भाग 2: एंटी-इंफ्लेमेटरी, एंटीऑक्सिडेंट, मॉइस्चराइजिंग, और क्वेरसेटिन के एंटीमेलानोजेनेसिस प्रभाव 3-O- -मानव केराटिनोसाइट्स और मेलानोमा कोशिकाओं में NF-κB और AP के सक्रियण के माध्यम से D-Glucuronide-1 रास्ते

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3. चर्चा

पहले प्रकाशित अध्ययनों में, Q-3-G का उपयोग कान की सूजन, पेरिटोनियल पारगम्यता, और फुफ्फुसीय एडिमा [50] को रोकने के लिए किया गया है, जो एक शक्तिशाली के रूप में कार्य करता है।एंटीऑक्सिडेंटकम घनत्व वाले लिपोप्रोटीन [42] के साथ रक्त प्लाज्मा में, पेरोक्सीनाइट्राइट-प्रेरित ऑक्सीडेटिव संशोधन [51] को कम करते हुए,सूजनरोधीएलपीएस चुनौती [52] के तहत जेएनके और ईआरके सिग्नलिंग मार्ग को बाधित करके और स्तन कैंसर कोशिकाओं [56] के खिलाफ एंटीकैंसर गुण रखने से प्रभाव। हालांकि, इसके व्यापक रूप से अध्ययन किए गए मूल यौगिक के विपरीत,क्वेरसेटिन, Q-3-G के औषधीय लाभ और क्रियाविधि का पता लगाया जाना बाकी है। जहां तक ​​हमारी जानकारी है, त्वचा के सुरक्षात्मक प्रभावों पर Q-3-G की भूमिका को पूरी तरह से स्पष्ट नहीं किया गया है। इस अध्ययन में, विभिन्न इन विट्रो आकलनों का उपयोग करते हुए, हमने यूवीबोर H2O2 के खिलाफ Q-3-G के त्वचा सुरक्षात्मक प्रभावों को चिह्नित करने पर ध्यान केंद्रित किया, -प्रेरित ऑक्सीडेटिव तनाव और सूजन, HaCaT में त्वचा का जलयोजन (एक मानव केराटिनोसाइट सेल लाइन), औरएंटीमेलानोजेनेसिसB16F10 (एक murine मेलेनोमा सेल लाइन) में गतिविधि।

HaCaT, B16F10, और HEK293T कोशिकाओं की व्यवहार्यता गैर-साइटोटॉक्सिक सांद्रता की एक सीमा पर Q -3- G के साथ उपचार के बाद निर्धारित की गई थी। परिणामों से पता चला कि HaCaT, B16F10, और HEK293T कोशिकाओं में Q-3-Gup से 20 μM （आंकड़े 2a,3a, और 4f） की सांद्रता पर सेल व्यवहार्यता का कोई महत्वपूर्ण निषेध नहीं था। HaCaT, B16F10, और HEK293T कोशिकाओं में O -3- G की सांद्रता पर 20 μM तक सेल व्यवहार्यता quercetin की एकाग्रता से कम पाई गई जब इसका उपयोग SCC में साइटोटोक्सिक प्रभावों की जांच के लिए किया जाता है {{18} } और एचएससी-6 कोशिकाएं-50 μM-57-या शुक्राणु व्यवहार्यता （50-100μM-58】। हालाँकि, Q-3-G को इसके एग्लिकोन [59] की तुलना में बहुत कम विषाक्त दिखाया गया था। तीन पदों पर मुक्त OH समूह की कमी Q-3-G [29] के कम विषैले प्रभाव में योगदान कर सकती है।

280-315 एनएम की तरंग दैर्ध्य वाली यूवीबी किरणें त्वचा की ऊपरी परत में प्रवेश करती हैं और यूवीए और यूवीसी [60] की तुलना में अधिक प्रभावी होती हैं। यूवीबी किरणें अधिकांश त्वचा कैंसर और कोशिका मृत्यु का कारण हैं। इसके अलावा, HaCaT कोशिकाओं में कोशिका क्षति को UVB विकिरण [61] से प्रेरित दिखाया गया है। नतीजतन, हमने Q -3- G उपचार की तुलना में UVB विकिरण के बाद HaCaT कोशिकाओं की सेल व्यवहार्यता की जांच की। जैसा कि पिछली रिपोर्टों में दिखाया गया है, क्षतिग्रस्त कोशिकाओं, ऊतकों और अंगों के लिए मुख्य कारकों में से एक यूवीबी एक्सपोजर है [62,63]। Q-3-G ने UVB विकिरण (चित्र 2b-d) द्वारा प्रेरित कम हुई सेल व्यवहार्यता को बहाल किया। परिणाम क्वेरसेटिन [64] के एचसीएटी में यूवीबी-प्रेरित साइटोटोक्सिसिटी पर प्रभाव और तंत्र पर पिछले अध्ययन के समान दिखाए गए हैं।

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कई अध्ययनों ने वर्णन किया है कि यूवीबी गंभीर सूजन प्रतिक्रियाओं को बढ़ावा दे सकता है, जिससे त्वचा में समस्याएं हो सकती हैं [1,2,4,27]। यूवीबी महत्वपूर्ण प्रो-भड़काऊ एंजाइम जैसे सीओएक्स -2 और टीएनएफ- जैसे साइटोकिन्स को सक्रिय करता है। COX-2 एक सूजन-संबंधी एंजाइम है जो प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स और मध्यस्थों [65] द्वारा ट्रिगर होता है, जो भड़काऊ प्रतिक्रिया को उत्तेजित करता है। क्योंकि COX-2 भड़काऊ मध्यस्थ PGE-2 पैदा करता है, यह एक भड़काऊ प्रतिक्रिया उत्पन्न करता है [66,67], और TNF- भड़काऊ प्रतिक्रियाओं में प्रमुख प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकाइन [68] है। ये भड़काऊ प्रतिक्रियाएं त्वचा को नुकसान पहुंचाती हैं, जिसके परिणामस्वरूप त्वचा की उम्र बढ़ने लगती है [69]। भड़काऊ एंजाइम COX -2 और प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स TNF- के mRNA अभिव्यक्ति स्तर Q -3- G (चित्र 2e,) द्वारा बाधित थे। पहले प्रकाशित परिणाम के अनुसार, क्वेरसेटिन ने टीएनएफ- [70] की जीन अभिव्यक्ति और उत्पादन को भी कम कर दिया। एंटीऑक्सिडेंट गुणों के संबंध में, डीपीपीएच और एबीटीएस रेडिकल मैला ढोने वाले एसेज़ इन विट्रो के मूल्यांकन के लिए तेज़, विश्वसनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तरीके हैं।प्रतिउपचारक गतिविधिशुद्ध यौगिकों और पौधों के अर्क [54] और प्राकृतिक यौगिकों या अर्क [1,46,71,72] की सफाई गतिविधियों की जांच के लिए सामान्य तरीकों में व्यापक रूप से उपयोग किया गया है। Q-3-G को दोनों assays में रेडिकल की प्रतिक्रियाशीलता को कम करने और एकाग्रता-निर्भर शिष्टाचार में साइटोमेट्री प्रवाह को कम करने के लिए पाया गया था। ये परिणाम पहले बताए गए अध्ययन के अनुसार हैं, जिसमें Q-3-G ने फियोक्रोमोसाइटोमा PC-12 कोशिकाओं [34] में ROS के गठन को महत्वपूर्ण रूप से बाधित किया था। एक एंटीऑक्सीडेंट प्रभाव के साथ रासायनिक रूप से कार्य करने के अलावा, हमने दिखाया कि Q-3-G ने Nrf2 के स्तर को बढ़ा दिया, जो कोशिकाओं में ऑक्सीडेटिव तनाव के महत्वपूर्ण नियामकों में से एक है। एनआरएफ 2- के माध्यम से कई यौगिकों या प्राकृतिक अर्क में एंटीऑक्सीडेंट गुण होने की सूचना दी गई है, जो सिग्नलिंग [46,73,74] पर निर्भर हैं। एक साथ लिया गया, इन निष्कर्षों से संकेत मिलता है कि Q-3-G में एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि होती है (चित्र 2g-j)। मेलेनिन संश्लेषण से मेलानोसोम इंट्रासेल्युलर ऑर्गेनेल [75-77] में होता है। मेलेनिन का अधिक उत्पादन त्वचा की उपस्थिति और हाइपरपिग्मेंटेशन से संबंधित त्वचा रोगों को प्रभावित कर सकता है। हमने पाया कि सी-एमएसएच-प्रेरित बी16एफ10 कोशिकाओं में ओ -3-जी के साथ उपचार मेलेनिन स्राव को रोकता है। पिछले कार्यों की तरह, इंट्रासेल्युलर मेलानोजेनेसिस को भी क्वेरसेटिन मेटाबोलाइट्स और कुछ क्वेरसेटिन -3-O- -D-glucopyranosides [24,78,79] द्वारा नियंत्रित किया जाता है।

स्वस्थ त्वचा को बनाए रखने के लिए पर्याप्त त्वचा जलयोजन की आवश्यकता होती है, और इस प्रक्रिया में NMF और HA की महत्वपूर्ण भूमिका होती है [12]। FLG त्वचा की बाधा का एक घटक है, इसलिए FLG अभिव्यक्ति का बढ़ा हुआ स्तर मॉइस्चराइजिंग [80] से जुड़ा हो सकता है। हमारे अध्ययन में, Q-3-G को FLG और TGM-1 (चित्र 3c,d) को बढ़ाकर त्वचा की नमी बनाए रखने की गतिविधि को प्रभावित करने के लिए पाया गया था। FLG और TGM -1 के अभिव्यक्ति स्तर JNK, IKK और IkBainhibitors (SP600125 और Bay11-7082, क्रमशः) द्वारा अवरुद्ध किए गए थे। हमने एमएपीके से संबंधित एंजाइमों पर ध्यान केंद्रित किया क्योंकि हमारे अध्ययन का उद्देश्य आणविक तंत्र को निर्धारित करना था जिसके द्वारा क्यू -3- त्वचा के सुरक्षात्मक प्रभावों को Gexerts करता है। जेएनके ऑक्सीडेटिव-तनाव-प्रेरित केराटिनोसाइट एपोप्टोसिस [81] में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। c-Jun, TAK1, MKK4, और INK के फॉस्फोराइलेशन को Q-3-G द्वारा बढ़ाया गया था। इसके अतिरिक्त, रेटिनॉल ने c-Jun, TAK1, MKK4, या JNK के फॉस्फोराइलेशन में उल्लेखनीय रूप से वृद्धि नहीं की, यह सुझाव देते हुए कि AP-1 में Q-3-G और रेटिनॉल के बीच निरोधात्मक विशेषताओं में कुछ अंतर हैं। मार्ग। जैसा कि पहले प्रकाशित परिणामों में था, जेएनके-सी-जून/एपी -1 मार्ग का संबंध एपोप्टोटिक विरोधी प्रभाव से है।क्वेरसेटिन[82]। पिछले अध्ययन [83] की तुलना में, एनएफ-केबी और एपी -1 सिग्नलिंग मार्ग को विनियमित करके, इन मार्गों को क्वेरसेटिन के अंतर्निहित तंत्र में भी शामिल पाया गया। अपने मूल यौगिक के तंत्र के अनुरूप, हमारे परिणाम बताते हैं कि NF-kB मार्ग को Q -3- के त्वचा सुरक्षात्मक प्रभाव में भी शामिल किया गया था, p50, p65, IKK, IkB, Akt, और Src की सक्रियता HaCaT कोशिकाओं में Q-3-G के साथ उपचार के बाद। इसके अलावा, Q-3-G ने AP को अपग्रेड किया-1-ल्यूक और NF-B-Luc गतिविधि (चित्र 4) की मध्यस्थता की। इन निष्कर्षों से पता चलता है कि एमएपीके की मध्यस्थता वाले एपी -1 और एनएफ-केबी सिग्नलिंग ने क्यू -3-जी-मध्यस्थता त्वचा सुरक्षात्मक गुणों में योगदान दिया।

4. सामग्री और तरीके

4.1. सामग्री

Q-3-Gwas को Sigma Aldrich Co. (St.Louis, MO, USA) से प्राप्त किया गया था। HaCaT, HEK293T, और B16F10 सेल अमेरिकन टाइप कल्चर कलेक्शन (रॉकविले, एमडी, यूएसए) से खरीदे गए थे। ABTS डायमोनियम सॉल्ट, डीपीपीएच, एस्कॉर्बिक एसिड (एए), एबीटीएस, और रेटिनॉल सिग्मा केमिकल कंपनी (सेंट लुइस, एमओ, यूएसए) से खरीदे गए थे। भ्रूण गोजातीय सीरम (FBS), Dulbecco का संशोधित ईगल माध्यम (DMEM), और फॉस्फेट-बफर खारा (PBS) गिब्को (ग्रैंड आइलैंड, NY, यूएसए) से खरीदा गया था। 3- (4-5- डाइमिथाइलथियाज़ोल {{ 7}}yl)-25-डाइफेनिलटेट्रा-सोडियम ब्रोमाइड (एमटीटी) अमरेस्को (ब्रिस्बेन, ऑस्ट्रेलिया) से खरीदा गया था। TRILzol और PCR प्रीमिक्स बायो-डी इंक (सियोल, कोरिया) से खरीदे गए थे। सीडीएनए संश्लेषण किट थर्मो फिशर साइंटिफिक (वॉलथम, एमए, यूएसए) से खरीदे गए थे। पीसीआर (पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन) के लिए फॉरवर्ड और रिवर्स प्राइमर को मैक्रोजेन, इंक। (सियोल, कोरिया) द्वारा संश्लेषित किया गया था। फॉस्फोराइलेटेड या लक्ष्य प्रोटीन के कुल रूपों से संबंधित सभी एंटीबॉडी सेल सिग्नलिंग टेक्नोलॉजी (बेवर्ली, एमए, यूएसए) से खरीदे गए थे।

4.2. सेल संस्कृतियां

HaCaT और B16F10 कोशिकाओं को DMEM में 10 प्रतिशत FBS और 1 प्रतिशत एंटीबायोटिक्स (स्ट्रेप्टोमाइसिन और पेनिसिलिन) के साथ संवर्धित किया गया। HEK293T कोशिकाओं को DMEM में 5 प्रतिशत FBS और 1 प्रतिशत एंटीबायोटिक दवाओं के साथ संवर्धित किया गया। इन सेल लाइनों को 5 प्रतिशत सीओ में 37 डिग्री पर इनक्यूबेट किया गया था।

4.3. सेल व्यवहार्यता परीक्षण

B16F10 कोशिकाओं को 2 × 10 डिग्री कोशिकाओं पर प्रति कुँए में 96- 24 घंटे के लिए अच्छी तरह से प्लेटों में रखा गया था, क्यू के अलग-अलग सांद्रता -3- G（ 0-20 μM） को उनमें जोड़ा गया था, और फिर उन्हें 48 घंटे के लिए ऊष्मायन किया गया। HaCaT कोशिकाओं को 96-अच्छी तरह से प्लेटों में चढ़ाया गया था, और कोशिकाओं को 6 × 10 डिग्री कोशिकाओं / एमएल पर रखा गया था। रातोंरात ऊष्मायन के बाद, कोशिकाओं को 24 घंटे के लिए Q -3-G （0-20 μM） के विभिन्न सांद्रता के साथ ऊष्मायन किया गया था। HEK293T कोशिकाओं को 6 × 10 डिग्री कोशिकाओं / एमएल में 96- 24 घंटे के लिए अच्छी तरह से प्लेटों में रखा गया और फिर क्यू -3- जी （ 0-20 μM） के साथ इलाज किया गया। ऊष्मायन कोशिकाओं को 10μL / अच्छी तरह से MTT समाधान के साथ इलाज किया गया था, और 3 घंटे के बाद MTT स्टॉपिंग सॉल्यूशन के 100 μL के साथ इलाज किया गया था। मापा सेल व्यवहार्यता [84] के लिए पारंपरिक एमटीटी परख का उपयोग करते हुए, 570 एनएम पर अवशोषण को एक रीडर (बायोटेक इंस्ट्रूमेंट्स, वीनोस्की, वीटी, यूएसए) का उपयोग करके मापा गया था।

अर्ध-मात्रात्मक आरटी-पीसीआर और मात्रात्मक रीयल-टाइम पीसीआर द्वारा 4.4.एमआरएनए विश्लेषण

HaCaT कोशिकाओं का उपचार Q-3-G（5-30 μM） या रेटिनॉल（10ug/mL） के साथ 12 घंटे के लिए किया गया था। TRI अभिकर्मक का उपयोग करके आरएनए अवक्षेपित किया गया था जैसा कि पहले बताया गया था [85]। पूरक डीएनए को संश्लेषित करने के लिए एक सीडीएनए संश्लेषण किट का उपयोग किया गया था। आरटी-पीसीआर विशिष्ट रिवर्स और फॉरवर्ड प्राइमरों का उपयोग करके आयोजित किया गया था। आरटी-पीसीआर और रीयल-टाइम पीसीआर के लिए प्राइमर तालिका 1 में सूचीबद्ध हैं।

4.5. डीपीपीएच परख

Q-3-G की मौलिक मैला ढोने की क्षमता का आकलन करने के लिए DPPH परख का उपयोग किया गया था। मेथनॉल का उपयोग DPPH को 250 μM की अंतिम सांद्रता में भंग करने के लिए किया गया था। फिर, DPPH का 475 एमएल था

30 मिनट के लिए 5 एमएल Q-3-G（0-40 μM） या AA（500 mM）at37 डिग्री के साथ प्रतिक्रिया की। सकारात्मक नियंत्रण एए था। DPPH मैला ढोने के प्रभाव और गणना का निर्धारण पहले वर्णित [86] के अनुसार किया गया था।

4.6.ABTS परख

जैसा कि पहले बताया गया था, एक ABTS परख की गई [72]। संक्षेप में, 7.4 मिमी एबीटीएस समाधान और 2.4 मिमी पोटेशियम पर्सल्फेट समाधान के बराबर मात्रा में मिश्रित किया गया था और एबीटीएस कट्टरपंथी उद्धरण उत्पन्न करने के लिए रात भर कमरे के तापमान पर रखा गया था। ABTS समाधान 96-वेल प्लेट्स के प्रत्येक कुएं में Q-3-G（0-40 μM） या AA（500 mM） प्रति कुएं के साथ जोड़ा गया था। मिश्रण 30 मिनट के लिए 37 डिग्री पर ऊष्मायन किया गया था, और फिर 730 एनएम पर उनका अवशोषण मापा गया था।

4.7. फ्लो साइटोमेट्री द्वारा सेलुलर आरओएस परख

इंट्रासेल्युलर आरओएस के गठन की जांच के लिए, एक ऑक्सीकरण-संवेदनशील डाई, 2',7'-डाइक्लोरोडिहाइड्रोफ्लोरेसिन डायसेटेट (डीसीएफडीए) का उपयोग किया गया था। HaCaT कोशिकाओं को यूवी के संपर्क में लाया गया था, और फिर कोशिकाओं को काटा गया और 30 मिनट के लिए 30 मिनट के लिए 30 मिनट के लिए 300 उल पीबीएस के साथ 300 उल पीबीएस के साथ अंधेरे में फिर से जोड़ा गया। कोशिकाओं को तब पीबीएस से धोया गया था और एक बेकमैन साइटोफ्लेक्स फ्लो साइटोमीटर (बेकमैन कल्टर, ब्रे, सीए, यूएसए) द्वारा प्रतिदीप्ति को 485/535 एनएम पर मापा गया था।

4.8.पश्चिमी धब्बा विश्लेषण

HaCaT कोशिकाओं को 6 × 10 डिग्री कोशिकाओं / एमएल के घनत्व पर रखा गया था। रातोंरात ऊष्मायन के बाद, Q-3-G（0-10 μM） या रेटिनॉल 10 ug/mL） के विभिन्न सांद्रता को जोड़ा गया और आगे 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया। प्रोटीन की तैयारी और पूरे सेल lysates का प्रदर्शन पहले [87] के रूप में किया गया था। जून, JNK, MKK4, TAK1, p50, p65, IKK, IkB, Src, और Akt के कुल रूप और फॉस्फोराइलेटेड रूप का पता लगाने के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग किया गया था, जिनकी कल्पना रसायनयुक्त अभिकर्मकों [88] के साथ की गई थी।

4.9. मेलेनिन सामग्री और स्राव विश्लेषण

B16F10 कोशिकाओं को 2 × 10 डिग्री कोशिकाओं / एमएल के घनत्व पर 12- अच्छी तरह से प्लेटों में डाला गया और रात भर इनक्यूबेट किया गया। संस्कृति माध्यम को Q-3-G（10-20 μM） या arbutin 1 mM） के साथ पूरक ताजा माध्यम के लिए बदल दिया गया था। मेलानिन उत्पादन को 48 घंटे के लिए a-MSH (100 एनएम) से प्रेरित किया गया था। मेलेनिन स्राव परख के लिए, 475 एनएम पर ऑप्टिकल घनत्व मापा गया था। बाद में, कोशिकाओं को इंट्रासेल्युलर मेलेनिन सामग्री का निर्धारण करने के लिए काटा गया, कोशिकाओं को लाइस करने और सेंट्रीफ्यूजेशन (12, 000 आरपीएम, 5 मिनट) द्वारा उन्हें पिलाने के लिए एक लसीका बफर का उपयोग किया गया। केंद्रित सेल छर्रों को 100 एमएल घुलने वाले बफर (1 एम NaOH, 10 प्रतिशत डीएमएसओ) में भंग कर दिया गया और 55 डिग्री पर पिघला दिया गया। एक ऑप्टिकल घनत्व रीडर [89] का उपयोग करके अवशोषण को 405 एनएम पर मापा गया था।

4.10.यूवीबी विकिरण

HaCaT कोशिकाओं को 1 × 105 कोशिकाओं / एमएल के घनत्व पर 6- सीरम-मुक्त एमईएम का उपयोग करके अच्छी तरह से प्लेटों में डाला गया और 24 घंटे भुखमरी के अधीन किया गया। एचसीएटी कोशिकाओं को 30 मिनट के लिए जी -3- क्यू के साथ पूर्व-उपचार किया गया और फिर यूवीबी विकिरण। फिर, HaCaT कोशिकाओं को PBS से धोया गया और UVB विकिरण (UVBLamp BLX -312, विल्बर लूरमैट, फ्रांस) के संपर्क में लाया गया। यूवीबी विकिरण की ऊर्जा 30 एमजे/सेमी2²【90】 थी।

4.11.H2O2 उपचार

HaCaT कोशिकाओं को 6-अच्छी तरह से प्लेटों में डाला गया और 24 घंटे भुखमरी के अधीन किया गया- सीरम-मुक्त एमईएम। कोशिकाओं को Q-3-G（5-10 μM के विभिन्न सांद्रता के साथ दर्शाया गया था और 30 मिनट के बाद H2O2 500 μM） के साथ 12 घंटे के लिए ऊष्मायन किया गया था।

4.12. लूसिफ़ेरेज़ रिपोर्टर जीन परख

HEK293T कोशिकाओं को 3 × 10 डिग्री कोशिकाओं / एमएल के घनत्व पर 24-वेल प्लेट्स में रखा गया था। HEK293T कोशिकाओं को AP-1-ल्यूक या NF-kB-Luc और b-galactosidase युक्त 2 कुरूप प्लास्मिड के साथ स्थानांतरित किया गया था, जो पॉलीएथिलीनिमाइन [91] को नियोजित करता है। ऊष्मायन के 24 घंटे के बाद, कोशिकाओं को एक और 24 घंटे के लिए क्यू -3-जी（5-10 μM） या रेटिनोल（10 कुरूप/एमएल） के साथ इलाज किया गया था। ल्यूसिफरेज परख एक ल्यूमिनोमीटर द्वारा किया गया था, प्रत्येक नमूने के अवशोषण पर 475 एनएम पर एक स्पेक्ट्रोमैक्स 250 माइक्रोप्लेट रीडर (आणविक उपकरण, सैन जोस, सीए, यूएसए) का उपयोग करके मापा गया था, जैसा कि पहले [92] में बताया गया था।

4.13. सेल आकृति विज्ञान शूटिंग

HaCaT कोशिकाओं को 1 × 10 डिग्री कोशिकाओं/एमएल के सेल घनत्व पर 6-वेल प्लेट्स में रखा गया था। एचसीएटी कोशिकाओं का इलाज जी -3- क्यू के साथ 30 मिनट और फिर यूवीबी विकिरण के साथ किया गया। 24 घंटे के बाद, 4 ×, 10 ×, और 20 × माइक्रोस्कोप वस्तुनिष्ठ तस्वीरें ली गईं (ओलिंप, टोक्यो, जापान)।

4.14. सांख्यिकीय विश्लेषण

सभी डेटा को कम से कम तीन स्वतंत्र प्रयोगों के औसत ± मानक विचलन के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। मान-व्हिटनी परीक्षण और छात्र के t -est का उपयोग समूहों के बीच सांख्यिकीय अंतर की तुलना करने के लिए किया गया था। एक पी-मान<0.05 was="" regarded="" as="" statistically="" significant.="" all="" statistical="" tests="" were="" carried="" out="" using="" spss(ver.25,="" spss="" inc.,="" chicago,="" il,="">

5। निष्कर्ष

हमारे शोध से पता चला है कि Q-3-जीएक्सहिबिटेड एंटी-इंफ्लेमेटरी और एंटीऑक्सीडेंट गतिविधियां यूवीबी विकिरण और एचओ, एक्सपोजर के तहत ऑक्सीडेटिव तनाव और सूजन के कारकों से बचाती हैं। हमने यह भी प्रदर्शित किया कि Q-3-G में HaCaT कोशिकाओं में मॉइस्चराइजर-उत्तेजक क्षमता होती है। Q-3-G के एंटीमेलानोजेनेसिस प्रभाव के अलावा, यह -MSH-प्रेरित B16F10 में मेलेनिन स्राव को बाधित करने के लिए दिखाया गया था। अंत में, एपी -1 और एनएफ-केबी सिग्नलिंग मार्ग के सक्रियण के माध्यम से क्यू -3- जी के प्रभाव की मध्यस्थता की गई। HaCaT मानव केराटिनोसाइट्स कोशिकाओं और B16F10 murine मेलेनोमा कोशिकाओं में Q-3-G की त्वचा-सुरक्षात्मक गतिविधियों को चित्र 5 में संक्षेपित किया गया है। इस अध्ययन ने स्थापित किया कि Q-3-G अपने विरोधी भड़काऊ के कारण प्रभावी हो सकता है, एनएफ-केबी और एपी-1 मार्गों के सक्रियण के माध्यम से मानव केराटिनोसाइट्स और मेलेनोमा कोशिकाओं में एंटीऑक्सिडेंट, मॉइस्चराइजिंग और एंटीमेलानोजेनेसिस गुण। निष्कर्ष में, परिणाम स्पष्ट रूप से इंगित करते हैं कि इस संयुग्म मेटाबोलाइट में त्वचा कोशिकाओं की रक्षा करने की क्षमता है। विवो मॉडल में विभिन्न प्रकार के Q-3-G के प्रभाव को मान्य करने के लिए आगे की जांच की आवश्यकता है, विशेष रूप से त्वचा सुरक्षात्मक मॉडल के संबंध में।

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