीनोम आकार और अन्य चर के बीच कोई अन्य महत्वपूर्ण संबंध नहीं पाया गया। यह परिणाम विशेष मेटाबोलाइट्स के उत्पादन में कथित वृद्धि के अनुरूप है जो आमतौर पर पॉलीप्लोइडाइजेशन [29] के बाद औषधीय और सुगंधित पौधों में देखे जाते हैं।

rpl{0}}trnL और psbE-petN इंटरजेनिक स्पेसर्स के लिए नव निर्मित अनुक्रम दो मैट्रिक्स (क्रमशः 566 और 874 बीपी युक्त) में संरेखित किए गए थे, जिन्हें 1440 बीपी के एकल मैट्रिक्स में संयोजित किया गया था। इन प्लास्टिड क्षेत्रों में भिन्नता के स्तर का पता चला था (छह न्यूक्लियोटाइड प्रतिस्थापन और चार इंडेल)। 0.468 (तालिका 1) की कुल हैप्लोटाइप विविधता (Hd) के साथ दस अलग-अलग हैप्लोटाइप पाए गए। अधिकांश आबादी (21) में केवल एक हैप्लोटाइप था, जबकि उनमें से पांच ने व्यक्तियों के बीच कुछ विविधता प्रदर्शित की। सबसे प्रचुर मात्रा में हैप्लोटाइप 1 ने उच्चतम आवृत्ति (71.4 प्रतिशत) दिखाई, उसके बाद हैप्लोटाइप 2 (15.2 प्रतिशत), जबकि बाकी ने बहुत कम आवृत्तियों (0.04-0.01 प्रतिशत) को दिखाया। हैप्लोटाइप का भौगोलिक वितरण चित्र 6 में दिखाया गया है। हाप्लोटाइप 1 32 आबादी में पाया गया था - यह उनमें से 18 में तय किया गया था - सबसे दक्षिणी इलाकों को छोड़कर सभी नमूना क्षेत्रों में वितरित किया गया था। हाप्लोटाइप 2 दस आबादी में पाया गया था और दो दक्षिणी आबादी (एचयू और एलवी) के साथ-साथ पीआर में भी अनन्य हैप्लोटाइप था। हैप्लोटाइप 4 पाइरेनीज़ की तीन आबादी से निजी था, जबकि हैप्लोटाइप 8 पूर्वी इबेरियन प्रायद्वीप से दो आबादी में दिखाई दिया। पारसीमोनी नेटवर्क (चित्र 6) में दिखाए गए विकासवादी संबंधों के संबंध में, अधिकांश हैप्लोटाइप एक या दो उत्परिवर्तन चरणों से जुड़े हुए हैं। हाप्लोटाइप 1 एक केंद्रीय स्थान पर है, जिसमें सात हैप्लोटाइप जुड़े हुए हैं।

पीडीएनए आनुवंशिक और रासायनिक जोड़ीवार दूरी मैट्रिसेस के बीच एक मेंटल परीक्षण ने कमजोर लेकिन महत्वपूर्ण सहसंबंध दिखाया (आर=0.301; पी=0.048) आनुवंशिक भेदभाव और के लिए मापा पांच रासायनिक घटकों की एकाग्रता के बीच 2016 डेटा सेट मेंटल टेस्ट ने 2016 में सैंपल की गई 25 आबादी (आर=0 .103, पी=0 .207) के बीच आनुवंशिक और भौगोलिक दूरी के बीच या इनमें से रासायनिक और भौगोलिक जोड़ीदार दूरी के बीच कोई महत्वपूर्ण संबंध नहीं दिखाया। 25 आबादी (आर=0.191, पी=0.050)। पूरे स्पेन में बेयरबेरी जंगली आबादी के लिए यहां बताई गई फाइटोकेमिकल परिवर्तनशीलता इसलिए pDNA हैप्लोटाइप भिन्नता के मध्यम स्तर के पूरक हैं, जो अन्य पौधों में पाए जाने वाले फ़ाइलोगोग्राफ़िक पैटर्न की तुलना में बेयरबेरी आबादी में पाए जाने वाले उत्तर-दक्षिण आनुवंशिक भेदभाव हैं (जैसे, [56-58]। कम प्रजनन क्षमता वाले पौधों में यह सब एकरूपता अपेक्षित है [59], ए.उवा-उर्सी, जो खराब अंकुरण दर और युवा पौधों की उच्च मृत्यु दर [4] को प्रदर्शित करता है। फिर भी, पीडीएनए द्वारा दिखाया गया मामूली आनुवंशिक भेदभाव जैव रासायनिक के साथ सहसंबद्ध है। पांच फेनोलिक चित्रा 6 के प्रोफाइल से जोड़ीदार दूरी का अनुमान लगाया गया है। आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सी की इबेरियन आबादी पर पीडीएनए हैप्लोटाइप का भौगोलिक वितरण। जनसंख्या कोड तालिका S1 में उन लोगों के अनुरूप हैं, और पाई चार्ट प्रत्येक आबादी में प्रत्येक हैप्लोटाइप दिखाने वाले व्यक्तियों के प्रतिशत का प्रतिनिधित्व करते हैं। आयत, सांख्यिकीय पारसीमोनी नेटवर्क टी के विकासवादी संबंधों को दिखा रहा है n प्लास्टिड हैप्लोटाइप्स ए में पाए जाते हैं। उवा-उर्सि आबादी का प्रतिनिधित्व किया। हैप्लोटाइप को जोड़ने वाली रेखाओं के साथ प्रत्येक पट्टी इस अध्ययन में अनुक्रमित pDNA क्षेत्रों में एक पारस्परिक चरण को इंगित करती है। pDNA आनुवंशिक और रासायनिक जोड़ीदार दूरी मैट्रिसेस के बीच एक मेंटल परीक्षण ने कमजोर लेकिन महत्वपूर्ण सहसंबंध दिखाया (r=0.301; p {{28 }}.048) आनुवंशिक विभेदन और 2016 के डेटा सेट के लिए मापे गए पांच रासायनिक घटकों की सांद्रता के बीच। मेंटल परीक्षण ने 2016 (आर=0.103, पी=0 .207) या इन 25 आबादी के बीच रासायनिक और भौगोलिक जोड़ीदार दूरी के बीच 25 आबादी के बीच आनुवंशिक और भौगोलिक दूरी के बीच कोई महत्वपूर्ण संबंध प्रकट नहीं किया। आर=0.191, पी=0.050)। पूरे स्पेन में बेयरबेरीजंगली आबादी के लिए यहां बताई गई फाइटोकेमिकल परिवर्तनशीलता इसलिए पीडीएनए हैप्लोटाइपवेरिएशन के मध्यम स्तर द्वारा पूरक है, जो अन्य पौधों में पाए जाने वाले फाइलोग्राफिक पैटर्न की तुलना में बेयरबेरी आबादी में पाए जाने वाले उत्तर-दक्षिण आनुवंशिक भेदभाव है (उदाहरण के लिए, [56-58]। यह सब एकरूपता है। कम प्रजनन क्षमता वाले पौधों में अपेक्षित है [59], ए.उवा-उर्सी के रूप में, जो खराब अंकुरण दर और युवा पौध की उच्च मृत्यु दर प्रदर्शित करता है [4]। फिर भी, पीडीएनए द्वारा दिखाया गया मामूली आनुवंशिक भेदभाव प्रोफाइल से अनुमानित जैव रासायनिक जोड़ीवार दूरी के साथ सहसंबद्ध है। पांच फेनोलिक यौगिकों का। आनुवंशिक और फाइटोकेमिकल भिन्नता का यह पैटर्न (जो, जैसा कि उल्लेख किया गया है, भौगोलिक दूरियों से जुड़ा नहीं था), साथ ही जीनोम और अर्बुटिन सामग्री के बीच कमजोर लेकिन महत्वपूर्ण सहसंबंध, यह संकेत दे सकता है कि प्राकृतिक जीनोमिक परिवर्तनशीलता फेनोलिक यौगिकों की उपज को प्रभावित करती है। A. uva-ursi. तथापि, अतिपरिवर्तनीय आणविक m एक अधिक व्यापक जनसंख्या नमूने में आर्कर्स इन फ़ाइलोग्राफिक पैटर्न और आनुवंशिक और जैव रासायनिक परिवर्तनशीलता के बीच संबंध की पुष्टि करने के लिए आवश्यक हैं।

सिस्टैंच में एंटी-ऑक्सीडेशन प्रभाव है

3. सामग्री और तरीके

3.1. संयंत्र के लिए सामग्री

फाइटोकेमिकल विश्लेषण के लिए, 42 आबादी में उगने वाले कुल 249 भालू के पौधों को 2014, 2015 और 2016 की शरद ऋतु में नमूना लिया गया था, जो कि इबेरियन प्रायद्वीप (चित्रा 1 और तालिका S1) में इस पौधों की प्रजातियों के प्राकृतिक वितरण का प्रतिनिधि था। सबसे पहले, 2014 की शरद ऋतु में, हमने अपेक्षाकृत छोटे क्षेत्र (लगभग 80 × 50 किमी) में स्थित दस स्पेनिश आबादी (AG, AN, BA, LI, LO, PE, PÁ, SR, SC, और SE) में 80 पौधों से टर्मिनलशूट एकत्र किए। उत्तरी स्पेन में लेकिन ऊंचाई की एक विस्तृत श्रृंखला में (424-1410 मीटर asl)। दूसरा, 2015 की शरद ऋतु में, हमने इनमें से छह आबादी (AG, LI, LO, PA, SE, और SR) से 48 पौधे और निचले अक्षांशों (AL, CH, ET, HU, LV) पर स्थित छह आबादी से 46 भालू के पौधे एकत्र किए। , और पीआई)। प्रत्येक आबादी के लिए, हमने एचयू को छोड़कर, कम से कम 5 मीटर अलग आठ पौधों का नमूना लिया, जहां हमें केवल छह व्यक्ति मिले। तीसरा, शरद ऋतु 2016 में 29 नए स्थानों (आईजेड, सीई, बीटी, एमओ, एए, जीयू, एसआई, एएफ, एसए, पीटी, सहित 29 विभिन्न स्थानों (प्रत्येक से 1-6 व्यक्ति) में कुल 140 पौधों का नमूना लिया गया। एबी, सीजी, ओडी, पीएस, एलबी, सीओ, एलई, एमए, सीपी, पीओ, एमजेड, एवी, एलसी, एवाई, एलएन, और जेडयू)। हमारा नमूना 534 से 1750 मीटर की ऊंचाई तक फैला है। कुल मिलाकर, 42 आबादी जलवायु परिस्थितियों की एक विस्तृत श्रृंखला का प्रतिनिधित्व करती है (तालिका S1): अधिकतम औसत तापमान दिखाया गया 2-गुना परिवर्तन (13–26 C) और वार्षिक वर्षा 399 (ZU) से 1589 मिमी (PT) तक हुई। वैश्विक विकिरण 4.2 से 5.1 kWh/m2d तक था। प्रत्येक पौधे के लिए 6-15 ग्राम स्वस्थ पत्तियों को प्राप्त करने के लिए छह से दस टर्मिनल शूट (15-20 सेंटीमीटर लंबे) एकत्र किए गए थे, जिन्हें बाद में 60 C पर लगातार वजन (3-4 दिन) पर सुखाया और सुखाया गया था। शुष्क वजन निर्धारण के बाद, पत्तियों को मैन्युअल रूप से एक मोर्टार में समरूप बनाया गया और विश्लेषण किए जाने तक 4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया। इस संयंत्र सामग्री को कुल फिनोल और एचपीएलसी निर्धारण के लिए नियोजित किया गया था।

प्रवाह साइटोमेट्रिक आकलन के लिए पत्ता सामग्री कुल 37 आबादी (तालिका 1) से संबंधित 178 व्यक्तियों की ताजी पत्तियों से प्राप्त की गई थी। ऊपर वर्णित आबादी में से 33 से नमूने प्राप्त किए गए थे, और चार नई आबादी (स्पेन में बीई, जो, और पीआर, और अंडोरा में एन) से जहां पत्तियां वसंत 2017 में एकत्र की गई थीं, और इसलिए उन्हें फाइटोकेमिकल विश्लेषण (चित्रा 1 और) में शामिल नहीं किया गया था। तालिका S1)। प्रति जनसंख्या एक से छह व्यक्तियों को डुप्लीकेट मापा गया। डीएनए निष्कर्षण के लिए पत्ती सामग्री को सिलिका जेल में सुखाया गया और कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया गया। 35 स्थानों (तालिका 1) से कुल 105 पौधों में डीएनए विविधता विश्लेषण किया गया।

अध्ययन की गई 46 बेयरबेरी आबादी के प्लांट वाउचर, इंस्टीट्यूट बॉटनिक डी बार्सिलोना के हर्बेरियम बीसी में, हर्बेरियम बीसीएन में, सेंटर डी डॉक्यूमेंटैसिओ डी बायोडायवर्सिटैट वेजीटल, यूनिवर्सिटेट डी बार्सिलोना या इंस्टीट्यूटो पिरेनाको डी इकोलोगिया के हर्बेरियम जेएसीए में जमा किए जाते हैं। सीएसआईसी)।

3.2. पत्ती के अर्क और कुल फिनोल निर्धारण की तैयारी

5 0 मिलीग्राम सूखे नमूने और 1 0 मिलीलीटर 8 0 प्रतिशत मेथनॉल का उपयोग करके बेयरबेरी पत्ती के अर्क के तीन प्रतिकृति तैयार किए गए थे। एक अल्ट्रासोनिक स्नान में 3 0 मिनट के लिए ट्यूबों को ऊष्मायन किया गया था, और फिर अर्क को फ़िल्टर किया गया (0.45 मिमी) और विश्लेषण करने तक 4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया। 2014 और 2015 में एकत्र किए गए नमूनों से तैयार किए गए अर्क में कुल फेनोलिक सामग्री निर्धारित की गई थी। हमने मामूली संशोधनों के साथ एक फोलिन-सियोकलटेयूमेथोड [60,61] का पालन किया: 0.1 एमएल अर्क, 0.4 एमएल मेथनॉल (80 प्रतिशत), 0.5 एमएल ऑफ फोलिन- Ciocalteu अभिकर्मक और 8 mL अल्ट्राप्योर पानी मिलाया गया। एक अल्ट्रासोनिक स्नान में 5 मिनट के बाद, Na2CO 3 20 प्रतिशत (w/v) का 1 एमएल जोड़ा गया। यूवी-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (CARY 50 BIO, Varian, AgilentTechnologies) का उपयोग करके 760 एनएम पर अवशोषण को मापने से पहले नमूनों को 30 मिनट के लिए अंधेरे में छोड़ दिया गया था। परिणाम गैलिक एसिड समकक्ष (जीएई) में व्यक्त किए गए थे; अर्थात्, गैलिक एसिड मानक वक्र (40-340 माइक्रोग्राम/जी) का उपयोग करके मिलीग्राम गैलिक एसिड/जी डॉ डब्ल्यूटी।

3.3. अर्बुटिन और अन्य फेनोलिक मेटाबोलाइट्स निर्धारण

बेयरबेरी लीफ मेथनॉलिक अर्क की फेनोलिक सामग्री को आरपी-एचपीएलसी द्वारा एचपीएलसी-यूवी / विज़ सिस्टम (लाक्रोम मर्क हिताची एल -7400) का उपयोग करके काइनटेक्स 5 माइक्रोन-ईवीओ सी 18 (25 0 मिमी × 4.6 मिमी के साथ निर्धारित किया गया था। ) स्तंभ और अवशोषण 280 एनएम पर निर्धारित। 2014 और 2015 में एकत्र किए गए नमूनों के अर्क को 1:10 (v/v) पतला किया गया और मेथनॉल और एसीटोनिट्राइल के एक मोबाइल चरण के साथ इंजेक्ट किया गया। ढाल कार्यक्रम में 0-5 मिनट, मेथनॉल का 25 प्रतिशत शामिल था; 5-6 मिनट, 100 प्रतिशत; 6-10 मिनट, 100 प्रतिशत; और 10-20 मिनट, फिर से 25 प्रतिशत मेथनॉल। प्रवाह दर 1 एमएल/मिनट थी और इंजेक्शन की मात्रा 20 μL थी। इन स्थितियों में, का अवधारण समयअर्बुतिन2.6 मिनट था, जो हमें r=0 के सहसंबंध गुणांक के साथ, 40 से 340 माइक्रोग्राम/जी तक मानक के 6 कमजोर पड़ने के साथ स्थापित अंशांकन वक्र का उपयोग करके इस यौगिक की एकाग्रता को निर्धारित करने में सक्षम बनाता है। 9997. 2016 में एकत्र किए गए नमूनों के अर्क का विश्लेषण मेथनॉल और पानी के एक मोबाइल चरण का उपयोग करके निम्नलिखित ग्रेडिएंट प्रोग्राम के साथ किया गया: 0–5 मिनट, मेथनॉल का 10 प्रतिशत; 5-6 मिनट, 20 प्रतिशत; 6-10 मिनट, 20 प्रतिशत; 10-11 मिनट, 30 प्रतिशत; 11-15 मिनट, 30 प्रतिशत; 15-16 मिनट, 40 प्रतिशत; 16-20 मिनट, 40 प्रतिशत; 20-21 मिनट, 50 प्रतिशत; 21-25 मिनट, 50 प्रतिशत; 25-26 मिनट, 60 प्रतिशत; 26-30 मिनट, 60 प्रतिशत; 30-31 मिनट, 10 प्रतिशत; और 31-36 मिनट, फिर से 10 प्रतिशत मेथनॉल। इन स्थितियों में, हमने निर्धारित कियाअर्बुटिन औरअन्य 4 फेनोलिक यौगिक: कैफिक एसिड, कैटेचिन, मायरिकेटिन, और क्वेरसेटिन-3-ओ-ग्लूकोपाइरानोसाइडमानकों के 5 कमजोर पड़ने के साथ स्थापित संबंधित अंशांकन वक्रों का उपयोग करके (25-500 माइक्रोग्राम/एमएल) , जिसमें कैटेचिन के लिए {{10}}.9992 का सहसंबंध गुणांक (अवधारण समय 12.0 मिनट), कैफ़ीकैसिड के लिए 0.9924 (अवधारण समय 13.4 मिनट), क्वेरसेटिन के लिए 0.9981 {{16} }ओ-ग्लूकोसाइड (अवधारण समय 23.4 मिनट), और माइरिकेटिन के लिए 0.9997 (अवधारण समय 25.1 मिनट)।

मेथनॉल और एसीटोनिट्राइल एचपीएलसी ग्रेड में थे और पैनरेक (बार्सिलोना, स्पेन) से खरीदे गए थे। के मानक (शुद्धता 98 प्रतिशत से अधिक या उसके बराबर)।अर्बुतिन, कैफिक एसिड, और गैलिक एसिड, साथ ही फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक को सिग्मा-एल्ड्रिच (बार्सिलोना, स्पेन) से खरीदा गया था। कैटेचिन और क्वेरसेटिन -3- ओ-ग्लूकोपाइरानोसाइड मानकों को एक्स्ट्रासिंथिस (जेने सेडेक्स, फ्रांस) से खरीदा गया था, जबकि माइरिकेटिन को अल्फा एज़र (कार्लज़ूए, जर्मनी) से खरीदा गया था।

एसपीएसएस बनाम 25 सॉफ्टवेयर और आर 3.5.2 का उपयोग करके रासायनिक निर्धारण के परिणामों का विश्लेषण किया गया। सामान्यता और समरूपता के लिए डेटा का परीक्षण करने के बाद, हमने डेटा के विभिन्न सेटों के विचरण का विश्लेषण किया और इसका मतलब पृथक्करण परीक्षण (तुकी और तम्हाने) या गैर-पैरामीट्रिक परीक्षण किया। क्रुस्कल-वालिस के रूप में, और बोनफेरोनी सुधार के साथ डन एकाधिक तुलना परीक्षण। हमने जीनोम आकार सहित चरों के बीच सहसंबंध गुणांक (पियर्सन या स्पीयरमैन के आधार पर, यदि डेटा एक सामान्य वितरण का पालन करता है) का अनुमान लगाया।

सिस्टैंच में एंटी-ऑक्सीडेशन प्रभाव है

3.4. जीनोम आकार अनुमान और डीएनए अनुक्रमण

पेलिसर एट अल में बताई गई प्रक्रियाओं का पालन करते हुए सेंटर्स सायंटिफ्सी टेक्नोलॉजिक्स, यूनिवर्सिटेट डी बार्सिलोना (सीसीआईटीयूबी) में फ्लो साइटोमेट्री द्वारा बियरबेरी पौधों के जीनोम आकार का अनुमान लगाया गया था। [62]। पेटुनिया हाइब्रिडा विल्म। 'PxPc6' (2C=2.85 pg) का उपयोग आंतरिक मानक के रूप में किया गया था। मानक के बीज प्लेटफॉर्म डी साइटोमेट्री डी इमेजरी-जीआईएफ, सीएनआरएस-आई 2बीसी (जीआईएफ-सुर-यवेट, फ्रांस) द्वारा प्रदान किए गए थे। परमाणु डीएनए सामग्री (2 सी) की गणना मानक के ज्ञात डीएनए सामग्री को भागफल द्वारा गुणा करके की गई थी। लक्ष्य प्रजातियों की चोटी की स्थिति (मोड) और हिस्टोग्राम प्रतिदीप्ति तीव्रता में मानक, अज्ञात नमूने के दाग वाले नाभिक से फ्लोरोसेंट संकेतों के बीच एक रैखिक सहसंबंध मानते हुए, ज्ञात आंतरिक मानक और डीएनए राशि [63]।

मामूली संशोधनों के साथ सीटीएबी प्रोटोकॉल [64] का उपयोग करके डीएनए निष्कर्षण के लिए लगभग 2 0 मिलीग्राम सिलिका-सूखे पत्ती ऊतक का उपयोग किया गया था। नैनोड्रॉप 1000 स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (थर्मोसाइंटिफिक, विलमिंगटन, डीई, यूएसए) के साथ कुल डीएनए की गुणवत्ता की जांच की गई। प्लास्टिड इंटरजेनिक क्षेत्र आरपीएल 32- trnLand psbE-petN, साथ ही साथ परमाणु राइबोसोमल डीएनए क्षेत्र ITS, प्रति जनसंख्या तीन व्यक्तियों के लिए प्रवर्धित और अनुक्रमित किए गए थे। आईटीएस के अनुक्रमों ने 105 विश्लेषण किए गए व्यक्तियों के भीतर कोई परिवर्तनशीलता प्रस्तुत नहीं की, कुछ पदों को छोड़कर जो इंट्राजेनोमिक न्यूक्लियोटाइड बहुरूपता दिखाते हैं। इसलिए, इस परमाणु राइबोसोमल डीएनए क्षेत्र को आगे के विश्लेषण से बाहर रखा गया था। अन्य प्लास्टिड डीएनए क्षेत्रों (यानी, ndhF; ndhF-rpl32; psbA-trnH; psbD-trnT; rps16; और trnL-trnF) का भी परीक्षण किया गया था, लेकिन कम परिवर्तनशीलता या अनुक्रमण समस्याओं के कारण उन्हें छोड़ दिया गया था। विटालेस एट अल में वर्णित के रूप में प्रवर्धन प्रक्रिया की गई। [65]। प्रवर्धित डीएनए खंडों की प्रत्यक्ष अनुक्रमण बिग डाई टर्मिनेटर साइकिल सीक्वेंसिंग v 3.1 (पीई बायोसिस्टम्स, फोस्टर सिटी, कैलिफ़ोर्निया, यूएसए) के साथ यूनिटैटेड जेन-मिका, सीसीआईटीयूबी में, एबीआई प्रिज्म 3700 डीएनए विश्लेषक (पीई बायोसिस्टम्स) पर किया गया था। Rpl 32- trnL और psbE-petN अनुक्रमों को BioEdit संस्करण 7.1.3.0 [66] के साथ इकट्ठा किया गया था, जिसे ClustalW MultiAlignment v1.4 [67] के साथ संरेखित किया गया और मैन्युअल रूप से समायोजित किया गया। जेनबैंक परिग्रहण संख्याएं तालिका S2 में प्रदान की गई हैं।

3.5. जीनोम आकार और आनुवंशिक विश्लेषण

आबादी के बीच सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अंतर 2C मूल्यों की जांच के लिए एक गैर-पैरामीट्रिक क्रुस्कल-वालिस परीक्षण किया गया था। डन एकाधिक तुलना परीक्षण भी यह निर्धारित करने के लिए किए गए थे कि किन आबादी ने उनके बीच महत्वपूर्ण अंतर दिखाया। प्रकार I त्रुटि (झूठी सकारात्मक) को कम करने के लिए बोनफेरोनी सुधार लागू किया गया था।

डीएनएएसपी v6 [68] का उपयोग करके आनुवंशिक विविधता पैरामीटर (बहुरूपी साइट, पारसीमोनी सूचनात्मक साइट, हैप्लोटाइप की संख्या, और कुल हैप्लोटाइप विविधता) का अनुमान लगाया गया था। प्लास्टिड हैप्लोटाइप्स को एक संयुक्त डेटा सेट में निर्धारित किया गया था जिसमें rpl32-trnL और psbE-petN दोनों क्षेत्र शामिल थे। Indels को FastGap v.1.2 [69] के साथ संहिताबद्ध किया गया था और एकल-उत्परिवर्तन घटनाओं के रूप में माना जाता था। पॉपआर्ट [71] में लागू किए गए टीसीएस [70] का उपयोग करके निर्मित एक पारसीमोनी नेटवर्क के आधार पर हैप्लोटाइप्स के बीच विकासवादी संबंधों का अनुमान लगाया गया था। हैप्लोटाइप्स के बीच एकल प्रतिस्थापन से उत्पन्न अंतरों की अधिकतम संख्या की गणना 95 प्रतिशत विश्वास सीमा के साथ की गई थी।

आनुवंशिक और रासायनिक डेटा के बीच संबंध का विश्लेषण करने के लिए एक मेंटल परीक्षण किया गया था। सबसे पहले, हमने 2016 में एकत्र किए गए भालू के पौधों से डेटा का उपयोग करके 25 आबादी के बीच फेनोटाइपिक दूरी का अनुमान लगाया, जिसे पांच फेनोलिक घटकों के लिए मापा गया था (यानीअर्बुतिनकैटेचिन, कैफिक एसिड, क्वेरसेटिन और मायरिकेटिन)। हमने इन डेटा को मानकीकृत करने के लिए आर कमांडर का उपयोग किया [72], और बाद में, यूक्लिडियन दूरियों के आधार पर "Dist" onR फ़ंक्शन के साथ मानकीकृत मैट्रिक्स से प्राप्त रासायनिक दूरी की गणना करने के लिए। दूसरा, एक नी की जनसंख्या आनुवंशिक जोड़ीवार दूरी मैट्रिक्स की गणना 25 आबादी के बीच DnaSP v6. अंत में, हमने आर पैकेज में "जियोडिस्ट" पैकेज का उपयोग करके इन आबादी के बीच जोड़ीदार भौगोलिक दूरी की गणना की। दूरी मैट्रिक्स के बीच जोड़ीवार सहसंबंधों की गणना 10 के साथ मेंटल टेस्ट का उपयोग करके की गई, 000 आर पैकेज "शाकाहारी" में उपलब्ध फंक्शनमेंटल के साथ क्रमपरिवर्तन। 73].

4। निष्कर्ष

सभी विश्लेषण किए गए भालू के पौधे दिखाए गए हैंअर्बुतिन7 प्रतिशत से अधिक सामग्री; इसलिए, यह पौधा सामग्री हर्बल तैयारियों के लिए उपयुक्त है। हमारे विश्लेषण ने पारेजो एट अल द्वारा संदर्भित (9 प्रतिशत तक) की तुलना में उच्च अर्बुटिन सामग्री का खुलासा किया। [40], जिन्होंने 1580-2030 मीटर पर उत्तर-पूर्वी पाइरेनीज़ में स्थित चार आबादी का विश्लेषण किया और आबादी के बीच अर्बुटिन सामग्री में कम अंतर का पता लगाया। इसके अलावा, यहां निर्धारित अधिकांश मूल्य पोलैंड में खेती के लिए चुने गए पौधों की सामग्री की श्रेणी में हैं [74] और उच्च के साथ समझौते में हैंअर्बुतिनजर्मनी में खेती के लिए पौधों का चयन करते समय सोनेंशचिन और टेग्टमेयर [42] द्वारा रिपोर्ट किए गए स्पेनिश बियरबेरी पत्ती के नमूनों की सामग्री। ए। उवा-उर्सी के कुलीन जीनोटाइप को वानस्पतिक रूप से प्रचारित किया जा सकता है, लेकिन अधिकांश प्राप्त क्लोन क्षेत्र स्थापना के दौरान विफल हो गए, जिसने इन संसाधनों के दोहन को सीमित कर दिया। हमने स्पैनिश बियरबेरी आबादी के बीच तीन फ्लेवोनोइड्स (कैटेचिन, मायरिकेटिन, और क्वेरसेटिंगग्लुकोसाइड) के साथ-साथ कैफिक एसिड की सामग्री में मौजूदा भिन्नता का भी वर्णन किया, और कैसे जलवायु कारक (मुख्य रूप से वैश्विक विकिरण और वर्षा), जो अक्षांशीय और ऊंचाई से संबंधित हैं। ढाल, उस भिन्नता को प्रभावित करते हैं। उसी समय, इबेरियन ए। यूवा-उर्सि में निर्धारित हैप्लोटाइप और जीनोम आकार परिवर्तनशीलता के निम्न स्तर के बावजूद, आबादी के आनुवंशिक और साइटोजेनेटिक भेदभाव कमजोर थे, लेकिन फाइटोकेमिकल विविधता के साथ महत्वपूर्ण रूप से जुड़ा हुआ था। कुल मिलाकर, ये परिणाम इस बात पर प्रकाश डालते हैं कि जंगली आबादी से पौधों में पाए जाने वाले अंतर-विशिष्ट फाइटोकेमिकल परिवर्तनशीलता की व्याख्या करने के लिए आनुवंशिक और अजैविक दोनों कारकों के प्रभाव पर विचार किया जाना चाहिए।

सिस्टैन्च प्रभाव

संदर्भ

1. मूर, बीडी; एंड्रयू, आरएल; कुल्हेम, सी.; फोले, डब्ल्यूजे एक पारिस्थितिक संदर्भ में प्लांट सेकेंडरी मेटाबोलाइट्स में इंट्रास्पेसिफिक विविधता की व्याख्या करना। न्यू फाइटोल। 2014, 201, 733-750। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

2. चेनियर, वी.; कॉम्टे, जी.; डेविस, केएम; लैटानज़ियो, वी। प्लांट फेनोलिक्स: उनके बायोसिंथेसिस, जेनेटिक्स और इकोफिजियोलॉजी पर हालिया प्रगति। प्लांट फिजियोल। जैव रसायन। 2013, 72, 1-20। [क्रॉसरेफ]

3. बर्नाल, एम।; लोरेंस, एल.; जुलकुनेन-टिट्टो, आर.; बडोसा, जे.; Verdaguer, D. Buxus sempervirens के पत्तों और क्यूटिकल्स में फेनोलिक यौगिकों के ऊंचाई और मौसमी परिवर्तन। प्लांट फिजियोल। जैव रसायन। 2013, 70, 471-482। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

4. अप्टन, आर। (एड।) उवा-उर्सी लीफ। आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सि (एल.) स्प्रेंग। विश्लेषण के मानक, गुणवत्ता नियंत्रण, और चिकित्सीय; अमेरिकन हर्बल फार्माकोपिया: स्कॉट्स वैली, सीए, यूएसए, 2008; 30पी.

5. यूरोपीय मेडिसिन एजेंसी। Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng पर आकलन रिपोर्ट। फोलियम। ईएमए/एचएमपीसी/750266/2016; यूरोपियन मेडिसिन एजेंसी: एम्सटर्डम, नीदरलैंड्स, 2018.6. कन्लयवत्तनकुल, एम.; स्किनहाइपरपिग्मेंटेशन के उपचार के लिए लूरिथ, एन। पौधे और प्राकृतिक उत्पाद- एक समीक्षा। प्लांटा मेड। 2018, 84, 988-1006। [क्रॉसरेफ]

7. मिगास, पी.; क्राउज़-बारानोव्स्का, एम। चिकित्सा और सौंदर्य प्रसाधनों में अर्बुटिन और इसके डेरिवेटिव का महत्व। फाइटोकेम। लेट. 2015, 13, 35-40। [क्रॉसरेफ]

8. एसईओ, डीएच; जंग, जेएच; ली, जेई; जीन, ईजे; किम, डब्ल्यू.; पार्क, सीएस अर्बुटिन (- और -अरबुटिन) का जैव-तकनीकी उत्पादन, त्वचा को हल्का करने वाले एजेंट, और उनके डेरिवेटिव। आवेदन माइक्रोबायल। जैव प्रौद्योगिकी। 2012, 95, 1417-1425। [क्रॉसरेफ]

9. झू, एक्स.; तियान, वाई.; झांग, डब्ल्यू.; झांग, टी.; गुआंग, सी.; म्यू, डब्ल्यू। -अरबुटिन के जैविक उत्पादन पर हाल की प्रगति। आवेदन माइक्रोबायल। जैव प्रौद्योगिकी। 2018, 102, 8145-8152। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

10. डेवी, एम। प्लांट सेल संस्कृतियों में माध्यमिक चयापचय। एप्लाइड प्लांट साइंसेज के विश्वकोश में, दूसरा संस्करण; थॉमस, बी।, मर्फी, डीजे, मरे, बीजी, एड।; एल्सेवियर: लंदन, यूके, 2017; खंड 2, पीपी. 462-467. [क्रॉसरेफ]

11. कुर्किन, वीए; रियाज़ानोवा, टीके; देवा, ईडी; कडेंटसेव, VI आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सी के घटक। रसायन। नेट। कॉम्प.डी. 2018, 54, 278-280। [क्रॉसरेफ]

12. पांडा, ए.; पेट्रुकी, आर.; मार्रोसु, जी.; मुलतारी, जी.; रोमाना-गैलो, एफ. एचपीएलसी-पीडीएईएसआई-टीओएफ/एमएस मेटाबोलिक प्रोफाइलिंग ऑफ आर्कटोस्टाफिलोस पेंगेंस और आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सि: लीफ मेटाबोलिक एक्सट्रैक्ट से फेनोलिक यौगिकों का एक तुलनात्मक अध्ययन। फाइटोकेमिस्ट्री 2015, 115, 79-88। [क्रॉसरेफ]

13. ओलेनिकोव, डीएन; चेखिरोवा, जीवी 60-गैलोयल्पिसिन और आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सि.केम से अन्य फेनोलिक यौगिक। नेट। कॉम्प.डी. 2013, 49, 1-7। [क्रॉसरेफ]

14. ब्रेवर, एमएस प्राकृतिक एंटीऑक्सीडेंट: स्रोत, यौगिक, क्रिया के तंत्र, और संभावित अनुप्रयोग। कॉम्प। रेव। खाद्य विज्ञान। खाद्य सफ. 2011, 10, 221-247। [क्रॉसरेफ]

15. अमरोविज़, आर।; पेग, आरबी; रहीमी-मोघद्दम, पी.; बेयर, बी.; वेइल, जेए कैनेडियन प्रेयरी से चयनित पौधों की प्रजातियों की फ्री-रेडिकल मैला ढोने की क्षमता और एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि। खाद्य रसायन। 2004, 84, 551-562। [क्रॉसरेफ]

16. बढ़ई, आर।; ओ'ग्राडी, एमएन; ओ'कालाघन, वाईसी; ओ'ब्रायन, एनएम; केरी, जेपी कच्चे और पके पोर्क में अंगूर के बीज और बियरबेरी के अर्क की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता का मूल्यांकन। मांस विज्ञान। 2007, 76, 604-610। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

17. मेकिनीक, आईजी; स्क्रोज़ा, डी.; लजुबेनकोव, आई.; कातालिनिक, वी.; imat, V. एंटीऑक्सिडेंट, और पारंपरिक रूप से उपयोग की जाने वाली भूमध्यसागरीय जड़ी-बूटियों और मसालों से फेनोलिक मेटाबोलाइट्स की रोगाणुरोधी क्षमता। फूड्स 2019, 8, 579। [क्रॉसरेफ]

18. मोहम्मद अज़मान, एनए; गैलेगो, एमजी; सेगोविया, एफ.; अब्दुल्ला, एस.; शारानी, ​​एसएम; अल्माजानो, एमपी मॉडल फूड्स में एक प्राकृतिक एंटीऑक्सीडेंट के रूप में बियरबेरी लीफ एक्सट्रैक्ट के गुणों का अध्ययन। एंटीऑक्सिडेंट 2016, 5, 11. [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

19. पेग, आरबी; अमारोविक्ज़, आर.; Naczk, M. बियरबेरी लीफ से पॉलीफेनोलिक्स की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि (आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सि एल। स्प्रेंगेल) मांस प्रणालियों में अर्क। खाद्य पदार्थों और प्राकृतिक स्वास्थ्य उत्पादों में फेनोलिक यौगिकों में; शाहिदी, एफ।, हो, सीटी, एड।; अमेरिकन केमिकल सोसाइटी: वाशिंगटन, डीसी, यूएसए, 2005; पीपी 67-82। [क्रॉसरेफ]

20. व्रोना, एम।; ब्लास्को, एस.; बेसेरिल, आर.; नेरिन, सी.; बिक्री, ई.; असेंसियो, ई. एंटीऑक्सिडेंट और रोगाणुरोधी मार्कर UPLC®-ESI-Q-TOF-MSE द्वारा आर्कटोस्टाफिलोस uva-ursi पर आधारित एक नई बहुपरत सक्रिय पैकेजिंग। तलंता2019, 196, 498-509। [क्रॉसरेफ]

21. मायर, एम।; ओल्बरमैन, एएल; रेनर, एम.; वीडनर, ई। यूरोपीय औषधीय जड़ी बूटियों की उनके टैनिन सामग्री पर स्क्रीनिंग - चमड़ा उद्योग के लिए नए संभावित कमाना एजेंट। उद्योग फसल। उत्पाद. 2017, 99, 19-26। [क्रॉसरेफ]

22. बोरोस, बी.; जकाबोवा, एस.; मदरस, टी.; मोलनार, आर.; गैलाम्बोस, बी.; किलर, एफ.; फेलिंगर, ए.; फ़ार्कस, ए। विभिन्न बर्गनिया प्रजातियों की पत्तियों में बर्गेनिन, अर्बुटिन, और गैलिक एसिड की एक साथ मात्रा के लिए मान्य एचपीएलसी विधि। क्रोमैटोग्राफिया 2014, 77, 1129-1135। [क्रॉसरेफ]

23. मियाव-लिंग, सी .; चुर-मिन, सी। एक कॉस्मेटिक उत्पाद में हाइड्रोफिलिक व्हाइटनिंग एजेंट का एक साथ एचपीएलसी निर्धारण। जे फार्म। बायोमेड। गुदा। 2003, 33, 617-626। [क्रॉसरेफ]

24. परेजो, आई.; विलाडोमैट, एफ।; बस्तीदा, जे.; कोडिना, सी। अर्बुटिनिन बियरबेरी (आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सी) के मात्रात्मक विश्लेषण में एक एकल निष्कर्षण कदम उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा छोड़ देता है। फाइटोकेम। गुदा। 2001, 12, 336-339। [क्रॉसरेफ]

25. शक्ति। दुनिया के पौधे ऑनलाइन। ऑनलाइन उपलब्ध: http://www.plantsoftheworldonline.org/ (29 अप्रैल 2020 को एक्सेस किया गया)।

26. सलीम, ए.; हैरिस, सीएस; आसिम, एम.; क्यूरियर, ए.; मार्टिनौ, एल.; हद्दाद, पीएस; अर्नासन, जेटीआरपी-एचपीएलसी-डीएडी-एपीसीआई/एमएसडी मेथड फॉर कैरेक्टराइजेशन ऑफ मेडिसिनल एरिकेसी जिसका इस्तेमाल ईयू इस्चीक्री फर्स्ट नेशंस द्वारा किया जाता है। फाइटोकेम। गुदा। 2010, 21, 328-339। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

27. स्टेफनेस्कु, बीई; ज़ाबो, के.; मोकन, ए.; क्रिसन, जी। पांच एरिकसेई प्रजातियों के फेनोलिक यौगिक और उनकी संबंधित जैवउपलब्धता और स्वास्थ्य लाभ। अणु 2019, 24, 2046। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

28. ओंडा, वाई।; मोचिडा, के। उच्च-थ्रूपुट अनुक्रमण तकनीकों का उपयोग कर पौधों में आनुवंशिक विविधता की खोज। कर्र। जीनोम। 2016, 17, 358–367। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

29. इन्निसेली, जे.; गारिनीलो, जे.; तोसिब, वीई; रेगलाडो, जे जे; डि सियाकोआ, एल.; वैन बेरेन, सीएम; पित्त अल्वारेज़, एसआई; एस्कैंडोन, एएस सुगंधित और औषधीय प्रजातियों के प्रजनन में "पॉलीप्लोइड प्रभाव"। विज्ञान हॉर्टिक। 2020,260, 108854। [क्रॉसरेफ]

30. लीच, आईजे; लीच, एआर जीनोम आकार विविधता और भूमि पौधों में विकास। इन-प्लांट जीनोम डायवर्सिटी वॉल्यूम 2, भौतिक संरचना, व्यवहार और प्लांट जीनोम का विकास; लीच, आईजे, ग्रीलहुबर, जे।, डोलेसेल, जे।, वेंडेल, जेएफ, एड।; स्प्रिंगर: वियना, ऑस्ट्रिया, 2013; पीपी. 307-322. [क्रॉसरेफ]

31. बेनेट, एमडी; लीच, आईजे न्यूक्लियर डीएनए एंजियोस्पर्म में मात्रा-प्रगति, समस्याएं और संभावनाएं। एन। बॉट। 2005, 95, 45-90। [क्रॉसरेफ]

32. ग्रेगरी, टीआर (एड।) जीनोम का विकास; एल्सेवियर: सैन डिएगो, सीए, यूएसए, 2005।

33. होआंग, पीएन; शुबर्ट, वी.; मिस्टर, ए.; फुच्स, जे.; शुबर्ट, आई। जीनोम साइज, सेल और न्यूक्लियस वॉल्यूम, क्रोमोसोम नंबर और डकवीड्स के बीच आरडीएनए लोकी में बदलाव। विज्ञान प्रतिनिधि 2019, 9, 3234। [क्रॉसरेफ]

34. नाइट, सीए; मोलिनारी, एन.; पेट्रोव, डीए बड़े जीनोम बाधा परिकल्पना: विकास, पारिस्थितिकी, और फेनोटाइप। ऐन। बॉट। 2005, 95, 177-190। [क्रॉसरेफ]

35. पेलिसर, जे।; हिडाल्गो, ओ.; डोड्सवर्थ, एस.; लीच, आईजे जीनोम आकार विविधता और भूमि पौधों के विकास पर इसका प्रभाव। जीन 2018, 9, 88. [क्रॉसरेफ]

36. कैरव, आई।; Rušˇci´c, एम.; स्कोस्सिबुसीक, एम.; मारविइक, ए.; सिलजक-याकोवलेव, एस.; पोलिटिको, ओ। क्रोएशिया से सेंटोरिया सोलस्टिटियलिस (एस्टरएसी) की फाइटोकेमिकल और साइटोजेनेटिक विशेषता। रसायन। जैव विविधता। 2017, 14, e1600213। [क्रॉसरेफ]

37. कोल, आईबी; काओ, जे.; एलन, आरए; सक्सेना, पीके; मर्च, एसजे कम्पेरिजन ऑफ स्कुटेलरिया बैकलेंसिस, स्कुटेलरियालाटेरिफ्लोरा और स्कुटेलरिया रेसमोसा: जीनोम साइज, एंटीऑक्सीडेंट क्षमता और फाइटोकेमिस्ट्री। प्लांटा मेड। 2008,74, 474-481। [क्रॉसरेफ]

38. कार्वाल्हो, वाईजीएस; विटोरिनो, एलसी; डी सूजा, यूजेबी; बेसा, एलए पौधों की आनुवंशिक विविधता पर अनुसंधान में हालिया रुझान: संरक्षण के लिए निहितार्थ। विविधता 2019, 11, 62. [CrossRef]

39. वेई, एस.; यांग, डब्ल्यू।; वांग, एक्स.; होउ, वाई। पश्चिमी तियानशान पर्वत, चीन में एक लुप्तप्राय औषधीय पौधे, सौसुरेइनवोलुक्रेटा (सौसुरिया, एस्टेरेसिया) में उच्च आनुवंशिक विविधता। संरक्षित करें। जेनेट। 2017, 18,1435-1447। [क्रॉसरेफ]

40. चांग, ​​​​वाईजे; काओ, वाईएफ; झांग, जेएम; तियान, एलएम; दांग, एक्सजी; झांग, वाई.; क्यूई, डी.; झांग, एक्सएस स्टडी ऑन क्लोरोप्लास्टडीएनए विविधता की खेती और जंगली नाशपाती (पाइरस एल।) उत्तरी चीन में। ट्री जेनेट। जीनोम 2017, 13, 44। [क्रॉसरेफ]

41. परेजो, आई.; विलाडोमैट, एफ।; बस्तीदा, जे.; कोडिना, सी। कैटेलोनिया, स्पेन में आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सी की विभिन्न जंगली आबादी में अर्बुटिन सामग्री की विविधता। जे जड़ी बूटी मसाले मेड। पौधे 2002, 9, 329-333। [क्रॉसरेफ]

42. सोनेंशिन, एम।; टेग्टमेयर, एम। बेयरबेरी के पालतू जानवरों पर प्रयोग (आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सी (एल।) स्प्रेंग।)। जे. मेड. मसाले के पौधे 2012, 17, 124–128।

43. चेन, एचवाई; लिन, वाईसी; Hsieh, CL कुछ चयनित न्यूट्रास्युटिकल जड़ी बूटियों के जलीय अर्क की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का मूल्यांकन। खाद्य रसायन। 2008, 104, 1418-1424। [क्रॉसरेफ]

44. डेल वैले, जे.सी.; ब्यूड, एमएल; कासिमिरो-सोरिगुएर, आई.; व्हिटल, जेबी; नारबोना, ई। विभिन्न पौधों के भागों में फ्लेवोनोइड संचय पर: व्यक्तियों और आबादी के बीच तट कैंपियन (सिलीन लिटोरिया) में भिन्नता पैटर्न। सामने। संयंत्र विज्ञान। 2015, 6, 939। [क्रॉसरेफ]

45. मार्टिनेज-कैडेनास, सी।; लोपेज़, एस.; रिबास, जी.; फ्लोर्स, सी.; गार्सिया, ओ.; सेविला, ए.; स्मिथ-ज़ुबियागा, आई.;इबारोला-विलाबा, एम.; पिनो-यान्स, एमएम; गरदेज़ाबल, जे.; और अन्य। पैतृक MC1R एलील पर एक साथ शुद्धिकरण चयन और दक्षिण यूरोपियों में मेलेनोमा-जोखिम एलील v60l पर सकारात्मक चयन। मोल। बायोल। विकास। 2013, 30, 2654-2665। [क्रॉसरेफ]

46. ​​जकाओला, एल.; होहटोला, ए। पौधों में फ्लेवोनोइड जैवसंश्लेषण पर अक्षांश का प्रभाव। प्लांट सेल वातावरण। 2010, 33,1239-1247। [क्रॉसरेफ] 47. मार्ट्ज़, एफ.; पेल्टोला, आर.; फोंटाना, एस.; डुवल, आरई; जुलकुनेन-टिट्टो, आर.; स्टार्क, एस। जुनिपर (जुनिपरस कम्युनिस) सुइयों की टेरपेनॉइड और घुलनशील फेनोलिक संरचना पर अक्षांश और ऊंचाई का प्रभाव और बोरियल क्षेत्र में उनकी जीवाणुरोधी गतिविधि का मूल्यांकन। जे. एग्री. खाद्य रसायन। 2009, 57, 9575-9584। [क्रॉसरेफ]

48. यांग, बी।; झेंग, जे.; Laaksonen, ओ.; तहवोनन, आर.; कालीओ, एच। करंट (रिब्स एसपीपी।) की किस्मों में फेनोलिक यौगिकों पर अक्षांश और मौसम की स्थिति का प्रभाव। जे. एग्री. खाद्य रसायन। 2013, 61, 3517-3532। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

49. लट्टी, एके; जाकोला, एल.; रिहिनेन, के.आर.; फ़िनलैंड में केनुलैनेन, पीएस एंथोसायनिन और बोगबिल बेरी (वैक्सीनियम यूलिगिनोसम एल) में फ्लेवोनोल भिन्नता। जे. एग्री. खाद्य रसायन। 2010, 58, 427-433। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

50. लट्टी, एके; रिहिनेन, के.आर.; केनुलैनेन, फ़िनलैंड में बिलबेरी (वैक्सीनियम मायर्टिलस एल.) की जंगली आबादी में एंथोसायनिन भिन्नता का पीएस विश्लेषण। जे. एग्री. खाद्य रसायन। 2008, 56, 190-196। [क्रॉसरेफ]

51. मोनशेन, एम।; इग्लेसियस, जे.; कुनर्ट, ओ.; बुकर, एफ। हीथ की फाइटोकेमिस्ट्री (कैलुना वल्गेरिस (एल।) हल) और इसका ऊंचाई परिवर्तन। फाइटोकेम। रेव. 2010, 9, 205-215। [क्रॉसरेफ]

52. पेरी, एनबी; बर्गेस, ईजे; रोड्रिग्ज गुइटियन, एमए; रोमेरो फ्रेंको, आर.; लोपेज़ मॉस्केरा, ई.; स्मॉलफ़ील्ड, बीएम, जॉयस, एनआई; लिटिलजॉन, आरपी सेस्क्यूटरपीन लैक्टोन्स इन अर्निका मोंटाना: हेलेनालिन और डायहाइड्रोहेलेनालिनकेमोटाइप्स इन स्पेन। प्लांटा मेड। 2009, 75, 660–666। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

53. अब्दला-रॉबर्ट्स, एल।; अस्मान, एस.; बर्नी-मियर, वाई.; टेरान, जे.सी.; कोवेलो, एफ.; ग्लौसर, जी.; मोरेरा, एक्स। प्रमुख ओक प्रजातियों में पौधों के लक्षणों और जड़ी-बूटियों में ऊंचाई में भिन्नता के साथ जुड़े जैविक और अजैविक कारक। एम। जे बॉट। 2016, 103, 2070–2078। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

54. बेंटले, जे।; मूर, जेपी; फैरेंट, जेएम मेटाबोलॉमिक्स डिसेकेशन-टॉलरेंट औषधीय झाड़ी मायरोथैमनस फ्लैबेलिफोलिया (मायरोथमनेसी) में इंट्रास्पेसिफिक सीमाओं का आकलन करने के लिए फ़ाइलोजेनेटिक्स के पूरक के रूप में। फाइटोकेमिस्ट्री 2019, 159, 127-136। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

55. सिलजक-याकोवलेव, एस .; पुस्ताहिजा, एफ.; oli´c, ईएम; बोगुनीक, एफ.; मुराटोविक, ई.; बासिक, एन.; कैट्रीस, ओ.; ब्राउन, सीएसटीओवार्ड्स ए डेटाबेस ऑफ जीनोम साइज एंड क्रोमोसोम नंबर ऑफ बाल्कन फ्लोरा: सी-वैल्यू इन 343 टैक्सा विथ नोवेल वैल्यूज फॉर 252। एड। विज्ञान लेट. 2010, 3, 190-213। [क्रॉसरेफ]

56. गैरिडो, जेएल; अलकांतारा, जेएम; रे, पीजे; मेड्रानो, एम.; गुइटियन, जे.; कैस्टेलानोस, एमसी; बस्तीदा, जेएम; Jaime, R.; Herrera, CM Iberian columbines की भौगोलिक आनुवंशिक संरचना (जीन। Aquilegia)। प्लांट सिस्ट। विकास। 2017,303, 1145-1160। [क्रॉसरेफ

57. लिस्टल, डी.; पॉस्क्लोड, पी.; रीश, सी। यूरोपीय शुष्क घास के मैदानों में एक कठिन चट्टान उत्तरजीवी की फाइलोगोग्राफी। पीएलओएस वन 2017, 12, ई0179961। [क्रॉसरेफ]

58. ओलाल्डे, एम।; हेरान, ए.; एस्पिनल, एस.; गोइकोचेआ, पी। व्हाइट ओक्स फाइलोगोग्राफी इन द इबेरियन पेनिनसुला। इकोल। मनाग। 2002, 156, 89-102। [क्रॉसरेफ]

59. बैरेट, SCH पौधों के यौन प्रजनन पर क्लोनलिटी का प्रभाव। प्रोक। नेटल. एकेड। विज्ञान यूएसए 2015, 112,8859-8866। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

60. स्कोविरा, एम।; फाल्गुएरा, वी.; गैलेगो, जी.; पीरो, एस.; अल्माजानो, एमपी पेरिला फ्रूटसेन्स का प्रभाव मॉडल फूड इमल्शन की ऑक्सीडेटिव स्थिरता पर अर्क करता है। एंटीऑक्सिडेंट 2014, 3, 38-54। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

61. पास्कोल, ए.; क्विरेंटेस-पाइन, आर.; फर्नांडो, एएल; एलेक्सोपोलू, ई.; सेगुरा-कैरेटेरो, ए। फेनोलिक संरचना और केनाफ पत्तियों की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि। उद्योग फसल। उत्पाद. 2015, 78, 116-123। [क्रॉसरेफ]

62. पेलिसर, जे।; गार्नत्जे, टी.; मोलेरो, जे.; पुस्ताहिजा, एफ.; सिलजक-याकोवलेव, एस.; वालेस, जे। ओरिजिन, एंड इवोल्यूशन ऑफ साउथअमेरिकन आर्टेमिसिया प्रजाति (एस्टरएसी); आणविक फ़ाइलोजेनी, राइबोसोमल डीएनए और जीनोमाइज़ डेटा से साक्ष्य। ऑस्ट। जे बॉट। 2010, 58, 605-616। [क्रॉसरेफ]

63. डोलेसेल, जे। उच्च पौधों में परमाणु डीएनए सामग्री का फ्लो साइटोमेट्रिक विश्लेषण। फाइटोकेम। गुदा। 1991, 2,143-154। [क्रॉसरेफ]

64. डॉयल, जे जे; डॉयल, जेएल ताजा पत्ती ऊतक की छोटी मात्रा के लिए एक तेजी से डीएनए अलगाव प्रक्रिया। फाइटोकेम। बैल।बॉट। समाज. पूर्वाह्न। 1987, 19, 11-15।

65. विटालेस, डी.; फेलिनर, जीएन; वालेस, जे.; गार्नत्जे, टी.; फिरत, एम.; अल्वारेज़, आई। प्लास्टिड और परमाणु डीएनए मार्करों के आधार पर भूमध्यसागरीय जीनस एनासाइक्लस (एंथेमिडी, एस्टेरेसिया) का एक नया परिच्छेद। फाइटोटेक्सा 2018, 349, 1-17। [क्रॉसरेफ]

66. हॉल, टीए बायोएडिट: विंडोज95/98/एनटी के लिए एक उपयोगकर्ता के अनुकूल जैविक अनुक्रम संरेखण संपादक और विश्लेषण कार्यक्रम। न्यूक्लिक एसिड सिम। सेवा 1999, 41, 95-98।

67. थॉम्पसन, जेडी; हिगिंस, डीजी; गिब्सन, टीजे क्लस्टल डब्ल्यू: अनुक्रम भार, स्थिति-विशिष्ट अंतराल दंड, और वजन मैट्रिक्स पसंद के माध्यम से प्रगतिशील बहु-अनुक्रम संरेखण की संवेदनशीलता में सुधार। न्यूक्लिक एसिड रेस। 1994, 22, 4673-4680। [क्रॉसरेफ]

68. रोजास, जे.; फेरर-माता, ए.; सांचेज़-डेलबैरियो, जे.सी.; गुइराव-रिको, एस.; लिब्राडो, पी.; Ramos-Onsins, SE; Sanchez-Gracia, A. DnaSP 6: DNA सीक्वेंस पॉलीमॉर्फिज्म एनालिसिस ऑफ़ लार्ज डेटासेट्स। मोल। बायोल। Evol.2017, 34, 3299–3302। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

69. बोरचसेनियस, एफ। फास्टगैप, संस्करण 1.2; बायोसाइंसेज विभाग, आरहूस विश्वविद्यालय: आरहूस, डेनमार्क, 2009; ऑनलाइन उपलब्ध: http://www.aubot.dk/FastGap_home.htm (1 जुलाई 2019 को एक्सेस किया गया)।

70. क्लेमेंट, एम।; पोसाडा, डीसीकेए; क्रैंडल, केए टीसीएस: जीन वंशावली का अनुमान लगाने के लिए एक कंप्यूटर प्रोग्राम। मोल। ईकोल। 2000, 9, 1657-1659। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

71. लेह, जेडब्ल्यू; ब्रायंट, डी. पोपार्ट: हैप्लोटाइप नेटवर्क निर्माण के लिए पूर्ण-सुविधा सॉफ्टवेयर। तरीके Evol.2015, 6, 1110-1116। [क्रॉसरेफ]

72. फॉक्स, जे। आर कमांडर के साथ शुरुआत करना: आरजे स्टेट के लिए एक बुनियादी-सांख्यिकी ग्राफिकल यूजर इंटरफेस। सॉफ्टव.2005, 14, 1-42. [क्रॉसरेफ]

73. ओक्सानन, जे .; ब्लैंचेट, एफजी; किंड्ट, आर.; लीजेंड्रे, पी.; ओ'हारा, आरबी; सिम्पसन, जीएल; सोलीमोस, पी.; स्टीवंस, एम।, वैगनर, एच। वेगन: सामुदायिक पारिस्थितिकी पैकेज। आर पैकेज संस्करण 1.17-4। 2010. ऑनलाइन उपलब्ध: http://CRAN.R-project.org/package=vegan (19 सितंबर 2010 को एक्सेस किया गया)।74. मालिनोव्स्का, एच। पोलैंड में प्राकृतिक आबादी से बेयरबेरी (आर्कटोस्टाफिलोस यूवा-उर्सी (एल।) स्प्रेंग।) का चयन करता है। एक्टा समाज। बॉट। पोल. 1995, 64, 91-96। [क्रॉसरेफ]